柴連感冒顆粒對(duì)大鼠的長(zhǎng)期毒性研究

黃未劼，張同輝，蔡澤宇，龐聰，沈枕，方攀，潘經(jīng)媛

(1.武漢大學(xué)藥學(xué)院，武漢 430071；2.湖北省醫(yī)藥工業(yè)研究院有限公司，武漢 430061；3.武漢雙龍藥業(yè)有限公司，武漢 430075)

柴連感冒顆粒處方為臨床應(yīng)用多年的經(jīng)驗(yàn)方，由柴胡、川連、黃芩、赤芍、蔓荊等中藥組成提取的復(fù)方制劑，具有解表宣肺、化濕和中之功，主要用于治療感冒風(fēng)寒、風(fēng)寒挾濕證者。為研究該制劑的長(zhǎng)期毒性反應(yīng)，根據(jù)新藥長(zhǎng)期毒性指導(dǎo)原則和方法[1-3]，臨床給藥為7 d，因此筆者采用大鼠連續(xù)灌胃給藥31 d，利用受試動(dòng)物的各項(xiàng)生理病理指標(biāo)評(píng)價(jià)藥物的安全性，以期為臨床用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1藥物 柴連感冒顆粒(湖北省醫(yī)藥工業(yè)研究院有限公司研發(fā)中心制備提供，批號(hào)：20130603)，每1 g干膏粉相當(dāng)于生藥3.51 g，臨用時(shí)每100 g干膏粉加揮發(fā)油0.62 mL混勻。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)SD大鼠，購于上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。給藥時(shí)體質(zhì)量：雌性大鼠152.4～173.4 g，雄性大鼠167.1～190.8 g。均6～7周齡，共120只，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)合格證號(hào)：SCXK(滬)2013-0016，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK(鄂)2009-0023。將大鼠飼養(yǎng)于屏障系統(tǒng)，明暗各12 h交替，室溫20.7～23.5 ℃，相對(duì)濕度43.3%～69.0%。SPF大鼠繁殖顆粒飼料(批號(hào)：14023113)和玉米芯墊料(批號(hào)：14019811)均由北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供；飼料經(jīng)60Co滅菌處理，墊料經(jīng)134 ℃、7 min高壓滅菌后使用。飲用水為高壓滅菌水，符合生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB5749-85要求。實(shí)驗(yàn)前大鼠檢疫5 d，觀察記錄大鼠行為活動(dòng)、攝食量、體質(zhì)量、精神狀況等，選擇健康、正常大鼠作為受試動(dòng)物，若雌性則用無孕大鼠。

1.3儀器 3700全自動(dòng)血球分析儀(美國(guó)雅培公司)，CA-1500全自動(dòng)血凝分析儀[希森美康醫(yī)用電子(上海)有限公司]，7100全自動(dòng)生化分析儀(日本日立公司)，CAV2101電子天平和Adventurer-AR3130電子天平[奧豪斯(上海)有限公司]，TP 1020全自動(dòng)脫水儀和EG1140全自動(dòng)包埋儀(德國(guó)LEICA公司)、HM360輪轉(zhuǎn)切片機(jī)(德國(guó)MICROM公司) 和 E600光學(xué)顯微鏡(日本Nikon公司)。

1.4實(shí)驗(yàn)方法 將大鼠按性別和體質(zhì)量分層隨機(jī)分為柴連感冒顆粒大、中、小劑量組(給藥劑量以生藥計(jì)，分別為45.0，24.0和12.0 g·kg-1，分別相當(dāng)于人臨床日擬用量的52，28，14倍)及溶媒對(duì)照組(給予純化水)，每組30只，雌雄各半，每日灌胃給藥1次，劑量20 mL·kg-1，連續(xù)31 d。

1.5觀察指標(biāo) 給藥期間每周測(cè)量體質(zhì)量和攝食量1次，并根據(jù)測(cè)得的體質(zhì)量調(diào)整給藥量，給藥期間每天觀察并記錄動(dòng)物行為、活動(dòng)等情況。連續(xù)給藥31 d后各組取大鼠16只(雌雄各半)，停藥14 d后各取14只(雌雄各半)，禁食12 h，進(jìn)行血液學(xué)和血液生化學(xué)檢查，稱取臟器質(zhì)量，計(jì)算質(zhì)量指數(shù)。①血液學(xué)指標(biāo)：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白(Hb)、紅細(xì)胞容積(HCT)、平均紅細(xì)胞容積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白(average red blood cell hemoglobin，MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(mean corpuscular hemoglobin contentration，MCHC)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(reticulocyte count，RET)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及其分類(white blood cell count and its classification，WBC&DC)、血小板計(jì)數(shù)(blood platelet，PLT)、凝血酶原時(shí)間(prothrombin time，PT)、凝血酶時(shí)間(thrombin time，TT)；②血液生化學(xué)指標(biāo)：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Crea)、白蛋白(ALB) 、總蛋白(TP)、總膽紅素(T-BiL)、血糖(GLU)、三酰甘油 (TG)、總膽固醇(total cholesterol，T-CH)、 K+濃度、Cl-濃度、Na+濃度、肌酸磷酸激酶(creatine phosphate kinase，CK)。③系統(tǒng)尸體解剖：對(duì)各臟器全面肉眼尸檢；④臟器稱重：稱心、肝、腎、脾、肺、腦、胸腺、腎上腺、睪丸、附睪、卵巢、子宮質(zhì)量，并計(jì)算臟器系數(shù)；⑤病理組織學(xué)檢查：腦(大腦、小腦、腦干)，脊髓(頸、胸、腰段)，垂體，胸腺，甲狀腺，甲狀旁腺，食管，唾液腺，胃，小腸和大腸，肝臟，腎臟，腎上腺，脾臟，胰腺，氣管，肺臟，主動(dòng)脈，心臟，附睪，睪丸，卵巢，子宮，前列腺，乳腺，坐骨神經(jīng)，膀胱，淋巴結(jié)和骨髓及所有異常組織，10%甲醛溶液固定，進(jìn)行病理組織學(xué)檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1一般狀況、體質(zhì)量、進(jìn)食量 4組大鼠實(shí)驗(yàn)期間一般行為無異常，毛色光潔，腺體分泌、呼吸、糞便性狀正常，實(shí)驗(yàn)期間均無死亡。

4組大鼠體質(zhì)量均增長(zhǎng)，其中柴連感冒顆粒大劑量組雄性大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)較溶媒對(duì)照組慢(P<0.01或P<0.05)，柴連感冒顆粒大劑量組雌性大鼠體質(zhì)量與溶媒對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1，2。

與溶媒對(duì)照組比較，柴連感冒顆粒各劑量組雌性大鼠進(jìn)食量均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，柴連感冒顆粒大劑給藥期，n=15；恢復(fù)期，n=7量組雄性大鼠給藥第7天，第14天進(jìn)食量減少(P<0.01)，見表3，4。

表14組雌性大鼠不同時(shí)間體質(zhì)量測(cè)定結(jié)果

組別給藥0 d給藥7 d給藥14 d給藥21 d給藥28 d給藥31 d停藥7 d停藥14 d溶媒對(duì)照組 162±6 194±10 218±13 239±15 249±13 258±14 274±18 280±16柴連感冒顆粒 小劑量組 162±6 193±10 213±9 227±14 240±12 247±15 268±17 277±14 中劑量組 162±6 195±13 219±13 240±15 254±18 261±20 266±11 277±10 大劑量組 162±6 190±8 213±7 234±12 251±13 258±14 262±9 272±10

Treatment period,n=15; recovery period,n=7

表24組雄性大鼠不同時(shí)間體質(zhì)量測(cè)定結(jié)果

組別給藥0 d給藥7 d給藥14 d給藥21 d給藥28 d給藥31 d停藥7 d停藥14 d溶媒對(duì)照組 177±6 232±10 287±12 329±15 361±17 379±16 411±17 438±20柴連感冒顆粒 小劑量組 177±5 230±12 283±13 328±17 358±19 376±23 410±18 436±18 中劑量組 177±6 231±8 286±11 329±16 355±23 372±24 402±22 426±26 大劑量組 177±5 212±8*1 257±11*1 293±12*1 320±14*1 333±15*1 378±15*1 407±15*2

給藥期，n=15；恢復(fù)期，n=7。與溶媒對(duì)照組比較*1P<0.01，*2P<0.05

Treatment period，n=15；recovery period，n=7。Compared with control group，*1P<0.01，*2P<0.05

2.2血常規(guī)檢查結(jié)果 與溶媒對(duì)照組比較，柴連感冒顆粒中、大劑量組血常規(guī)均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，柴連感冒顆粒小劑量組TT高于溶媒對(duì)照組(P<0.05)，其他血常規(guī)指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表5。

2.3血液生化指標(biāo)檢查結(jié)果 連續(xù)給藥31 d，與溶媒對(duì)照組比較，柴連感冒顆粒小劑量組生化指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；柴連感冒顆粒中劑量組GLU、T-CHO低于溶媒對(duì)照組(P<0.01)，Cl-、Na+濃度高于溶媒對(duì)照組(P<0.05)；柴連感冒顆粒大劑量組GLU 和T-CHO低于溶媒對(duì)照組(P<0.01)，TG高于溶媒對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)果見表6。

停藥14 d后，柴連感冒顆粒小、中劑量組AST、CK低于溶媒對(duì)照組(P<0.01)，柴連感冒顆粒中、大劑量組BUN高于溶媒對(duì)照組(P<0.05,P<0.01)。結(jié)果見表6。

2.4系統(tǒng)尸檢及臟器系數(shù) 連續(xù)給藥31 d及停藥14 d，大體解剖檢查未見明顯異常。連續(xù)給藥31 d，柴連感冒顆粒大劑量組雌性大鼠肝、腎上腺系數(shù)高于溶媒對(duì)照組(P<0.01)，胸腺系數(shù)低于溶媒對(duì)照組(P<0.01)；柴連感冒顆粒大劑量組雄性大鼠肝、腎上腺系數(shù)高于溶媒對(duì)照組(P<0.01)。停藥14 d，柴連感冒顆粒小劑量雌性大鼠組子宮系數(shù)高于溶媒對(duì)照組(P<0.05)；柴連感冒顆粒大劑量組雄性大鼠腦系數(shù)高于溶媒對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)果見表7、表8。

2.5組織學(xué)檢查 連續(xù)給藥31 d及停藥14 d，柴連感冒顆粒大劑量組有個(gè)別大鼠出現(xiàn)盲腸黏膜下出血，肝淤血、脂肪變性，肝髓外造血，肺間質(zhì)增生，肺泡增厚，腎小管上皮細(xì)胞變性、腫脹，管腔內(nèi)有絲網(wǎng)狀物分布，間質(zhì)細(xì)胞增生，腎實(shí)質(zhì)萎縮，膀胱黏膜上皮細(xì)胞變性脫落，胸腺髓質(zhì)出血，但這些病變同樣出現(xiàn)在溶媒對(duì)照組，且病變例數(shù)與病變程度無明顯差異，這些病變也是SD大鼠常見自發(fā)性病變[4]，故上述變化與供試品無關(guān)。

表34組雌性大鼠不同時(shí)間進(jìn)食量測(cè)定結(jié)果

Tab.3Food-intakeoffourgroupsoffemaleratsatdifferenttimepoints

g·(100 g)

給藥期，n=8；恢復(fù)期，n=7(n為籠數(shù))

Treatment period,n=8; recovery period,n=7(n means cage number)

表44組雄性大鼠不同時(shí)間進(jìn)食量測(cè)定結(jié)果

Tab.4Food-intakeoffourgroupsofmaleratsatdifferenttimepoints

g·(100 g)

與溶媒對(duì)照組比較，*1P<0.01；給藥期，n=8；恢復(fù)期，n=7(n為籠數(shù))

Compared with control group，*1P<0.01；Treatment period,n=8; recovery period,n=7(n means cage number)

表54組大鼠血液學(xué)指標(biāo)檢查結(jié)果

Tab.5Resultsofhematologicalexaminationinfourgroupsofrats

組別與時(shí)間RET/%RBC/(×1012·L-1)Hb/(g·L-1)HCT/%MCV/flMCH/pgMCHC/(g·L-1)WBC/(×109·L-1)給藥31 d(n=16) 溶媒對(duì)照組4.70±2.527.17±0.60138±1064.6±4.290.5±2.719.3±0.4213±35.41±1.23 柴連感冒顆粒 小劑量組3.26±1.467.17±0.63137±1163.4±5.088.5±1.919.0±0.4215±24.87±2.18 中劑量組4.02±2.686.92±0.63132±961.5±3.989.1±3.619.1±0.7214±24.91±0.96 大劑量組3.69±1.637.13±0.68134±1062.7±4.488.2±3.018.9±0.7214±36.82±2.44停藥14 d(n=14) 溶媒對(duì)照組4.36±0.927.19±0.62133±763.7±2.988.9±4.218.6±0.7209±44.39±1.36 柴連感冒顆粒 小劑量組4.78±0.677.02±0.45133±762.5±2.589.2±3.618.9±0.4212±54.09±1.79 中劑量組4.26±0.597.20±0.60134±863.7±3.988.6±3.218.7±0.7211±34.16±1.10 大劑量組4.78±0.887.00±0.33130±562.2±2.289.0±2.518.7±0.4210±34.84±1.06組別與時(shí)間NEULYMMONOEOSBASO%PLT/(×109·L-1)PTTTs給藥31 d(n=16) 溶媒對(duì)照組12±482±53±21±02±1 912±6210.1±0.9 56±4 柴連感冒顆粒 小劑量組14±680±63±11±02±1 950±6310.2±2.3 60±4*1 中劑量組13±782±93±11±02±1 962±659.7±1.7 57±4 大劑量組14±681±83±21±02±1 924±6810.3±1.4 55±4停藥14 d(n=14) 溶媒對(duì)照組11±485±52±11±02±1 882±9511.8±2.5 62±5 柴連感冒顆粒 小劑量組10±486±52±11±01±0 940±9111.3±1.3 62±4 中劑量組9±387±22±11±12±1 868±21811.5±1.8 61±4 大劑量組11±585±52±11±02±1 928±10111.9±2.7 60±4

與溶媒對(duì)照組比較，*1P<0.05

Compared with solvent control group*1P< 0.05

表64組大鼠血液生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

Tab.6Resultofbloodbiochemicalindexinfourgroupsofrats

組別與時(shí)間ALTASTALPCK(U·L-1)TPALB(g·L-1)T-BiLCrea(μmol·L-1)給藥31 d(n=16) 溶媒對(duì)照組48±6 90±7116±41 317±7458±234±22.3±0.941±3柴連感冒顆粒 小劑量組52±9 90±10117±40 307±9560±335±21.8±0.740±2 中劑量組49±8 92±20127±37 321±14259±334±12.4±0.941±3 大劑量組54±9 90±19149±39 353±25360±335±12.4±0.942±4停藥14 d(n=14) 溶媒對(duì)照組45±7 98±998±41 379±7759±234±12.3±0.946±3 柴連感冒顆粒 小劑量組49±6 81±15*195±29 214±124*159±334±12.4±0.946±5 中劑量組48±7 77±8*196±42 204±62*160±334±21.5±0.847±5 大劑量組48±9 91±11118±47 328±9160±335±22.1±0.745±4

續(xù)表64組大鼠血液生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

Tab.6Resultofbloodbiochemicalindexinfourgroupsofrats

組別與時(shí)間GLUBUNT-CHOTGK+Na+Cl-(mmol·L-1)給藥31 d(n=16) 溶媒對(duì)照組7.6±0.86.4±1.01.41±0.32 0.46±0.084.9±0.4 147±2 103±2 柴連感冒顆粒 小劑量組7.0±0.96.2±0.71.20±0.22 0.47±0.114.9±0.3 148±2 105±2 中劑量組6.6±0.7*16.6±1.41.00±0.25*1 0.51±0.204.8±0.3 149±2*2 106±2*2 大劑量組6.6±0.8*16.9±1.80.77±0.23*1 0.62±0.22*25.1±0.2 146±2 105±2停藥14 d(n=14) 溶媒對(duì)照組7.2±0.56.5±0.71.68±0.39 0.50±0.174.6±0.4 139±1 103±2 柴連感冒顆粒 小劑量組7.4±1.06.9±0.81.87±0.36 0.52±0.204.3±0.2 139±1 104±2 中劑量組7.6±0.67.5±0.9*21.68±0.34 0.44±0.074.5±0.4 139±1 104±2 大劑量組6.9±0.57.6±1.1*11.87±0.39 0.53±0.114.9±0.4 139±1 103±2

與溶媒對(duì)照組比較，*1P<0.01，*2P<0.05

Compared with solvent control group，*1P<0.01，*2P<0.05

表74組雌性大鼠臟器系數(shù)測(cè)定結(jié)果

組別與時(shí)間心系數(shù)肝系數(shù)腎系數(shù)脾系數(shù)肺系數(shù)給藥31 d(n=8) 溶媒對(duì)照組0.354±0.0183.309±0.4250.752±0.0420.248±0.0380.407±0.027 柴連感冒顆粒 小劑量組0.359±0.0253.564±0.2870.798±0.0490.254±0.0440.421±0.024 中劑量組0.355±0.0163.713±0.2580.815±0.0600.292±0.0470.396±0.032 大劑量組0.363±0.0143.989±0.316*10.798±0.0600.260±0.0510.332±0.122停藥14 d(n=7) 溶媒對(duì)照組0.331±0.0142.720±0.1530.698±0.0420.252±0.0330.392±0.031 柴連感冒顆粒 小劑量組0.335±0.0152.652±0.1280.697±0.0380.237±0.0160.376±0.011 中劑量組0.335±0.0292.915±0.2720.709±0.0330.228±0.0190.391±0.025 大劑量組0.369±0.0702.928±0.1770.727±0.0610.259±0.0200.400±0.025組別與時(shí)間腎上腺系數(shù)腦系數(shù)卵巢系數(shù)子宮系數(shù)胸腺系數(shù)給藥31 d(n=8) 溶媒對(duì)照組0.031±0.0040.701±0.0360.055±0.0110.217±0.0600.224±0.028 柴連感冒顆粒 小劑量組0.033±0.0040.724±0.0420.082±0.0910.234±0.1020.193±0.027 中劑量組0.034±0.0060.726±0.0950.058±0.0100.224±0.0580.198±0.035 大劑量組0.039±0.003*10.687±0.0520.055±0.0070.187±0.0190.169±0.014*1停藥14 d(n=7) 溶媒對(duì)照組0.029±0.0040.664±0.0480.050±0.0040.178±0.0410.185±0.036 柴連感冒顆粒 小劑量組0.029±0.030.669±0.0450.051±0.0040.249±0.060*20.167±0.010 中劑量組0.029±0.0030.675±0.0420.043±0.0050.171±0.0450.160±0.031 大劑量組0.030±0.0020.704±0.0900.052±0.0140.176±0.0510.174±0.029

與溶媒對(duì)照組比較，*1P<0.01，*2P<0.05

Compared with solvent control group，*1P<0.01，*2P<0.05

表84組雄性大鼠臟器系數(shù)測(cè)定結(jié)果

組別與時(shí)間心系數(shù)肝系數(shù)腎系數(shù)脾系數(shù)肺系數(shù)給藥31 d(n=8) 溶媒對(duì)照組0.324±0.0183.107±0.2200.805±0.1200.212±0.0320.336±0.020 柴連感冒顆粒 小劑量組0.332±0.0223.317±0.3080.809±0.0850.200±0.0270.354±0.036 中劑量組0.334±0.0393.336±0.3290.889±0.0900.223±0.0400.351±0.027 大劑量組0.341±0.0123.536±0.190*10.853±0.0380.209±0.0150.360±0.029停藥14 d(n=7) 溶媒對(duì)照組0.309±0.0212.949±0.2980.710±0.0290.215±0.0310.304±0.020 柴連感冒顆粒 小劑量組0.316±0.0193.020±0.3350.696±0.0210.234±0.0300.295±0.010 中劑量組0.307±0.0292.973±0.1160.720±0.0710.203±0.0180.310±0.017 大劑量組0.316±0.0103.102±0.1230.767±0.0640.226±0.0250.312±0.019組別與時(shí)間腎上腺系數(shù)腦系數(shù)卵巢系數(shù)子宮系數(shù)胸腺系數(shù)給藥31 d(n=8) 溶媒對(duì)照組0.015±0.0020.515±0.0320.734±0.0460.234±0.0350.144±0.026 柴連感冒顆粒 小劑量組0.017±0.0010.528±0.0450.734±0.0780.230±0.0300.133±0.026 中劑量組0.017±0.0010.526±0.0480.719±0.0820.227±0.0260.131±0.033 大劑量組0.021±0.003*10.557±0.0280.773±0.0610.242±0.0300.123±0.016停藥14 d(n=7) 溶媒對(duì)照組0.014±0.0020.446±0.0220.608±0.0270.226±0.0260.124±0.023 柴連感冒顆粒 小劑量組0.013±0.0020.455±0.0270.631±0.0370.230±0.0150.121±0.010 中劑量組0.014±0.0020.450±0.0220.625±0.0610.230±0.0130.115±0.019 大劑量組0.015±0.0010.490±0.038*20.641±0.0510.244±0.0300.110±0.023

與溶媒對(duì)照組比較，*1P<0.01，*2P<0.05

Compared with solvent control group，*1P<0.01，*2P<0.05

3 討論

根據(jù)長(zhǎng)期毒性相關(guān)指導(dǎo)原則[1-2]，劑量設(shè)計(jì)時(shí)大劑量應(yīng)出現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)或達(dá)到最大給藥量，或系統(tǒng)暴露量達(dá)到臨床系統(tǒng)暴露量的50倍。由于考慮供試品最高配制濃度(太黏稠致灌胃針難以推送)、給藥體積及實(shí)驗(yàn)期限等因素，采用最大濃度0.641 g浸膏粉·mL-1(生藥2.25 g·mL-1)×20 mL·kg-1=生藥45 g·kg-1，即設(shè)大劑量，相當(dāng)于臨床擬用劑量的52倍；小劑量為生藥12 g·kg-1，高于大鼠藥效學(xué)有效劑量(生藥10 g·kg-1)，中劑量為生藥24 g·kg-1，由于給藥期設(shè)為31 d，因此恢復(fù)期設(shè)為14 d。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，連續(xù)31 d灌胃給予不同劑量柴連感冒顆粒，各組大鼠實(shí)驗(yàn)期間一般狀況無異常改變；大鼠體質(zhì)量均增長(zhǎng)，其中柴連感冒顆粒大劑量組雄性大鼠體質(zhì)量較溶媒對(duì)照組增長(zhǎng)緩慢，由于給藥濃度較高，且雄性大鼠體質(zhì)量較大增加給藥難度，對(duì)給藥操作可能有一定影響。雌性大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)無異常。提示大劑量柴連感冒顆粒能使雄性大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)減緩。攝食量檢查，柴連感冒顆粒小、中劑量組與溶媒對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，柴連感冒顆粒大劑量組雄性大鼠給藥7～14 d進(jìn)食量減少，雌性大鼠進(jìn)食量無影響，提示大劑量柴連感冒顆粒在給藥初期對(duì)雄性大鼠攝食量有短暫抑制作用。

血液學(xué)檢查結(jié)果顯示，各劑量組血液學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)均未見異常，提示柴連感冒顆粒對(duì)血液學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)無影響。凝血檢查結(jié)果顯示，給藥末期柴連感冒顆粒小劑量組TT高于溶媒對(duì)照組，但絕對(duì)值相差不大，且無明顯劑量相關(guān)性，故該變化與供試品無關(guān)。血液生化結(jié)果顯示，給藥末期及恢復(fù)期結(jié)束，個(gè)別指標(biāo)如GLU、AST、BUN、TG、CK、Na+和Cl-與對(duì)照組比較偶有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但均在本安全評(píng)價(jià)中心背景值或參考文獻(xiàn)正常值范圍內(nèi)[5]，故這些變化無毒理學(xué)評(píng)價(jià)意義。給藥末期，柴連感冒顆粒中、大劑量組T-CHO低于溶媒對(duì)照組，但柴連感冒顆粒中劑量組測(cè)定值在正常值范圍內(nèi)，柴連感冒顆粒大劑量組測(cè)定值略低于正常值范圍，該變化可能為大劑量柴連感冒顆粒對(duì)雄性大鼠攝食量有短暫抑制作用而引起的動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)不良所致，但恢復(fù)期可恢復(fù)正常。提示大劑量柴連感冒顆?？赡軐?duì)脂代謝有可逆性影響。

臟器系數(shù)檢查結(jié)果顯示，連續(xù)給藥31 d，柴連感冒顆粒大劑量組雌性大鼠胸腺系數(shù)低于溶媒對(duì)照組，停藥14 d，柴連感冒顆粒小劑量組雌性大鼠子宮系數(shù)高于溶媒對(duì)照組，柴連感冒顆粒大劑量組雄性大鼠腦系數(shù)高于溶媒對(duì)照組，上述變化差異較小，且無明顯劑量相關(guān)性，故與供試品無關(guān)。連續(xù)給藥31 d，柴連感冒顆粒大劑量組肝系數(shù)和腎上腺系數(shù)高于溶媒對(duì)照組，結(jié)合血液生化和組織病理學(xué)檢查結(jié)果，均未見相關(guān)組織異常改變，且停藥后可恢復(fù)正常，故這些變化應(yīng)無毒理學(xué)評(píng)價(jià)意義。

組織病理學(xué)檢查結(jié)果顯示，給藥末期和恢復(fù)期各組個(gè)別臟器病變例數(shù)和病變程度無差異，考慮為大鼠的自發(fā)性病變，與柴連感冒顆粒無關(guān)，其余臟器未見異常。

綜上所述，在本實(shí)驗(yàn)條件下，柴連感冒顆粒對(duì)大鼠重復(fù)灌胃給藥31 d，45.0 g·kg-1時(shí)會(huì)導(dǎo)致雄性大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)減緩、給藥初期攝食量減少，膽固醇降低，停藥后逐漸恢復(fù)；柴連感冒顆粒對(duì)大鼠重復(fù)灌胃給藥31 d無毒反應(yīng)劑量為24.0 g·kg-1，相當(dāng)于臨床擬用劑量的28倍。