人工栽培蒼術的含量測定

張宏蓮 孫輯凱 李宏鈴 劉玉露

摘 ? 要：對人工栽培蒼術進行檢測，與市售蒼術飲片比較，用以評判栽培品的質(zhì)量，用于衡量人工栽培的技術成熟程度。采用薄層色譜法（TLC）鑒別人工栽培品是否含有指標性成分，采用高效液相色譜法（HPLC）對指標性成分進行含量測定，并進行方法學考察。經(jīng)TLC法鑒定，蒼術栽培品中含有蒼術素，且含量測定結果顯示，連鎖藥店市售北蒼術飲片中蒼術素的含量分別為1.1671%、0.7611%、0.7326%，蒼術栽培品中蒼術素的含量為0.8366%。人工栽培的蒼術含有指標性成分，且符合法定標準的要求，提示蒼術的人工栽培技術基本成熟，可擬應用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。

關鍵詞：人工栽培 ?蒼術素 ?HPLC ?TLC ?含量測定

中圖分類號：R283 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文章編號：1674-098X（2019）02（c）-0240-02

蒼術是菊科蒼術屬植物蒼術的根莖，在我國分布廣泛，主要產(chǎn)自內(nèi)蒙古自治區(qū)東北部、山西省以及東北三省[1-2]，在我國有悠久的臨床應用歷史。相關醫(yī)藥學理念指出，北蒼術具有獨特的化學成分和較為顯著的的藥理活性，目前，已有研究表明北蒼術具有良好的抗?jié)?、抗心律失常、降血壓、利尿、保肝、抗炎等作用[3-4]，臨床應用廣泛，致使野生蒼術的資源匱乏，因此人工栽培蒼術是必要的選擇，具有現(xiàn)實意義。

人工栽培技術的應用是解決市場上蒼術窘境的有效途徑，但是，仿野生品的質(zhì)量有待于借助實驗手段予以評價。本實驗依據(jù)2015版《中國藥典》[5]，以連鎖藥店市售的蒼術飲片為衡量標尺，以指標性成分為標準，對人工栽培的蒼術進行鑒別和含量測定，客觀地評價栽培蒼術的質(zhì)量，以期反映栽培技術的效果，為更合理開發(fā)中草藥資源，更合理控制中草藥市場提供實驗依據(jù)。

1 ?實驗材料

儀器：Waters E2695高效液相色譜儀（美國沃特世科技有限公司）、手動中藥切片機（溫嶺市林大機械有限公司）、MDF-492超低溫冰箱（日本三洋公司）、高速多功能粉碎機（永康市敏業(yè)工貿(mào)有限公司）、PALL水純化系統(tǒng)（Pall Corporation公司）、ML203T/02十萬級電子天平（梅特勒--托利多）。

試劑：甲醇（色譜級）、石油醚（60～90℃）和丙酮（分析純）。

實驗樣品：栽培品標記為CZ;隨機選購蒼術飲片，分別標記為CZ1、CZ2、CZ3，對照品為蒼術素，采購于中國食品藥品檢定研究院。

2 ?實驗方法

2.1 待測溶液

TLC對照溶液：0.2mg·mL-1蒼術素甲醇溶液，TLC樣品溶液：以生藥量計，為0.08g·mL-1甲醇溶液。

HPLC對照溶液：0.2μg·mL-1蒼術素甲醇溶液，HPLC樣品溶液：以生藥量計，為0.004g·mL-1甲醇溶液。

2.2 TLC鑒別

照《薄層色譜法檢驗標準操作程序》（附錄ⅥB）試驗[5]，吸取供試品溶液6μL與對照品溶液2μL，將供試品溶液與對照品溶液分別通過毛細管點于同一個硅膠G薄層板上，采用石油醚（60～90℃）-丙酮（9：2）作為展開劑，展開，取出，晾干，往硅膠G薄層板上噴10%硫酸乙醇溶液，放入烘箱加熱，直至斑點顯色清晰后取出。觀察薄層色譜板，在與對照品色譜同一高度的位置上，應顯示相同顏色的斑點。

2.3 HPLC含量測定

2.3.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18（2）（250×4.6mm，5μL）;流動相：A：甲醇，C：水，按A：C=79：21;進樣量：10μL;流速：1mL·min-1;檢測波長：340nm。

2.3.2 含量測定

分別精密吸取HPLC樣品溶液20μL，分別進樣3次，按“2.3.1”項下色譜條件，分別測定，計算不同樣品中蒼術素的含量。

3 ?實驗結果

3.1 TLC鑒別結果

通過觀察對比，發(fā)現(xiàn)在薄層板上有若干斑塊，其中在與對照品溶液色譜對應的位置上，顯墨綠色斑塊，其中CZ1和CZ2斑塊顏色較深，CZ比CZ3樣品顏色深。

3.2 含量測定結果

經(jīng)HPLC測定，CZ蒼術素的含量為0.8366%，CZ1、CZ2、CZ3中蒼術素的含量分別為1.1671%、0.7611%、0.7326%，均高于2015年版《中國藥典》一部正文的規(guī)定（>0.30%），如圖1所示。

4 ?討論

表觀鑒別常常通過觀察外觀、斷面顏色、油室的數(shù)量、藥材的氣味等方式來判定北蒼術的品質(zhì)優(yōu)劣，在本實驗中，我們采用TLC以及HPLC方法，簡要、客觀地直接對人工栽培蒼術進行評價，方法簡潔，適用于基層食藥檢測。

通過TLC法的鑒定與HPLC法檢測，我們發(fā)現(xiàn)，不同的來源，北蒼術中蒼術素的含量也是不同的，表明生態(tài)環(huán)境或者炮制方法是影響藥材質(zhì)量的因素，同時，向我們提示在今后的人工栽培過程中，需要注意調(diào)控土壤、光照、水分、施肥及防蟲治蟲等影響這類經(jīng)濟農(nóng)作物質(zhì)量的因素，以實現(xiàn)增產(chǎn)保量的目的。

5 ?結語

本實驗中，人工栽培蒼術含有指標性成分，與市售同類飲片相比，蒼術素的含量居中，且高于法定藥品標準的規(guī)定，提示蒼術栽培品具有市場競爭力，人工栽培技術可擬被推廣。

參考文獻

[1] 王強，林昌松.論經(jīng)方中的白術或為蒼術[J].中華中醫(yī)藥雜志，2017（5）：2043-2046.

[2] Plengsuriyakarn T， Matsuda N， Karbwang J， et al. Anticancer Activity of Atractylodeslancea（Thunb.） DC in a Hamster Model and Application of PET-CT for Early Detection and Monitoring Progression of Cholangiocarcinoma [J]. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention Apjcp，2015，16（15）：6279.

[3] 楊靖，彭晶晶，蘆夏陽，等.蒼術的研究進展[J].陜西農(nóng)業(yè)科學，2018，64（4）：77-80.

[4] 陳佳，解小霞，劉合剛.幾個道地產(chǎn)區(qū)茅蒼術指紋圖譜及蒼術素含量測定研究[J].中國實驗方劑學雜志，2013， 19（10）：125-127.

[5] 國家藥典委員會.中國藥典（一部2015年版）[M].北京：化學工業(yè)出版社，2015.