強(qiáng)直性脊柱炎患者血清MMP-9、DKK-1水平與疾病活動(dòng)度的關(guān)系*

焦阿金,何川疆,許愛敏

(新疆喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,新疆喀什 844000)

強(qiáng)直性脊柱炎(AS)是以中軸脊柱關(guān)節(jié)為主要病變部位，并累及脊椎關(guān)節(jié)、外周關(guān)節(jié)、骶髂關(guān)節(jié)及其鄰近肌腱、韌帶等部位的慢性系統(tǒng)性炎性疾病[1]。該病主要的病理特征為肌腱附著點(diǎn)炎和韌帶骨贅形成，好發(fā)于20～30歲的青年，發(fā)病隱匿，早期僅表現(xiàn)為外周或腰骶部關(guān)節(jié)不適，往往被忽視，且易與其他脊柱或外周關(guān)節(jié)疾病相混淆，導(dǎo)致延誤診治，致使病情持續(xù)進(jìn)展，甚至出現(xiàn)勞動(dòng)力喪失，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，還給患者和社會帶來巨大的經(jīng)濟(jì)壓力[2]。最新的研究發(fā)現(xiàn)，基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、Dickopff相關(guān)蛋白-1(DKK-1)在AS的疾病發(fā)生和發(fā)展中具有重要的作用，但對于兩者與AS疾病活動(dòng)度的關(guān)系尚不清楚[3]。本研究對本院接診的145例AS患者進(jìn)行了研究，旨在探討MMP-9、DKK-1與該病疾病活動(dòng)度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2015年1月至2017年1月本院風(fēng)濕免疫科接診的145例AS患者納入AS組，納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合AS的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；(2)年齡20～70歲；(3)病程超過半年；(4)經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)；(5)簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并累及關(guān)節(jié)或脊柱的其他疾??；(2)合并自身免疫性疾?。?3)既往有惡性腫瘤史；(4)哺乳期或妊娠期婦女；(5)合并甲狀腺等內(nèi)分泌系統(tǒng)疾??；(6)合并感染性疾??；(7)合并嚴(yán)重心、肝、肺等重要臟器疾病。其中男性127例，女性18例；平均年齡(37.26±4.85)歲；平均病程(4.15±1.03)年；平均體質(zhì)量指數(shù)(BMI)(25.78±4.07)kg/m2。另選擇同期性別、年齡、BMI相匹配的62例體檢健康者為對照組，年齡21～69歲，平均(37.08±4.81)歲；男性51例，女性11例；平均BMI(25.35±4.02)kg/m2；經(jīng)體檢確認(rèn)各項(xiàng)常規(guī)檢查結(jié)果均正常，排除風(fēng)濕性疾病、感染性疾病、感染性疾病及明顯器質(zhì)性疾病者。

1.2方法 根據(jù)AS疾病活動(dòng)指數(shù)(BASDAI)評分，將145例AS患者進(jìn)一步分為非活動(dòng)期組(BASDAI評分<4分)48例，活動(dòng)期組(BASDAI評分≥4分)97例。所有患者均給予24周的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)拮抗劑益賽普(上海中信國健藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字S20050059，25 mg/瓶)25 mg/次，2次/周。用非抗凝管采集對照組和AS組治療前后的外周靜脈血4 mL，靜置后35 r/min離心15 min，取上清液，存于-80 ℃冰箱待測。

1.3觀察指標(biāo) (1)生物學(xué)指標(biāo)：采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清C反應(yīng)蛋白(CRP)、MMP-9、DKK-1水平，試劑盒均購于美國R&D公司，嚴(yán)格按照說明書步驟進(jìn)行操作；采用普朗PUC-2068全自動(dòng)動(dòng)態(tài)血沉儀測定紅細(xì)胞沉降率(ESR)；比較AS組治療前與對照組各臨床指標(biāo)，比較活動(dòng)期組與非活動(dòng)期組血清MMP-9、DKK-1水平，比較AS組治療前后血清MMP-9、DKK-1水平。(2)疾病活動(dòng)度：采用BASDAI、AS功能指數(shù)(BASFI)、AS病情活動(dòng)度評分(ASDAS)觀察AS組治療前后的疾病活動(dòng)度，采用修改后的AS脊柱評分(mSASSS)評估AS組治療前后病情改善情況，由頸椎和腰椎評分共同組成，總分0～72分，評分越高表示脊柱損傷越嚴(yán)重[5]。(3)相關(guān)性分析：采用Pearson相關(guān)系數(shù)分析MMP-9、DKK-1與BASDAI、BASFI、ASDAS評分間的關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1AS組與對照組各臨床指標(biāo)比較 AS組ESR和血清CRP、MMP-9水平均高于對照組，血清DKK-1水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 AS組與對照組各臨床指標(biāo)比較

2.2活動(dòng)期組與非活動(dòng)期組血清DKK-1、MMP-9水平比較 活動(dòng)期組血清DKK-1低于非活動(dòng)期組，血清MMP-9水平高于非活動(dòng)期組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3AS組治療前后各指標(biāo)比較 AS患者治療后血清DKK-1、mSASSS評分均無明顯變化(P>0.05)，MMP-9和BASDAI、BASFI、ASDAS評分均明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表2 活動(dòng)期組與非活動(dòng)期組血清DKK-1、MMP-9水平比較

表3 AS組治療前后各指標(biāo)比較

2.4DKK-1、MMP-9與AS疾病活動(dòng)度的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示，DKK-1與BASDAI、BASFI、ASDAS評分無明顯相關(guān)性(P>0.05)；MMP-9與BASFI評分不相關(guān)(P>0.05)，與BASDAI、ASDAS評分呈正相關(guān)(P<0.05)。見表4。

表4 DKK-1、MMP-9與AS疾病活動(dòng)度的相關(guān)性分析

3 討 論

目前，AS的臨床診斷主要依賴骶髂關(guān)節(jié)X線檢查和患者臨床表現(xiàn)，但AS發(fā)病早期不易察覺，部分患者臨床表現(xiàn)較輕微，如低熱、消瘦、輕度貧血、乏力等，X線檢查也無明確的骶髂關(guān)節(jié)炎表現(xiàn)，極易被忽視，延誤病情，關(guān)節(jié)炎性反應(yīng)后出現(xiàn)纖維化和鈣化，形成骨贅，脊椎的柔軟度進(jìn)行性下降，嚴(yán)重者甚至出現(xiàn)竹節(jié)狀脊柱，伸展或彎曲困難[6]。過往AS疾病活動(dòng)度的預(yù)測主要以BASDAI為主，但BASDAI主觀性較強(qiáng)，常用的生物學(xué)指標(biāo)(ESR、CRP)雖能在一定程度上反映AS的疾病進(jìn)展，但靈敏度和特異度均較低，因此，臨床工作中，尋找能準(zhǔn)確預(yù)測AS疾病進(jìn)展和疾病活動(dòng)度的生物標(biāo)記物已迫在眉睫[7]。本研究對本院接診的145例AS患者進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)AS患者血清DKK-1呈低表達(dá)，MMP-9呈高表達(dá)。

Wnt信號通路在骨平衡和成骨細(xì)胞分化過程中極為關(guān)鍵，β-catenin能正向調(diào)節(jié)Wnt信號通路，增加骨密度，而DKK-1是Wnt信號通路的抑制因子，能拮抗β-catenin的的穩(wěn)定表達(dá)，降低骨密度，抑制骨形成[8]。劉亞等[9]研究表明，DKK-1能明顯抑制骨細(xì)胞的存活，對于關(guān)節(jié)炎大鼠，阻斷DKK-1能顯著降低骨細(xì)胞數(shù)量，減少骨吸收，下調(diào)骶髂關(guān)節(jié)融合。本研究中，AS組ESR、CRP水平明顯高于對照組，說明AS患者體內(nèi)存在明顯的炎性反應(yīng)，而AS組血清DKK-1明顯低于對照組，提示DKK-1在AS疾病進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。

AS的病理改變?nèi)缁ぱ?、附著點(diǎn)炎，其實(shí)是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)被蛋白水解酶不斷消化的過程，MMPs是細(xì)胞生長、遷移和ECM重塑的調(diào)節(jié)劑，在ECM的降解和重塑中具有重要作用，與AS的炎癥和骨質(zhì)破壞病理過程關(guān)系密切[10]。MMP-9是MMPs家族中以酶原形式分泌的一員，主要由中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、結(jié)締組織細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞和部分腫瘤細(xì)胞分泌，可破壞ECM中的Ⅳ、Ⅴ、Ⅸ、Ⅺ型膠原蛋白，破壞細(xì)胞屏障的完整性，增加血管通透性，激發(fā)炎性反應(yīng)，在關(guān)節(jié)炎、血管形成等多種病理過程中呈高表達(dá)[11]。本研究結(jié)果顯示，AS組血清MMP-9明顯高于對照組，提示MMP-9在AS的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。經(jīng)TNF-α拮抗劑治療24周后，AS組患者血清DKK-1、mSASSS評分無明顯變化，MMP-9和BASDAI、BASFI、ASDAS評分均明顯下降，提示TNF-α拮抗劑可能緩解病情，降低疾病活動(dòng)度，但對AS骨化進(jìn)程無明顯阻止作用。相關(guān)性分析顯示，DKK-1與BASDAI、BASFI、ASDAS評分無明顯相關(guān)性；MMP-9與BASFI評分不相關(guān)(P>0.05)，與BASDAI、ASDAS評分呈正相關(guān)；進(jìn)一步說明MMP-9與AS疾病活動(dòng)度有著良好的相關(guān)性，對疾病的好轉(zhuǎn)起預(yù)示作用。

4 結(jié) 論

綜上所述，AS患者血清DKK-1呈低表達(dá)，MMP-9呈高表達(dá)，TNF-α拮抗劑能明顯下調(diào)MMP-9水平，對DKK-1無明顯影響，MMP-9可反映AS的疾病活動(dòng)度，DKK-1與疾病活動(dòng)度無明顯相關(guān)，但DKK-1能在一定程度上反映AS的骨化進(jìn)程。