修凈膠囊輔助降血脂功能的研究

范治云，譚會萍，李志坤，陳 峰，祝清芬*

（山東省食品藥品檢驗研究院，山東 濟南 250101；2. 濟南市第三人民醫(yī)院，山東 濟南 250132）

高血脂是指血中膽固醇或甘油三脂過高或高密度脂蛋白膽固醇過低，是導致動脈粥樣硬化的主要因素，是心腦血管病發(fā)生發(fā)展的危險因素[1-3]，由于其發(fā)病緩慢漸進具有隱匿的特性，臨床上被稱為“隱形殺手”。因此控制血脂于正常水平，可預防動脈粥樣硬化的形成及發(fā)展，有效地控制或預防心血管病的發(fā)生。高脂血癥患者除了增強運動、飲食調節(jié)外，還服用藥物治療[4]；有輔助降血脂功效的保健食品也可用于輔助治療。本文采用大鼠混合型高脂血癥模型對修凈膠囊的輔助降血脂功能進行評價研究，以期為修凈膠囊在輔助降血脂功能保鍵食品的開發(fā)提供數據支持。

1 材料和方法

1.1 受試物

修凈膠囊，性狀：內容物為棕色粉末的硬膠囊，規(guī)格：0.4 g/粒，批號：20141225，由煙臺博奧生物科技公司提供。每日食用量為2.4 g。保存條件：置陰涼干燥通風處。

1.2 實驗動物

SPF級SD雄性大鼠50只，體重180～206 g，購自濟南朋悅實驗動物繁育有限公司，許可證號：SCXK（魯）20140007。飼養(yǎng)環(huán)境：屏障級動物實驗室，許可證號：SYXK（魯）2013 0012。溫度：20～26 ℃，日溫差≤3 ℃，濕度：40 %～70 %，換氣次數：≥10次/h。照明時間：12 h明暗交替。

1.3 高脂模型飼料

在大鼠維持飼料基礎上添加20 % 蔗糖、15 %豬油、1.002 %膽固醇、0.2 %膽酸鈉、適量磷酸氫鈣、酪蛋白、石粉等，由北京科澳協力飼料有限公司生產，許可證號：SCXK（京）2014-0012。

1.4 主要儀器

7220型日立生化分析儀，日本日立公司；甘油三酯測定試劑盒（GPO-PAP法）、總膽固醇測定試劑盒（CHOD-PAP法）、低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒（CAT法）、高密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒（CAT法），四川邁克生物科技有限公司。

1.5 方法

1.5.1 動物造模 采用混合型高脂血癥動物模型進行試驗[5]。按體重隨機分成2組，10只大鼠給予維持飼料作為空白對照組，40只給予模型飼料作為模型組。給予飼料1周后，2組大鼠不禁食眼內眥采血，分離血清，測定血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平。根據TC水平將模型組隨機分成修凈膠囊低、中、高3個劑量組和模型對照組。

1.5.2 分組給藥 設修凈膠囊低、中、高劑量分別為0.2，0.4，0.8 g/kg，相當于人體推薦量的5，10，20倍劑量。臨用前用0.5 %羧甲基纖維素鈉溶液配制相應濃度的受試物溶液。各組大鼠灌胃體積為20 ml/kg，空白對照組和模型對照組給予同等體積的0.5 %羧甲基纖維素鈉溶液，每天灌胃1次，連續(xù)30 d?？瞻讓φ战M繼續(xù)給予維持飼料，模型對照組及3個劑量組繼續(xù)給予高脂飼料，并每周稱一次體重，根據體重調整給藥量。

1.5.3 指標檢測 于試驗結束時（第31天）不禁食采血，分離血清，測定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。

1.6 統計學方法

2 結果

2.1 修凈膠囊對大鼠體重的影響

各組大鼠生長良好，體重均表現逐漸增長趨勢。與空白對照組比較，模型組大鼠體重明顯增加（P＜0.05或P＜0.01），提示高脂飼料可能導致大鼠體重增加；與模型組比較，3個劑量組動物體重均未見顯著性差異（P＞0.05），表明修凈膠囊對大鼠的體重無顯著影響。見表1。

表1 修凈膠囊對大鼠體重的影響（±s，n=10)

表1 修凈膠囊對大鼠體重的影響（±s，n=10)

注：*P＜0.05，**P＜0.01 vs 空白對照組。

?組別 劑量/g·kg-1 給藥前/g 第1周/g 第2周/g 第3周/g 第4周/g空白對照組 0 255±16 268±23 317±29 344±35 366±34模型對照組 0 258±10 295±14* 358±19** 383±21* 393±19低劑量組 0.2 256±17 282±24 337±37 373±46 390±42中劑量組 0.4 250±8 277±28 347±21 380±26 396±23高劑量組 0.8 252±10 280±16 333±26 355±29 374±28

2.2 修凈膠囊對大鼠血脂的影響

喂飼模型飼料7 d后，與空白對照組比較，模型對照組及各劑量組血清TG和血清TC均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01，見表2）；給藥結束，與空白對照組比較，模型對照組血清TG、血清TC和LDL-C均顯著升高（P＜0.01，見表3），表明混合型高脂血癥動物模型成立。

表2 給予修凈膠囊前大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平（±s，n=10)

表2 給予修凈膠囊前大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平（±s，n=10)

注: *P＜0.05，**P＜0.01 vs 空白對照組。

組別 劑量/g·kg-1 TC/mmol·L-1 TG/mmol·L-1 LDL-C/mmol·L-1 HDL-C/mmol·L-1空白對照組 0 2.56±0.56 1.54±0.32 0.30±0.07 0.66±0.14模型對照組 0 4.06±0.77** 3.79±1.48** 0.44±0.16 0.66±0.11低劑量組 0.2 4.18±1.04** 3.30±0.81** 0.46±0.14* 0.71±0.07中劑量組 0.4 4.12±0.87** 3.56±1.03** 0.46±0.15* 0.65±0.07高劑量組 0.8 4.27±1.06** 3.79±1.09** 0.44±0.12 0.68±0.13

給予修凈膠囊30 d后，與模型對照組比較，0.8 g/kg劑量組血清TC和血清TG顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）；0.4，0.8 g/kg 劑量組LDL-C顯著降低（P＜0.05或P＜0.01），同時3個劑量組血清高密度脂蛋白無明顯變化（P＞0.05）。顯示受試樣品輔助降低血脂功能動物實驗結果陽性。

表3 給予修凈膠囊30d后大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平（±s，n=10)

表3 給予修凈膠囊30d后大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平（±s，n=10)

注：*P＜0.05，**P＜0.01 vs 空白對照組；#P＜0.05，##P＜0.01 vs 模型對照組。

組別 劑量/g·kg-1 TC/mmol·L-1 TG/mmol·L-1 LDL-C/mmol·L-1 HDL-C/mmol·L-1空白對照組 0 2.02±0.30 1.94±0.85 0.19±0.05 0.69±0.11模型對照組 0 3.90±0.89** 3.75±0.68** 0.44±0.12** 0.51±0.08低劑量組 0.2 3.78±0.74 3.40±0.68 0.37±0.07 0.54±0.11中劑量組 0.4 3.68±0.47 2.89±0.95 0.34±0.05# 0.53±0.11高劑量組 0.8 3.08±0.72# 2.38±1.00## 0.30±0.08## 0.52±0.09

3 討論與結論

修凈膠囊是以葛根提取物、紅曲、山楂提取物為主要原料，經粉碎、混合等工藝而制成的保健食品。葛根為藤本植物野葛的塊狀根，近現代研究表明葛根提取物中含有葛根素、大豆苷元、葛根皂苷等多種活性成分，具有調節(jié)心血管、緩解風寒感冒癥狀及解酒護肝等藥理作用[6-7]；山楂為藥食同源植物，含有黃酮類、 黃烷及其聚合物類、三萜類和有機酸類等多種化學成分，具有調節(jié)血脂、保肝、降壓、助消化、強心、抗氧化、抗腫瘤、抗菌等作用[8-9]；紅曲是我國傳統的食藥兩用發(fā)酵產品，廣泛用于食品和藥物等多個個領域，有學者從紅曲中分離得到了兩個降血脂活性成分：洛伐他汀和豆甾醇[10]。

本文參照國食藥監(jiān)?；痆2012]107號“關于印發(fā)抗氧化功能評價方法等9個保健功能評價方法的通知”附件6《輔助降低血脂功能評價方法》，建立了混合型高脂血癥大鼠動物模型。并在此基礎上研究了修凈膠囊對大鼠血脂水平的影響。結果顯示，給予修凈膠囊30 d，0.8 g/kg劑量能顯著降低大鼠血清TC和血清TG；0.4，0.8 g/kg劑量能顯著降低大鼠血清LDL-C，同時對血清HDL-C水平無顯著影響。表明修凈膠囊有一定的輔助降血脂功能，本試驗為其開發(fā)為降血脂保健產品提供了理論依據。