冠心病患者血小板參數(shù)、血清IL-6與冠脈病變程度的關(guān)系分析

夏銘蔚，邵正斌，梁國慶，戚先偉，王時(shí)光，楊帆，付軍

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病（CHD，冠心病），其以冠狀動(dòng)脈發(fā)生粥樣硬化性病理改變?yōu)樘卣?，進(jìn)而使冠狀動(dòng)脈管腔狹窄引起堵塞或者因斑塊侵蝕、破裂和急性血栓的形成導(dǎo)致心肌缺血、缺氧和壞死引起的心臟疾病[1]。最新發(fā)布的《中國心血管病報(bào)告2017》的調(diào)查顯示中國CHD死亡率自2012年以來處于上升趨勢，已逐漸成為危害人類健康的嚴(yán)重心腦血管疾病之一[2]。動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是導(dǎo)致冠心病病理發(fā)展的基礎(chǔ)，它是由多因素造成的一種慢性炎癥反應(yīng)。有研究人員發(fā)現(xiàn)白介素-6（IL-6）參與AS的發(fā)生發(fā)展，它主要通過體內(nèi)的各種信號(hào)通路因子來調(diào)控CHD的進(jìn)展[3]。有研究發(fā)現(xiàn)在血流急速時(shí)，血小板粘連在受損血管內(nèi)皮表面，在膠原纖維作用下發(fā)生纖維樣改變，同時(shí)釋放活性位物質(zhì)，與血管內(nèi)外脂質(zhì)沉積的共同作用下形成動(dòng)脈粥樣硬化斑，后期血小板活性不斷的增加可加速AS的進(jìn)展[4,5]。目前炎癥與血小板參數(shù)在CHD患者與冠狀動(dòng)脈病變程度的關(guān)系還未研究透徹。本研究主要探究CHD患者血小板參數(shù)、血清IL-6與冠脈病變程度的關(guān)系，旨在為臨床上利用生物標(biāo)記物考察CHD患者冠脈病變程度提供依據(jù)以及為CHD的預(yù)后預(yù)測提供一定思路。

1 資料與方法

1.1 研究對象及分組 于2015年9月~2018年2月選取272例安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院疑似冠狀動(dòng)脈病變者，經(jīng)冠狀動(dòng)脈造影，確診CHD患者204例（CHD組），另68例冠狀動(dòng)脈造影正常者為對照組。CHD組患者入選標(biāo)準(zhǔn)[6-8]：依據(jù)美國心臟病學(xué)會(huì)（ACC）和美國心臟協(xié)會(huì)（AHA）指南：主要冠狀動(dòng)脈中至少有一支血管病變直徑狹窄程度≥50%即為CHD。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有慢性心功能不全、急性心肌梗死或結(jié)構(gòu)性心臟病的患者。②患有慢性肝、腎病的患者。③急性腦卒中和惡性腫瘤的患者。本研究已經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者均自愿參加，且簽署知情同意書。

204例CHD患者中，穩(wěn)定型心絞痛（SAP）108例，非ST段抬高型急性冠脈動(dòng)脈綜合征（NSTE-ACS）76例和ST段抬高型心肌梗死（STEMI）20例。根據(jù)冠脈狹窄程度積分（Gensini）[9]評(píng)估冠脈病變嚴(yán)重程度，將CHD患者分為輕度AS組（Gensini＜25）98例、中度AS組（25≤Gensini＜50）78例和重度AS組（Gensini≥50）28例。

1.2 血小板參數(shù)、IL-6及生化指標(biāo)的測定 所有受試者均在入院次日清晨，空腹?fàn)顟B(tài)下抽取肘正中靜脈血4 ml，4000 rpm離心10 min，收集血清后-80℃超低溫冰箱保存，用于測定生化指標(biāo)、IL-6水平和血小板參數(shù)。利用自動(dòng)生化分析儀（貝克曼庫爾特AU5800）來檢測受試者血小板計(jì)數(shù)（PLT）、血小板分布寬度（PDW）、大血小板比率（P-LCR）、血小板平均體積(MPV)和血小板壓積（PCT）以及血清中三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、總膽固醇（TC）、空腹血糖（FBG）等指標(biāo)。采用ELISA試劑盒測定所有受試者血清中IL-6的水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，在酶標(biāo)儀上讀取相應(yīng)OD值，試劑盒來自上海晶抗生物工程有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。各組計(jì)量資料以（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，三組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LED的分析方法；計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用Pearson相關(guān)系數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CHD組與對照組基本資料及生化指標(biāo)比較 與對照組相比，CHD組在性別、年齡、TG、LDL、HDL、TC和FBG方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表1）。

2.2 CHD組與對照組血小板參數(shù)、血清IL-6水平比較 CHD組PLT低于對照組（P＜0.05），WPV、PDW、P-LCR和 IL-6水平高于對照組（P＜0.05），而PCT在兩組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表2）。

2.3 CHD患者各亞組血小板參數(shù)和血清IL-6的比較 NSTE-ACS組和STEMI組WPV、PDW和 IL-6水平高于SAP組（P＜0.05），PLT低于SAP組（P＜0.05），且STEMI組PDW高于NSTE-ACS組（P＜0.05）。三組間P-LCR和PCT的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），（表3）。

表1 CHD與對照組基本資料及生化指標(biāo)比較[（±s），n（%）]

表1 CHD與對照組基本資料及生化指標(biāo)比較[（±s），n（%）]

注：TG：三酰甘油；LDL：低密度脂蛋白；HDL：高密度脂蛋白；TC：總膽固醇；FBG：空腹血糖

項(xiàng)目 CHD組（n=204） 對照組（n=68） t/χ2值 P值男性 98（48.04） 30（44.12） 0.3150.674年齡（歲） 65.98±7.85 64.26±7.59 1.2490.117 TG（mmol/L） 3.33±1.08 3.21±0.97 1.1860.243 LDL（mmol/L） 2.13±0.87 1.99±0.80 0.8130.420 HDL（mmol/L） 1.68±0.58 1.59±0.52 1.1360.263 TC（mmol/L） 2.13±0.89 1.99±0.82 1.4640.150 FBG（mmol/L） 5.72±1.98 5.36±1.85 1.3190.194

表2 CHD與對照組在血小板參數(shù)和血清IL-6水平上的比較（±s）

表2 CHD與對照組在血小板參數(shù)和血清IL-6水平上的比較（±s）

注：PLT：血小板計(jì)數(shù)；WPV：血小板平均體積；PDW：血小板分布寬度；P-LCR：大血小板比率；PCT：血小板壓積；IL-6：血清白介素-6

分組 CHD組（n=204） 對照組（n=68） t值 P值PLT（×109） 224.56±50.92 247.81±45.77 -3.3410.002 WPV（fl） 9.02±1.82 8.26±1.93 2.9370.005 PDW（fl） 16.29±1.99 15.55±1.44 2.8280.007 P-LCR（%） 30.28±10.17 22.39±7.74 5.8640.000 PCT（%） 0.18±0.03 0.17±0.05 1.9830.054 IL-6（ng/L） 22.94±5.84 6.17±3.15 8.6630.000

2.4 Gensini評(píng)分各亞組血小板參數(shù)和血清IL-6的比較 中度AS組和重度AS組的WPV、PDW和 IL-6水平高于輕度AS組（P＜0.05），PLT水平低于輕度AS組（P＜0.05），且重度AS組的WPV、PDW和 IL-6水平高于中度AS組（P＜0.05）。三組間P-LCR和PCT的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），（表4）。

2.5 相關(guān)性分析 采用Pearson法分析顯示，CHD患者血清IL-6、WPV、PDW與Gensini評(píng)分成正相關(guān)（r=0.726、0.687、0691，P均＜0.05），PLT與Gensini評(píng)分成負(fù)相關(guān)（r=-0.544，P=0.024），但P-LCR和PCT與Gensini評(píng)分無相關(guān)性（P＞0.05）。而CHD患者IL-6與PLT成負(fù)相關(guān)（r=-0.372，P=0.039），與WPV、PDW成正相關(guān)（r=0.487、0.541、均P＜0.05），但與P-LCR和PCT無相關(guān)性（P＞0.05）。

3 討論

AS是CHD的發(fā)病基礎(chǔ)，且其發(fā)生發(fā)展過程相當(dāng)復(fù)雜，包括血管內(nèi)皮損傷，炎癥細(xì)胞浸潤，內(nèi)膜增厚和細(xì)胞外基質(zhì)聚集等[2,10]。血小板在血管內(nèi)膜受損下會(huì)粘附聚集形成血栓，而大量活性因子由于斑塊破裂而釋放出來進(jìn)一步加重了血栓的形成。所以血小板的活化參與了AS的發(fā)生發(fā)展過程，參與CHD進(jìn)展過程[11]。同時(shí)血小板參數(shù)和血小板形態(tài)的改變都會(huì)導(dǎo)致血小板活化進(jìn)而參與CHD進(jìn)展。MPV主要反映骨髓中巨核細(xì)胞的增生、代謝及血小板生成情況，它是血小板功能和活化的標(biāo)志，在動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的病理生理過程中起著重要的作用[12,13]。也有研究表明，MPV、PDW和P-LCR可以反映血液中血小板的活化狀態(tài)，與CHD的發(fā)生有密切關(guān)系[14]。PLT是影響急性心肌梗死預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可反映冠狀動(dòng)脈嚴(yán)重病變程度及預(yù)后情況[15]。而IL-6是重要的前炎癥細(xì)胞因子，可參與機(jī)體炎癥反應(yīng)，是促進(jìn)AS發(fā)生發(fā)展的重要介質(zhì)。IL-6可通過促進(jìn)巨噬細(xì)胞表面LDL受體的合成及巨噬細(xì)胞對LDL的攝取以加速脂質(zhì)的沉積，從而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣斑塊的形成?；蛲ㄟ^活化巨噬細(xì)胞，使其分泌單核細(xì)胞趨化蛋白，趨化中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞進(jìn)入血管內(nèi)皮下，從而參與斑塊的形成等方面來促進(jìn)AS的發(fā)展[16]。本研究主要考察CHD患者IL-6水平和血小板參數(shù)水平及各指標(biāo)與冠脈病變程度的關(guān)系。

本研究結(jié)果表明，CHD組PLT低于對照組，WPV、PDW和P-LCR水平高于對照組，在不同CHD組及不同Gensini評(píng)分患者中具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，CHD患者WPV、PDW與Gensini評(píng)分成正相關(guān)，PLT與Gensini評(píng)分成負(fù)相關(guān)。與Murat等[17]研究報(bào)道相似，說明了在血小板參數(shù)參與了CHD患者發(fā)生發(fā)展，血小板活化水平增加促進(jìn)了疾病的進(jìn)展?？赡艿脑?yàn)殡S著冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮的損傷和斑塊的破裂，血小板激活促進(jìn)血栓形成，導(dǎo)致PLT大量被消耗， PLT迅速下降，進(jìn)而骨髓中的巨核細(xì)胞代償性釋放新生血小板，這些新生血小板體積大，含有較豐富的糖原、蛋白質(zhì)、酶及血小板顆粒，從而導(dǎo)致MPV、PDW及P-LCR等指標(biāo)的升高[18]。

本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，CHD患者血清中IL-6水平顯著上升，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)隨著Gensini評(píng)分的增加，IL-6也逐漸增加。這可能是由于IL-6通過加速脂質(zhì)沉積、促進(jìn)單核細(xì)胞聚集在血管內(nèi)皮下、促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增生等途徑促進(jìn)AS斑塊的形成，使得病情逐漸惡化的結(jié)果[19]。進(jìn)一步相關(guān)性分析患者血清中IL-6與Gensini評(píng)分成正相關(guān)（r=0.726，P=0.000），提示血清IL-6參與CHD的發(fā)展，可一定程度反映CHD的病變程度。IL-6和血小板參數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，IL-6與PLT成負(fù)相關(guān)，與WPV和PDW成正相關(guān)。說明IL-6與WPV、PDW和PTL在促進(jìn)CHD發(fā)展中有協(xié)同作用?？赡艿臋C(jī)制為：一方面在AS中，血小板在受損血管表明發(fā)生粘附、聚集形成血栓。由于在血栓的形成過程中會(huì)消耗大量血小板，所以PLT降低。動(dòng)脈粥樣斑塊病變又會(huì)促使血小板的活化，導(dǎo)致血小板體積增大，進(jìn)而骨髓中巨核細(xì)胞增生、代謝增強(qiáng)，促使AS不斷形成。表現(xiàn)為WPV和PDW的增加。另一方面，IL-6可誘導(dǎo)肝細(xì)胞產(chǎn)生急性期反應(yīng)蛋白和血漿纖溶酶原激活物抑制物，從而促進(jìn)冠脈血栓的形成，進(jìn)而可血小板共同發(fā)揮血栓形成作用，激發(fā)一系列反應(yīng)促使AS產(chǎn)生。且IL-6通過促進(jìn)巨噬細(xì)胞對低密度脂蛋白的攝取使得血管內(nèi)外脂質(zhì)沉積增加，活化的血小板釋放蛋白樣因子來促進(jìn)巨噬細(xì)胞攝取氧化型低密度脂蛋白后形成泡沫細(xì)胞，在血小板與IL-6的共同作用下加速粥樣病變的進(jìn)展[20,21]。

表3 CHD患者各亞組血小板參數(shù)和血清IL-6的比較（±s）

表3 CHD患者各亞組血小板參數(shù)和血清IL-6的比較（±s）

注：PLT：血小板計(jì)數(shù)；WPV：血小板平均體積；PDW：血小板分布寬度；P-LCR：大血小板比率；PCT：血小板壓積；IL-6：血清白介素-6；與SAP組相比，aP＜0.05；與NSTE-ACS組相比，bP＜0.05

PLT（×109） 248.54±52.33 212.66±48.55a 194.29±57.03a 12.360 0.000 WPV（fl） 7.56±1.77 9.48±1.53a 10.70±1.25a 10.670 0.000 PDW（fl） 14.21±1.17 16.09±1.34a 20.73±1.56ab 18.220 0.000 P-LCR（%） 30.08±7.97 31.67±6.82 29.35±9.99 0.862 0.576 PCT（%） 0.18±0.02 0.17±0.04 0.18±0.05 0.946 0.478 IL-6（ng/L） 19.33±16.13 26.06±15.36a 30.58±16.10a 20.14 0.000

表4 Gensini評(píng)分各亞組血小板參數(shù)和血清IL-6的比較（±s）

表4 Gensini評(píng)分各亞組血小板參數(shù)和血清IL-6的比較（±s）

注：PLT：血小板計(jì)數(shù)；WPV：血小板平均體積；PDW：血小板分布寬度；P-LCR：大血小板比率；PCT：血小板壓積；IL-6：血清白介素-6；與輕度AS組相比，aP＜0.05；與中度AS組相比，bP＜0.05；

PLT（×109） 237.85±53.58 217.46±49.17a 197.82±46.48a 44.86 0 WPV（fl） 6.08±1.75 9.25±1.62a 19.08±1.24ab 56.65 0 PDW（fl） 12.18±1.23 16.22±1.49a 25.49±1.46ab 48.34 0 P-LCR（%） 30.75±7.67 30.88±7.96 31.55±7.37 0.972 0.268 PCT（%） 0.18±0.01 0.18±0.04 0.17±0.03 1.268 0.086 IL-6（ng/L） 10.45±16.35 17.68±14.93a 81.30±16.59ab 84.12 0

綜上所述，CHD患者血清中WPV、PDW、P-LCR和 IL-6水平升高，PLT降低。隨著冠狀動(dòng)脈病變程度的增加，WPV、PDW和 IL-6水平隨之升高，而PLT隨之降低。且血小板參數(shù)與IL-6在促進(jìn)CHD進(jìn)展中有著協(xié)同作用。血小板參數(shù)和IL-6可作為預(yù)測冠狀動(dòng)脈病變程度的指標(biāo)，為CHD患者的防治和預(yù)后提供一定的思路：即在臨床藥物治療上須兼具減輕炎癥，減少IL-6分泌與抗血小板聚集的功能。