宮頸疾病診治中高危型HPV分型檢測(cè)的應(yīng)用價(jià)值研究

王金梅 陳麗

【摘?要】 目的：研究高危型HPV分型檢測(cè)應(yīng)用于宮頸疾病診治中的價(jià)值。方法：以2017年4月至2018年4月本院接受宮頸癌篩查的1000例患者為對(duì)象，均經(jīng)實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）在收集宮頸脫落細(xì)胞后進(jìn)行高危型HPV分型檢測(cè)，通過(guò)陰道鏡方法檢查陽(yáng)性檢出者，異常表現(xiàn)患者進(jìn)一步接受多點(diǎn)活檢，探討高危型HPV感染和宮頸疾病之間的相關(guān)性。結(jié)果：共檢出高危型HPV亞型13種，1000例患者中有288例檢出存在高危型HPV感染占28.80%，有245例為單一感染，有43例為多重感染;52、58、16是排前三位的HPV感染亞型;宮頸病變級(jí)別越高，高危型HPV陽(yáng)性率也越高;宮頸病變級(jí)別的升高，HPV病毒載量會(huì)逐漸升級(jí)。結(jié)論：高危型HPV分型檢測(cè)應(yīng)用于宮頸疾病診治中價(jià)值突出。

【關(guān)鍵詞】 高危型HPV;宮頸疾病;診治;分型檢測(cè)

宮頸癌在我國(guó)以及全世界都屬于發(fā)病率較高的一類女性惡性腫瘤，發(fā)展中國(guó)家宮頸癌的發(fā)生率要顯著高于發(fā)達(dá)國(guó)家，宮頸癌導(dǎo)致的患者死亡率也處于較高水平[1]。當(dāng)前臨床發(fā)現(xiàn)的人乳頭瘤病毒（HPV）分型達(dá)150個(gè)以上，高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌前病變以及宮頸癌出現(xiàn)的獨(dú)立條件，低危型的HPV可能導(dǎo)致生殖道尖銳濕疣。為了提升宮頸疾病的診斷率，增加對(duì)宮頸疾病的認(rèn)識(shí)，本研究具體分析宮頸疾病診治中高危型HPV分型檢測(cè)的應(yīng)用價(jià)值。

1?資料與方法

1.1?基礎(chǔ)資料

以本院2017年4月至2018年4月接受宮頸癌篩查的1000例患者為對(duì)象。年齡平均（39.28±10.36）歲，年齡32～66歲。全部患者均接受高危型HPV分型檢測(cè)，對(duì)異常患者實(shí)施陰道鏡下的多點(diǎn)活檢，同時(shí)對(duì)高危型HPV感染和宮頸疾病之間的相關(guān)性進(jìn)行分析。

1.2?方法

本院選購(gòu)的高危型HPV分型核酸測(cè)定試劑盒能夠?qū)Ω呶Ｐ虷PV亞型中的13種進(jìn)行檢測(cè)，具體為16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68，另外檢測(cè)需要用到實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀、宮頸脫落細(xì)胞取樣器。

在宮頸口插入專用宮頸刷，放置5s之后進(jìn)行6圈的順時(shí)針旋轉(zhuǎn)，取出宮頸刷置于宮頸脫落細(xì)胞取樣器中，存放于4℃的溫度下，保證在24h之內(nèi)送至進(jìn)行檢測(cè)，嚴(yán)格依據(jù)試劑盒說(shuō)明書完成每項(xiàng)檢測(cè)操作。借助PCR結(jié)合Tagman技術(shù)分別通過(guò)HPV 13種型別的特異性引物及熒光探針，分型以及定性檢測(cè)HPV 13種型別的特異性DNA核酸片斷。檢測(cè)的方法主要包括DNA提取、PCR反應(yīng)模板制備、PCR擴(kuò)增、熒光檢測(cè)。

1.3?高危HPV載量定性標(biāo)準(zhǔn)

ct值是單位體積的樣本DNA總量，也就是單個(gè)細(xì)胞內(nèi)DNA量×單位體積樣本中細(xì)胞數(shù)。+：ct值≥30;++：24≤ct值<30;+ + +：ct值<24。HPV負(fù)荷量為ct值與DNA水平的比值，DNA水平表示為單位體積樣本數(shù)，所以ct值可以將HPV負(fù)荷量反映出來(lái)。

1.4?統(tǒng)計(jì)方法

通過(guò)SPSS 22.0軟件對(duì)本研究獲取的全部結(jié)果實(shí)施分析，[n（%）]表示計(jì)數(shù)資料，行χ2檢驗(yàn)，通過(guò)Spearman相關(guān)分析法開展相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)果

2.1?高危型HPV亞型分布

共檢出高危型HPV亞型13種，1000例患者中有288例檢出存在高危型HPV感染，占28.80%，其中有245例為單一感染，有43例為多重感染。52、58、16是排前三位的HPV感染亞型。

2.2?高危型HPV感染和宮頸病變的相關(guān)性

288例存在高危型HPV感染的患者中有256例有活檢病理資料，從下表可以得知，宮頸病變級(jí)別越高，高危型HPV陽(yáng)性率也越高（P<0.05）。

2.3?高危型HPV病毒載量和宮頸疾病的相關(guān)性

從下表3可知，隨著宮頸病變級(jí)別的升高，HPV病毒載量逐漸升級(jí)，Spearman相關(guān)系數(shù)為0.237，P<0.05。

3?討論

本研究顯示高危型HPV感染率達(dá)到28.80%，略高于其他報(bào)道，考慮是由于不同檢測(cè)方式、不同環(huán)境、不同地域、不同受檢人群影響所致。高危型HPV感染亞型分布存在地域性特點(diǎn)，全球主要亞型是16型，另外18型、45、31、33型也占有較大比重。南美地區(qū)的亞型主要是16、18、58型，歐美地區(qū)的亞型主要是33、16、18型，而我國(guó)較多出現(xiàn)的亞型為31、58、52、18、16型，從我國(guó)具體地區(qū)來(lái)看，四川前5位亞型為16、58、52、33、18型，新疆前五位亞型為16、58、18、52、45型，廣西前四位亞型為52、18、58、33型，上海前五位亞型為18、31、52、33、58、16型。

本研究檢出的13種亞型在分布上的具體排序?yàn)?2、58、16、56、51、39、18、33、68、31、59、45、35型，其中主要感染型是52型，之后為58型以及16型，18、33、31型這一我國(guó)較多出現(xiàn)的亞型在本研究中分別位于第七位、第八位以及第十位。從結(jié)果可以得知，本地區(qū)的高危型HPV亞型在分布上存在地域性特征，這一結(jié)果能夠提供給該地區(qū)宮頸癌防治以有效的流行病學(xué)依據(jù)。當(dāng)前臨床應(yīng)用的宮頸癌疫苗能夠有效保護(hù)HPV16型以及HPV18型，在往后應(yīng)該注重更多型的宮頸癌疫苗的研制，為地區(qū)宮頸癌防治提供更有效的方法。

部分研究認(rèn)為HPV負(fù)荷量和宮頸病變的具體嚴(yán)重程度存在相關(guān)性，HPV病毒載量上升，會(huì)相應(yīng)升高宮頸病變CINⅡ～Ⅲ以上級(jí)別出現(xiàn)的可能性[2]。還有研究發(fā)現(xiàn)，高危型HPV病毒載量負(fù)荷、宮頸病變程度沒(méi)有完全相關(guān)性，部分高度宮頸病變患者HPV病毒負(fù)荷量較低[3]。本研究結(jié)果顯示，病毒載量越高，宮頸病變的級(jí)別越高，更傾向于前一種觀點(diǎn)，因此針對(duì)高病毒載量的患者，必須做好宮頸高度病變的防范。

綜上所述，宮頸病變主要為單一感染，宮頸病變級(jí)別的上升會(huì)升高高危型HPV的陽(yáng)性率，也會(huì)升高病毒載量。宮頸疾病診治中進(jìn)行高危型HPV分型檢測(cè)有助于提供流行病學(xué)依據(jù)，指導(dǎo)保健工作的開展。

參考文獻(xiàn)

[1] 張靜，郭建巍，陳昌國(guó)，等.北京市3221例門診患者HPV13個(gè)高危型別分型的實(shí)驗(yàn)研究[J].分子診斷與治療雜志，2017，09（01）：46-49.

[2] 王麗娜，任艷，牟路萌，等.新疆北疆部分地區(qū)HPV的流行情況及高危型HPV16、18與宮頸病變的關(guān)系[J].石河子大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2016，34（01）：58-62.

[3] 陳海迎，鄭小冬，鄭建瓊，等.高危型人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA檢測(cè)在宮頸人乳頭瘤病毒陽(yáng)性人群中的分流價(jià)值[J].醫(yī)學(xué)研究雜志，2016，45（05）：141-145.