小麥中嘔吐毒素含量檢測

武建鋒 劉洋

嘔吐毒素是一種常見的污染毒素，會引起人或動物出現(xiàn)嘔吐等中毒癥狀，因此被稱為嘔吐毒素。小麥?zhǔn)侨藗兿矏鄣闹魇持?，同時也是嘔吐毒素分布量最大的農(nóng)作物之一。在小麥種植與倉儲管理中都有可能形成嘔吐毒素，嚴(yán)重影響消費者的身體健康。因此，對小麥嘔吐毒素含量進(jìn)行檢測對于保證食品安全有著重要的意義。

嘔吐毒素及其危害

嘔吐毒素（V omitoxin），是一種常見的真菌毒素，脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（deoxynivalenol，縮寫DON）其擁有高穩(wěn)定性的化學(xué)性質(zhì)，受熱也不易分解，在自然環(huán)境中適應(yīng)性很強，廣泛存在于不同種類的糧食作物中。嘔吐毒素主要源自于單端孢霉烯族化合物，例如尖孢鐮刀菌、粉紅鐮刀菌等等。經(jīng)過試驗研究發(fā)現(xiàn)，該類單端孢霉烯族毒素的數(shù)量眾多，約有150種左右，該類毒素繁殖生長速度快，難以有效控制，所以對糧食作物產(chǎn)生了巨大的破壞。該類速度的理化性質(zhì)也十分有限，通常為純白色結(jié)晶，在紫外線照射下午熒光，但處于水中的溶解度較高，遇熱也不易分解，因此嘔吐毒素的測定與降解需要選擇合適的技術(shù)進(jìn)行。嘔吐毒素對人體毒性很強，對人體危害極大，能夠嚴(yán)重?fù)p害真核細(xì)胞、原核細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞。嘔吐毒素能夠滲入磷脂雙層，作用于亞細(xì)胞水平；并且通過細(xì)胞膜產(chǎn)生作用，利用自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化作用等方式對原核細(xì)胞進(jìn)行作用，進(jìn)而嚴(yán)重危害細(xì)胞的正常功能。

小麥中嘔吐毒素含量檢測

膠體金三線定量法。膠體金真菌毒素檢測條是定量檢測小麥中嘔吐毒素最為簡易的方式，檢測過程對下小麥樣品的處理簡易，8min- 10min就可以得出檢測結(jié)果。試樣提取液中的霉菌毒素與檢測條中的膠體金微粒發(fā)生反應(yīng)，霉菌毒素與膠體金微粒的結(jié)合物以及膠體金微粒在側(cè)流作用下移動，當(dāng)?shù)竭_(dá)檢測線時，包被的抗原與膠體金微粒結(jié)合發(fā)生呈色反應(yīng)，其顏色深淺與試樣中霉菌毒素的含量相關(guān)。用讀數(shù)儀測定檢測條上檢測線和質(zhì)控線顏色深淺，根據(jù)顏色深淺和讀數(shù)儀內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出試樣中霉菌毒素含量。膠體金三線定量法簡單、快捷、準(zhǔn)確、成本低，適合企業(yè)在初檢時使用。

ELISA檢測方法。取出處于冷藏狀態(tài)的小麥嘔吐毒素檢測的ELISA測試盒，將其于室溫環(huán)境下放置到正常室溫狀態(tài)。按照說明書的測試要求準(zhǔn)備洗滌液與嘔吐毒素單克隆抗體工作液。同時，將酶標(biāo)板微孔放置在反應(yīng)架支板上，詳細(xì)標(biāo)注類別，再對其進(jìn)行拍干處理。在兩種不同類別中的標(biāo)準(zhǔn)品孔中添加50μl的嘔吐毒素溶液，樣品孔中計入50μl樣品提取液，沒空都分別加入50μl的抗DON單克隆抗體工作液，將其搖勻，處于37攝氏度環(huán)境下培育60min。然后進(jìn)行甩干處理，使用洗滌液洗板3次后拍干。每孔分別加入100μl美標(biāo)記的羊抗鼠抗體結(jié)合物工作液，處于37攝氏度下培育30min。然后進(jìn)行處理，洗滌液洗板后拍干處理。并在其中每孔分別加入50μl與底物液、顯色液，在37攝氏度環(huán)境下放置15min后取出，并分別添加50μl的終止液，同時在450nm波長下對各個孔進(jìn)行吸光度值A(chǔ)進(jìn)行測定。ELISA檢測能夠半定量檢測小麥樣品中嘔吐毒素的含量。

液相色譜檢測方法。液相色譜方法是根據(jù)《食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的測定、免疫親和層析凈化高效液相色譜法》中的方法進(jìn)行檢測。主要過程是使用提取液提取樣品中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，經(jīng)過免疫親和柱凈化后，運用高效液相色譜紫外線檢測儀進(jìn)行檢測。這一技術(shù)靈敏度較高，測定范圍較廣，能夠十分有效的將嘔吐毒素與其他真菌毒素分離開來，具有較高的分離效率與回收效率，可靠性強，檢測成本相對較高，設(shè)備儀器使用維護(hù)成本高，通常作為檢測機構(gòu)的最終判定方法。

小麥中的嘔吐毒素是由真菌毒素所導(dǎo)致的，要降低小麥中的嘔吐毒素必須要強化小麥種植中的田間管理與小麥儲存期間的倉儲管理，全方位的抑制真菌生長。同時，國家食品檢測機構(gòu)要建立健全的食品安全檢測體系，運用高效而準(zhǔn)確的檢測方式，對小麥中嘔吐毒素進(jìn)行檢測，盡可能的降低嘔吐毒素對動物與人體的危害，保證小麥與小麥制品的安全。

作者簡介：

武建鋒（1989-）男，漢族，河南西峽人，南陽市糧油質(zhì)量檢測中心，本科，工程師，研究方向：糧油檢測。劉洋（1991-）男，漢族，河南淅川人，南陽市糧油質(zhì)量檢測中心，本科，工程師，研究方向：糧油質(zhì)量檢測。