白介素-17、趨化因子10在兒童自身免疫性肝炎中的變化及意義

唐瑩瑩

(湖北省武漢兒童醫(yī)院 消化內(nèi)科一病區(qū), 湖北 武漢, 430015)

自身免疫性肝炎是一種以轉(zhuǎn)氨酶升高、自身抗體陽性、免疫球蛋白G(IgG)明顯升高的肝臟炎癥性疾病，病理組織學(xué)可表現(xiàn)為界面性肝炎、多小葉塌陷、匯管區(qū)漿細(xì)胞浸潤。該病可發(fā)生于各個(gè)年齡段，尤以中老年、青少年為主，女性和男性患病比例約為4∶1[1-2]。既往該病在兒童中的發(fā)病率較低，但近年來也有較多單中心報(bào)道[3-4]顯示，兒童自身性免疫性肝炎的發(fā)病率呈逐年升高趨勢。與成年人相比，兒童自身免疫性肝炎的臨床特點(diǎn)多表現(xiàn)為急性起病、進(jìn)展迅速，且免疫抑制治療效果好。

自身免疫性肝炎的發(fā)病機(jī)制至今仍未闡明，但較多研究[5-6]指出，遺傳易感性、分子模型學(xué)說、T淋巴細(xì)胞等細(xì)胞因子均參與自身免疫性肝損傷的發(fā)生。白介素-17(IL-17)是輔助性T細(xì)胞17(Th17)執(zhí)行主要生物功能的重要細(xì)胞因子，在一些變態(tài)反應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病中均有參與[7]。趨化因子(CXCL)是趨化免疫細(xì)胞定向遷移的一種細(xì)胞因子，有報(bào)道[8]稱CXCL可在較多自身免疫性疾病中發(fā)揮促炎作用，如自身免疫性甲狀腺炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。本研究觀察兒童自身免疫性肝炎患兒IL-17、趨化因子10(CXCL10)的變化，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2008年1月—2018年1月本院接診的80例自身免疫性肝炎患兒臨床資料，并設(shè)為觀察組。兒童自身免疫性肝炎臨床特點(diǎn)[9-10]: ① 轉(zhuǎn)氨酶明顯升高; ② 自身抗體陽性: Ⅰ型為抗核酸抗原抗體(ANA)和(或)抗平滑肌抗體(SMA)≥1∶20; Ⅱ型為抗肝腎微粒體抗體(anti-LKM-1)和(或)肝細(xì)胞漿1型抗體(ani-LC-1)為陽性; ③ IgG明顯升高; ④ 肝臟病理組織學(xué)顯示界面性肝炎、多小葉塌陷、匯管區(qū)漿細(xì)胞浸潤等表現(xiàn); ⑤ 肝臟病理炎癥程度分級1～4級，纖維化分期1～4期。

納入標(biāo)準(zhǔn): ① 具有兒童自身免疫性肝炎臨床特點(diǎn); ② 肝臟病理檢查顯示甲、乙、丙、丁、戊病毒性肝炎血清學(xué)檢查為陰性; ③ 銅蘭蛋白、α1抗胰蛋白酶結(jié)果正常; ④ 巨細(xì)胞病毒抗體(CMV IgM)、EB病毒抗體(EBV IgM)為陰性; ⑤ 年齡1～18歲; ⑥ 臨床資料完整。排除遺傳性疾病、病毒性肝炎、藥物性肝炎、脂肪肝、原發(fā)膽汁性肝硬化等。另選擇同期本院接受體檢的健康兒童60例作為對照組, 2組兒童一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 具有可比性。見表1。

表1 2組兒童一般資料比較

1.2 方法

采集所有受試者納入研究后第2天空腹靜脈血5 mL, 于室溫靜置2 h后，以3 000轉(zhuǎn)/min的速度離心10 min, 提取上層清液后置于低溫冷凍箱中儲存以備檢測，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的檢測使用速率法，總膽紅素(TBIL)的檢測為釩酸鹽法，試劑盒均購自上?？迫A生物工程股份公司。血清IL-17、CXGL10的檢測均使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進(jìn)行, IL-17試劑盒購于上海拜力生物科技有限公司，CXGL10試劑盒購于美國R&D公司。使用上海精科責(zé)任有限公司生產(chǎn)的CF-2245全自動(dòng)生化分析儀，操作方式嚴(yán)格按照儀器、試劑盒說明書實(shí)施。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0軟件包處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料均為正態(tài)分布，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率表示，行χ2檢驗(yàn)，血清IL-17、CXCL10、生化指標(biāo)以及兒童自身免疫性肝炎發(fā)生的相關(guān)性分析使用Pearson相關(guān)性分析，兒童自身免疫性肝炎的發(fā)病危險(xiǎn)因素采用Logistic回歸分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組生化指標(biāo)和血清IL-17、CXCL10比較

觀察組ALT、AST、TBIL、IgG、IL-17、CXCL10均顯著高于對照組(P<0.05), 見表2。

2.2 血清IL-17、CXCL10與相關(guān)生化指標(biāo)的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析顯示，血清IL-17與ALT、AST、TBIL、IgG均呈正相關(guān)(r=0.957、0.952、0.937、0.889,P<0.05), 血清CXCL10與ALT、AST、TBIL、IgG均呈正相關(guān)(r=0.957、0.950、0.944, 0.876,P<0.05), 見圖1。

表2 2組生化指標(biāo)和血清IL-17、CXCL10比較

ALT: 丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶; AST: 谷草轉(zhuǎn)氨酶; TBIL: 總膽紅素; IgG: 免疫球蛋白G; IL-17: 白介素-17; CXCL10: 趨化因子10。

與對照組比較, *P<0.05。

A: 血清IL-17與ALT; B: 血清IL-17與AST; C: 血清IL-17與TBIL; D: 血清IL-17與IgG; E: 血清CXCL10與ALT;

F: 血清CXCL10與AST; G: 血清CXCL10與TBIL; H: 血清CXCL10與IgG

圖1 血清IL-17、CXCL10與相關(guān)生化指標(biāo)的相關(guān)性散點(diǎn)圖

2.3 血清IL-17、CXCL10與兒童自身免疫性肝炎的相關(guān)性分析

將是否發(fā)生兒童自身免疫性肝炎作為自變量，將血清IL-17、CXCL10作為因變量，通過Pearson相關(guān)性分析顯示，血清IL-17、CXCL10與兒童自身免疫性肝炎的發(fā)生呈正相關(guān)(r=0.634、0.592,P<0.05)。通過Logistic回歸分析顯示，血清IL-17、CXCL10均是兒童自身免疫性肝炎發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05), 見表3。

表3 血清IL-17、CXCL10與兒童自身免疫性肝炎的

IL-17: 白介素-17; CXCL10: 趨化因子10。

3 討 論

相關(guān)數(shù)據(jù)[11]顯示，近年來兒童自身免疫性肝炎的發(fā)病率為2%～5%, 最小發(fā)病年齡為6個(gè)月，并呈逐漸升高趨勢。目前對于兒童自身性免疫肝炎尚無準(zhǔn)確標(biāo)準(zhǔn)，在成人評分系統(tǒng)中的簡易評分標(biāo)準(zhǔn)難以區(qū)分自身免疫性肝炎和自身免疫性膽管炎，因此不適用于兒童診斷。近年來，臨床學(xué)者[12-13]總結(jié)兒童自身性免疫肝炎的特點(diǎn)主要有: ① 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)轉(zhuǎn)氨酶升高、IgG升高, ANA和(或)抗線粒體抗體(AMA)陽性或抗LKM-1陽性，但兒童自身抗體滴度低于成年人; ② 組織學(xué)呈界面性肝炎、多小葉塌陷、匯管區(qū)漿細(xì)胞浸潤等，浸潤炎細(xì)胞主要為淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞。兒童自身免疫性肝炎的臨床表現(xiàn)具有多樣化特點(diǎn)，有40%的患兒臨床癥狀和急性病毒性肝炎較為相似，如惡心嘔吐、厭食、進(jìn)行性黃疸加重等, 25%～40%的患兒起病隱匿，可出現(xiàn)乏力、反復(fù)黃疸、頭痛等不典型癥狀，診斷困難, 10%左右的患兒可因食管靜脈曲張出血、脾腫大、便血等相關(guān)門脈高壓并發(fā)癥首次就診，但確診時(shí)已存在肝硬化，且個(gè)別患兒病情較重且進(jìn)展快，若延誤診治極易誘發(fā)肝功能衰竭。

目前認(rèn)為肝臟抗原特異性調(diào)節(jié)T細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞的數(shù)量及功能平衡在肝臟自身免疫耐受中發(fā)揮著重要作用。Th17是近年來新發(fā)現(xiàn)的輔助T細(xì)胞亞型，在自身免疫性疾病和機(jī)體的防御反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用[14-15]。Th17主要分泌IL-17、IL-21、IL-22等，其中IL-17是最重要的一種分泌因子，也是執(zhí)行主要生物功能中的主要細(xì)胞因子，對中性粒細(xì)胞具有較強(qiáng)的趨化效果[16]。楊浦娟等[17]研究顯示，在較多肝臟疾病中，均可見IL-17的大量表達(dá)，且其可刺激肝臟分泌多種細(xì)胞因子，繼而加劇肝損傷程度。

CXCL10屬于Th1相關(guān)的CXC類趨化因子，主要介導(dǎo)著Th1型的炎癥反應(yīng)，參與淋巴組織發(fā)育、造血作用、炎癥反應(yīng)、新血管生成、白細(xì)胞遷移、傷口修復(fù)等，在正常免疫應(yīng)答過程中, CXCL10可通過驅(qū)使白細(xì)胞在受傷或感染部位定位，起到保護(hù)機(jī)體的作用，但在特定情況下，免疫細(xì)胞也會由于過度的活化而對正常組織產(chǎn)生攻擊，引發(fā)自身免疫性疾病[18]。李曉陽等[19]研究顯示，慢性乙型肝炎患者的肝組織和血清中CXCL10的表達(dá)明顯升高，且與ALT呈正相關(guān)，參與著肝功能損傷和疾病進(jìn)展。Czaja A J[20]研究也指出, CXCL10是肝病過程中將淋巴細(xì)胞聚集到肝臟的重要因素，進(jìn)一步加劇肝損傷，并認(rèn)為其用于診斷肝臟損傷程度和治療效果評價(jià)中具有積極意義。

本研究結(jié)果顯示，在兒童自身免疫性疾病中血清IL-17、CXCL10表達(dá)明顯升高，與生化指標(biāo)ALT、AST、TBIL、IgG以及自身免疫性疾病的發(fā)生呈正相關(guān)，通過分析是由于IL-17可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞等分泌多種炎癥介質(zhì)和趨化因子，募集中性粒細(xì)胞產(chǎn)生大量炎癥反應(yīng)，而CXCL10對巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞也均具有趨化作用，二者共同參與著肝臟炎癥活動(dòng)，造成肝組織損傷，并促使疾病進(jìn)展。

綜上所述，兒童自身免疫性肝炎患兒血清IL-17、CXCL10的表達(dá)明顯升高，二者參與著肝臟炎癥活動(dòng)，在兒童自身免疫性肝炎病理損傷中發(fā)揮著重要作用。