基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討朱日亨滴丸治療冠心病的分子機(jī)制*

慕桂娟，陸景坤，王躍武，孫雨輝，那生桑，孫宇鑫，胡玉崇

(1.內(nèi)蒙古自治區(qū)包頭市中心醫(yī)院藥械科，包頭 014000；2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，呼和浩特 010059；3.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)新藥臨床前安全性評(píng)價(jià)中心，呼和浩特 010059；4.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，呼和浩特 010059； 5.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)蒙醫(yī)藥研究院，呼和浩特 010059；6.內(nèi)蒙古自治區(qū)烏蘭察布市察后右旗中心醫(yī)院信息科，烏蘭察布 012400；7.內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院，呼和浩特 010059)

朱日亨滴丸處方源于臨床驗(yàn)方，臨床上用于治療冠心病、“心刺痛”，療效顯著。朱日亨滴丸(曾用名朱日很滴丸)由廣棗、肉豆蔻、檀香、梔子、沉香等多味藥材組成，選藥組方基于蒙醫(yī)治療心刺痛理法：方中廣棗性味甘、酸而平；效重、膩。性味與效能鎮(zhèn)“赫依”，作為君藥。肉豆蔻性味辛而溫，主鎮(zhèn)司命“赫依”為臣藥。再加檀香性寒，清博熱，組成檀香三味主治心熱、心血熱。輔以止痛、清血熱沉香、梔子等藥材，具有清心火、活血化瘀、改善心功能的功效；用于心慌、氣短、胸悶煩躁。在臨床上用來(lái)治療冠心病、心絞痛等均有很好的療效。朱日亨組方中各單味藥多含有心血管系統(tǒng)藥效活性成分。例如廣棗中的黃酮、有機(jī)酸、酚酸能夠減輕心肌缺血-再灌注損傷[1]；酚酸成分沒(méi)食子酸能夠通過(guò)調(diào)節(jié)分裂素活化蛋白激酶9(mitogen-activated protein kinase 9，JNK2)和分裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，ERK)磷酸化抑制小鼠心肌肥厚和纖維化[2]；鞣花酸可以減輕大鼠全腦缺血/再灌損傷，對(duì)高血壓大鼠的心血管損傷有保護(hù)作用[3]；黃酮類成分兒茶素能夠通過(guò)Akt/mTOR途徑抑制神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞自噬和凋亡[4]。肉豆蔻揮發(fā)油成分能夠明顯減慢心率，降低心律失常的發(fā)生率[5]；肉豆蔻中四氫呋喃類木脂素愈創(chuàng)木素和machilin A 能活化AMPK，治療二型糖尿病等代謝綜合征；二芳基丁烷類木脂素肉豆蔻木酚素能活化MAPK，發(fā)揮抗炎作用；苯并四氫呋喃類木脂素Myrisfrageal A和B、licarin A 能抑制一氧化碳，發(fā)揮抗炎作用[6]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)其所強(qiáng)調(diào)的整體性與系統(tǒng)性和傳統(tǒng)醫(yī)藥整體觀與辯證論治不謀而合，近年來(lái)，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)已經(jīng)成功運(yùn)用于六味地黃丸、四物湯、復(fù)方丹參等經(jīng)典方劑的機(jī)制、配伍等研究中[7]。因此，本實(shí)驗(yàn)采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法初步探討蒙藥方劑朱日亨滴丸治療冠心病的分子作用機(jī)制和潛在活性成分。

1 方法

1.1朱日亨滴丸的化合物收集 文獻(xiàn)挖掘，中醫(yī)藥資料庫(kù)@Taiwan(http：//tcm.cmu.edu.tw/zh-tw/index.php)和Therapeutic Targets Database(TTD，http：//bidd.nus.edu.sg/group/cjttd/TTD_HOME.asp)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索收集整理朱日亨滴丸中廣棗、肉豆蔻、檀香中化學(xué)成分，中醫(yī)藥資料庫(kù)@Taiwan收集檢索沉香、阿魏等藥材的化學(xué)成分，如有糖苷類化合物脫葡萄糖基變?yōu)檐赵谢衔锝?jīng)中藥系統(tǒng)藥理學(xué)資料和分析平臺(tái)(TCMSP，http：//ibts.hkbu.edu.hk/LSP/tcmsp.php)進(jìn)行口服生物利用度(oral bioavailability，OB)和類藥性(drug similarity，DL)分析(TCMSP 網(wǎng)站標(biāo)準(zhǔn)：OB≥30%；DL≥0.18)，或Lipinski類藥五原則分析，收集篩選朱日亨滴丸候選化合物。

1.2“化合物-靶點(diǎn)-冠心病相關(guān)基因”關(guān)聯(lián)的建立 經(jīng)ChemBioOffice2011軟件將候選化合物轉(zhuǎn)化成MDL sdf.格式文件或 MOL2格式文件，上傳至PharmMapper數(shù)據(jù)庫(kù)(http：//lilab.ecust.edu.cn/pharmmapper/)進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，通過(guò)反向藥效團(tuán)匹配方法，搜尋潛在藥物靶點(diǎn)，預(yù)測(cè)化合物的生物活性。檢索UniProt數(shù)據(jù)庫(kù)(http：//www.uniprot.org/)，輸入U(xiǎn)niProt編號(hào)將蛋白校正為官方名稱，根據(jù)上述的數(shù)據(jù)庫(kù)檢索與轉(zhuǎn)化，獲得相關(guān)的蛋白信息。借助冠心病網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究平臺(tái)CHD@ZJU V2.0(http：//pharminfo.zju.edu.cn/chd)和OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)(http：//omim.org/)收集有文獻(xiàn)報(bào)道與冠心病發(fā)病機(jī)制相關(guān)的基因，進(jìn)行化合物靶點(diǎn)和冠心病相關(guān)基因比對(duì)，得到朱日亨滴丸與冠心病機(jī)制相關(guān)的靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)。

1.3通路獲取與分析 將通過(guò)Pharmmapper獲取的靶點(diǎn)導(dǎo)入MAS3.0(http：//bioinfo.capitalbio.com/mas3/)，條件選擇：Homo sapiens(Human)；Molecule Type：Protein；Database Symbols：UniProtKB；Functions：Gene，mRNA，Protein，GO，Pathway，CoregulatedGene，Disease，Interaction；Regulation Threshold：Up 2.0，Down 0.5。在提交得到的結(jié)果中，選擇pathway中的KEGG數(shù)據(jù)進(jìn)行通路注釋與分析，并得到相關(guān)的信息。

1.4構(gòu)建朱日亨滴丸的“化合物-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)模型 根據(jù)上述化學(xué)成分的靶點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果，應(yīng)用cytoscape3.5.0軟件構(gòu)建“化合物-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)。通過(guò)網(wǎng)絡(luò)分析，研究朱日亨滴丸的多靶點(diǎn)作用及其潛在治療作用的特異性。

1.5構(gòu)建朱日亨滴丸的“化合物-靶點(diǎn)-藥物”網(wǎng)絡(luò)模型 查詢Drugbank(https：//www.drugbank.ca/)和TTD數(shù)據(jù)庫(kù)，依據(jù)ATC分類(http：//www.drugbank.ca/atc)獲得所有美國(guó)食品藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)的治療冠心病的小分子西藥及其靶點(diǎn)信息。利用pharmmapper獲得的靶點(diǎn)與西藥的共靶信息，構(gòu)建“化合物-靶點(diǎn)-藥物”的關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)，該關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)包括朱日亨滴丸、治療冠心病的西藥、預(yù)測(cè)靶點(diǎn)和西藥共有的靶點(diǎn)。然后，利用已知作用機(jī)制的西藥在該網(wǎng)絡(luò)中分析朱日亨滴丸治療冠心病的可能機(jī)制。

2 結(jié)果

2.1朱日亨滴丸活性成分的潛在靶點(diǎn)信息 應(yīng)用Pharmmapper在線預(yù)測(cè)朱日亨滴丸化合物的靶點(diǎn)，通過(guò)冠心病相關(guān)靶點(diǎn)與Pharmmapper得到的靶點(diǎn)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，得到朱日亨滴丸化合物預(yù)測(cè)靶點(diǎn)與冠心病機(jī)制匹配的靶點(diǎn)共85個(gè)(總頻次為1044)，頻次為10次以上的靶點(diǎn)見(jiàn)表1，共38個(gè)靶點(diǎn)，頻次為671次，占總頻次的64.3%。

2.2朱日亨滴丸化學(xué)成分潛在靶點(diǎn)的通路富集 將朱日亨滴丸化學(xué)成分的所有預(yù)測(cè)靶點(diǎn)應(yīng)用MAS 3.0在線工具進(jìn)行KEGG通路注釋，得到相關(guān)通路87條(P<0.01)，其中與心血管疾病相關(guān)的有43條，前10條見(jiàn)表2。其中與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的為3條，包括VEGF信號(hào)通路(VEGF signaling pathway)、ErbB信號(hào)通路(ErbB signaling pathway)、MAPK信號(hào)通路(MAPK signaling pathway)；與細(xì)胞進(jìn)程相關(guān)的為3條，包括黏著斑(focal adhesion)、黏附連接(adherens junction)、肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架調(diào)節(jié)(regulation of actin cytoskeleton)；與內(nèi)分泌系統(tǒng)相關(guān)的為2條，包括胰島素信號(hào)通路(insulin signaling pathway)、PPAR信號(hào)通路(PPAR signaling pathway)；與免疫系統(tǒng)相關(guān)的為2條，包括Fc & RI信號(hào)通路(Fc epsilon RI signaling pathway)、T細(xì)胞受體信號(hào)通路(T cell receptor signaling pathway)；結(jié)果表明朱日亨滴丸可能通過(guò)調(diào)節(jié)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞進(jìn)程、內(nèi)分泌、免疫、代謝等多個(gè)途徑發(fā)揮治療冠心病的作用。

2.3朱日亨滴丸“化合物-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)模型 采用Cytoscape軟件建立朱日亨滴丸“化合物-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)模型，化合物、靶點(diǎn)以及通路結(jié)果的關(guān)聯(lián)關(guān)系直觀地呈現(xiàn)于圖1。通過(guò)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析朱日亨滴丸分子與靶蛋白的D-T 網(wǎng)絡(luò)特征，如網(wǎng)絡(luò)度、介數(shù)[8]。網(wǎng)絡(luò)模型分析發(fā)現(xiàn)，高網(wǎng)絡(luò)度化合物往往有較高的介數(shù)，而這些具有較高介數(shù)和網(wǎng)絡(luò)度的靶點(diǎn)提示可能在生物網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。

表1朱日亨滴丸化學(xué)成分的潛在靶點(diǎn)(頻次≥10)

Tab.1PotentialtargetofchemicalcomponentofZhuRihengdroppill(frequency≥10)

名稱靶點(diǎn)頻次酪氨酸蛋白磷酸酯酶非受體1型PTPN187視黃酸受體RXR-αRXRA70維生素D3受體VDR67醛糖還原酶AKR1B150雙特異性有絲分裂激活蛋白激酶1MAP2K149糖皮質(zhì)激素受體NR3C146雄激素受體AR41熱休克蛋白 HSP 90-αHSP90AA141性激素結(jié)合球蛋白SHBG40促分裂原活化蛋白激酶 14MAPK14393-磷酸肌醇依賴蛋白酶1PDPK139血清白蛋白ALB37凝血素F227脂肪酸結(jié)合蛋白FABP327基質(zhì)溶素-1MMP323cAMP特異性 3',5'-環(huán)磷酸二酯酶 4DPDE4D23中性白細(xì)胞彈性蛋白酶ELANE22細(xì)胞周期素-A2CCNA221肽基-脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶FKBP1A20血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體 2KDR20組織蛋白酶 KCTSK18半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3CASP314cAMP-依賴蛋白激酶催化亞基 αPRKACA13原癌基因酪氨酸蛋白激酶SrcSRC13二肽基肽酶Ⅳ DPP412雌激素受體βESR212

表2朱日亨滴丸潛在靶點(diǎn)富集與冠心病相關(guān)的通路

Tab.2EnrichedpathwaysofpotentialtargetassociatedwithcoronaryheartdiseaseforZhuRihengdroppill

通路分類p-值黏著斑細(xì)胞過(guò)程2.90×10-19胰島素通路內(nèi)分泌系統(tǒng)5.49×10-18VEGF通路信號(hào)傳導(dǎo)3.87×10-17Fc & RI通路免疫系統(tǒng)1.16×10-13T 細(xì)胞受體通路免疫系統(tǒng)1.58×10-13ErbB 通路信號(hào)傳導(dǎo)3.48×10-13PPAR通路內(nèi)分泌系統(tǒng)1.19×10-12粘附連接細(xì)胞過(guò)程4.16×10-12MAPK 通路信號(hào)傳導(dǎo)4.36×10-12肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架調(diào)節(jié)細(xì)胞過(guò)程5.72×10-10

2.4網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析 網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析結(jié)果見(jiàn)圖1。結(jié)果顯示PTPN1、RXRA、MAP2K1、MAPK14、PDPK1在靶點(diǎn)中介數(shù)最高；VEGF信號(hào)通路、胰島素信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、黏著斑、粘附連接、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、B細(xì)胞受體信號(hào)通路在通路中影響最顯著；廣棗的脂肪酸類2-isopropylmalic acid(gz1)介數(shù)排序第一，其次為肉豆蔻的苯丙素類p-cymene(rb7)和二芳基丁烷類木脂素myrislignan(rx6)；排序在前面的20個(gè)化合物有16個(gè)化合物為基礎(chǔ)方中廣棗、肉豆蔻、檀香的化合物，三味藥材各占1/3。廣棗、肉豆蔻、檀香的化合物平均介數(shù)值分別為0.004 766，0.003 635，0.003 525，均高于其他藥材化合物平均介數(shù)(0.001 307 2～0.002 925 3之間)，以上結(jié)果充分證明廣棗、肉豆蔻、檀香在朱日亨滴丸的組方配比中占主要位置。朱日亨滴丸與冠心病相關(guān)靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)度大于10的見(jiàn)表3；朱日亨滴丸化合物中介數(shù)大于0.007的重點(diǎn)化合物見(jiàn)表4。

*1節(jié)點(diǎn)大小代表“網(wǎng)絡(luò)度”大小，節(jié)點(diǎn)顏色代表節(jié)點(diǎn)的“介數(shù)”高低，暖色代表高，冷色代表低

圖1朱日亨滴丸“化合物-靶點(diǎn)-通路”網(wǎng)絡(luò)模型

*1The node size represents the value of “network degree”；the node colour represents “betweenness”；warm colour represents high degree and cool colour represents low degree

Fig.1Networkmodelof“compound-target-pathway”ofZhuRihengdroppill

2.5朱日亨滴丸主要活性成分的潛在靶點(diǎn)-冠心病藥物關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)分析 基于朱日亨滴丸和已知治療冠心病的西藥的共靶信息，構(gòu)建朱日亨滴丸作用靶點(diǎn)-藥物關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)，見(jiàn)圖2。朱日亨滴丸與西藥有11個(gè)共同靶點(diǎn)，靶點(diǎn)分別為NR3C1、NR3C2、PDE4D、PDE4B、PROCR、PPARG、F2、ACE、HMGCR、MMP2、NQO1。涉及到腎素-血管緊張素系統(tǒng)藥物、抗血栓藥、鈣通道阻滯劑、周圍血管保護(hù)劑、調(diào)血脂藥和其他類等共55個(gè)治療冠心病的西藥。其中，腎素-血管緊張素系統(tǒng)藥物的靶點(diǎn)為ACE、MMP2、PPARG；抗血栓藥的靶點(diǎn)為PDE4D、PDE4B、PROCR、F2、NQO1；鈣通道阻滯劑的靶點(diǎn)為NR3C2；周圍血管保護(hù)劑的靶點(diǎn)為NR3C1、PDE4B；調(diào)血脂藥的靶點(diǎn)為PPARG、HMGCR。結(jié)果進(jìn)一步說(shuō)明，朱日亨滴丸是通過(guò)抗凝、調(diào)節(jié)激素分泌、影響腎素-血管緊張素系統(tǒng)、調(diào)脂等發(fā)揮治療冠心病的作用。

表3朱日亨滴丸冠心病關(guān)鍵靶點(diǎn)的(網(wǎng)絡(luò)度≥10)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)

Tab.3NetworktopologyparametersofkeytargetsassociatedwithcoronaryheartdiseaseforZhuRihengdroppill(degree≥10)

靶點(diǎn)介數(shù)度PTPN10.250 162 2866RXRA0.169 345 9652MAP2K10.162 111 1351MAPK140.113 866 5038PDPK10.095 717 4233F20.044 716 8822PDE4D0.033 267 2721FABP30.031 222 4819CCNA20.032 142 1118靶點(diǎn)介數(shù)度KDR0.036 416 4616SRC0.019 978 5315AKT10.017 613 1815MAPK10.007 825 9414CASP30.028 233 2914RAC10.007 704 0512GSK3B0.011 097 2411RAF10.004 664 9911

表4朱日亨滴丸重點(diǎn)化合物(介數(shù)≥0.007)的網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)

Tab.4NetworktopologyparametersofkeycompoundsofZhuRihengpill(betweenness≥0.007)

編碼化合物介數(shù)度gz12-isopropylmalic acid0.020 234 797rb7 對(duì)傘花烴(p-cymene)0.018 124 388rx6肉豆蔻木脂素(myrislignan)0.016 555 826aw10密葉辛木素(confertifolin)0.013 682 054tq4表洛柯皂苷元(16-episarpagine)0.013 462 436tb16β-檀香醇(beta-santalol)0.012 554 325rz7肉豆蔻木酚素(macelignan)0.010 916 485rt3γ-萜品烯(γ-terpinene)0.010 650 876CX1(+)-guaia-1(10),11-dien-9-one0.010 419 945gq15-羥甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural)0.009 960 196gf33,3’ -二甲基鞣花酸(3,3’ -dimethyl ellagic 0.009 111 265 acid)tb21α-檀香醇(alpha-santalol)0.008 708 335gf5bis[(2S)-2-ethylhexyl]benzene-1,2-dicarboxy-0.008 593 325 latert10β-水芹烯(β-phellandrene)0.008 590 015CX2(+)-methyl selina-4,11-dien-14-oate0.008 024 135ts3富貴草堿(terminaline)0.007 968 115tb27檀油酸(teresantalic acid)0.007 597 295gf11原兒茶酸(protocatechuic acid)0.007 242 124CX131,6-dihydroxy-2,4-dimethoxyanthranquinone V0.007 108 025tb6檀烯酮(santenone)0.007 009 345

*1節(jié)點(diǎn)大小代表“網(wǎng)絡(luò)度”大小，節(jié)點(diǎn)顏色代表節(jié)點(diǎn)的“介數(shù)”高低，暖色代表高，冷色代表低

圖2朱日亨滴丸作用靶點(diǎn)-西藥關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)

*1The node size represents the value of “network degree”；the node colour represents “betweenness”；warm colour represents high degree and cool colour represents low degree

Fig.2CorrelativenetworkofthetargetsbetweenZhuRihengdroppillandwesternmedicine

3 討論

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對(duì)化合物群預(yù)測(cè)的靶點(diǎn)基因進(jìn)行信號(hào)通路富集得到的通路能反應(yīng)該化合物群組對(duì)相關(guān)疾病的作用機(jī)制。通路富集結(jié)果提示朱日亨滴丸對(duì)冠心病、心肌缺血的治療作用與影響應(yīng)激反應(yīng)(胰島素信號(hào)通路(主要為RISK信號(hào)通路)、MAPK信號(hào)通路、ErbB信號(hào)通路、mTOR信號(hào)通路)，動(dòng)脈粥樣斑塊的行成(細(xì)胞粘附，粘附連接)，斑塊不穩(wěn)定性(VEGF信號(hào)通路)，血管內(nèi)皮損傷(細(xì)胞粘附，粘附連接，PPAR信號(hào)通路)，免疫與炎癥反應(yīng)(Fc&RI途徑、T細(xì)胞受體信號(hào)通路、B細(xì)胞受體信號(hào)通路、Toll樣受體信號(hào)通路、自然殺傷細(xì)胞細(xì)胞毒活性、PPAR信號(hào)途徑)，脂代謝(PPAR信號(hào)途徑、脂肪因子信號(hào)途徑)密切相關(guān)。

在網(wǎng)絡(luò)中，高介數(shù)的節(jié)點(diǎn)稱為瓶頸節(jié)點(diǎn)、高連接度的節(jié)點(diǎn)稱為網(wǎng)絡(luò)的樞紐，這些拓?fù)鋵W(xué)屬性都能反應(yīng)節(jié)點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中的重要性[8-9]。朱日亨滴丸網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)及生物學(xué)功能分析表明，綜合排序靠前的PTPN1、RXRA、PDPK1、MAPK14等10個(gè)靶點(diǎn)很有可能是朱日亨滴丸治療心血管病的主要靶點(diǎn)，這些靶點(diǎn)多為應(yīng)激反應(yīng)、血管內(nèi)皮損傷、炎癥等信號(hào)通路的關(guān)鍵基因，朱日亨滴丸主要活性成分與治療冠心病的腎素-血管緊張素系統(tǒng)藥物、抗血栓藥、鈣通道阻滯劑、周圍血管保護(hù)劑、調(diào)血脂藥等均存在共靶，進(jìn)一步說(shuō)明朱日亨滴丸治療冠心病、心肌缺血是通過(guò)多靶點(diǎn)、多途徑發(fā)揮作用?；衔锕?jié)點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析結(jié)果表明，介數(shù)及網(wǎng)絡(luò)度排序在前面的20個(gè)化合物有16個(gè)化合物為基礎(chǔ)方中廣棗、肉豆蔻、檀香的化合物，三味藥材各占1/3。其平均介數(shù)值均高于其他藥材化合物平均介數(shù)，其中，廣棗的平均介數(shù)最高，以上結(jié)果充分證明廣棗的君藥地位，廣棗、肉豆蔻、檀香在朱日亨滴丸的組方配比中占主要位置。排序靠前的化合物可以作為物質(zhì)基礎(chǔ)的重點(diǎn)探究對(duì)象進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

冠心病發(fā)展過(guò)程中涉及的炎癥、脂代謝、動(dòng)脈粥樣硬化、氧化應(yīng)激等病理過(guò)程，對(duì)朱日亨治療冠心病的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)驗(yàn)證及機(jī)制探討需建立不同模型進(jìn)行分析； 尚需要通過(guò)進(jìn)一步基因、蛋白表達(dá)的檢測(cè)，物質(zhì)基礎(chǔ)與分子靶點(diǎn)間的關(guān)系尚需進(jìn)一步單體成分的藥效學(xué)研究。