胃蘇顆粒對慢性萎縮性胃炎患者胃粘膜TFF2、NF-κB表達的影響

潘俊娣 葉 斌 周桃梅 傅麗霞

慢性萎縮性胃炎（chronic atrophic gastritis，CAG）是一種由多種致病因素導致的胃黏膜慢性炎癥病變，其病理特征為胃黏膜固有腺體萎縮性改變，伴發(fā)的腸上皮化生和異型增生等癌前病變，被公認為胃癌的癌前疾病[1]。研究發(fā)現(xiàn)，80%以上胃癌患者曾經(jīng)歷CAG病程[2]。西醫(yī)治療CAG的方法包括：根除幽門螺旋桿菌（H.pylori，Hp）感染及針對食欲減低、上腹痛、反酸等消化不良癥狀的對癥治療，而中醫(yī)藥治療CAG可獲得良好的臨床效果[3]。本研究觀察胃蘇顆粒治療CAG的臨床效果，并檢測胃黏膜三葉因子2（Trefoil factor2，TFF2）、核轉錄因子-κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）表達水平，探討胃蘇顆粒治療CAG的作用機制。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2014年1月—2017年12月在麗水市中心醫(yī)院診治的CAG患者100例，采用隨機數(shù)字表法分為對照組和觀察組，各50例。本研究方案經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 納入標準及排除標準 納入標準：（1）年齡18～70歲，性別不限；（2）所有患者均符合CAG診斷標準[4-5]；（3）入組前未使用治療萎縮性胃炎相關藥物。排除標準：（1）合并消化性潰瘍、消化道腫瘤者；（2）合并其他系統(tǒng)嚴重原發(fā)病、惡性腫瘤者；（3）妊娠期、哺乳期婦女及藥物過敏者。

2 方法

2.1 治療方法 兩組患者Hp陽性者均口服雷貝拉唑膠囊10mg，克拉霉素片0.5g，左氧氟沙星膠囊0.2g，2次/天，共 7天。7天后，對照組予替普瑞酮口服[規(guī)格：50mg/粒；衛(wèi)材（中國）藥業(yè)有限公司；批號13110574]，每次 50mg，3 次/天；觀察組在對照組基礎上加服胃蘇顆粒（規(guī)格：5g/袋；揚子江藥業(yè)有限公司；批號 13120482），每次 5g，3次/天。兩組療程均為 12周，療程結束后復查胃鏡，取胃竇部兩處，胃角、胃體大小彎各1處組織病理檢查。

2.2 觀察指標

2.2.1 臨床癥狀評分 參考文獻[6]對腹脹、腹痛、噯氣、納差、惡心嘔吐、嘈雜、反酸進行評分。評分標準：0分：無癥狀；1分：癥狀偶發(fā)；2分：癥狀頻發(fā)且影響生活，但經(jīng)藥物治療后緩解；3分：癥狀難以忍受且嚴重影響生活，經(jīng)藥物治療后無緩解。分度標準：輕度：總分1～3分；中度：總分4～7分；重度：總分≥8分。

2.2.2 病理學評分 參考文獻[7]對胃黏膜炎性反應、活動度、萎縮、腸上皮化生及異性增生進行評分。評分標準：0分：無病變；1分：病變范圍小于1/3胃黏膜；2分：病變范圍介于1/3至2/3胃黏膜之間；3分：病變范圍大于2/3胃黏膜。分度標準：輕度：總分1～3分，中度：總分4～7分，重度：總分≥8分。

2.2.3 檢測胃黏膜TFF2、NF-κB表達 采用實時熒光定量PCR法（realtime fluorescence quantita-tive Polymerase ChainReaction，RT-PCR）檢測胃黏膜中TFF2、NF-κB mRNA的表達水平：取適量胃黏膜制成組織勻漿，采用Trizol法提取總RNA，將獲得的RNA反轉錄為cDNA，將cDNA作為模板，滴加目標基因引物，在熒光PCR儀中擴增。最后，將PCR產(chǎn)物在瓊脂糖凝膠中電泳，采用溴化乙錠染色，使用圖像分析儀檢測條帶吸光度，并行定量分析。以上操作均嚴格按照試劑盒說明書進行。

2.3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS13.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

3 結果

3.1 兩組患者一般資料比較 觀察組男30例，女20例；平均年齡（42.64±10.15）歲，平均病程（5.28±3.17）年，胃黏膜萎縮病變程度[4]：輕度11例，中度21例，重度15例。對照組男28例，女22例；平均年齡（42.97±10.16）歲，平均病程（5.25±3.16）年，胃黏膜萎縮病變程度：輕度16例，中度20例，重度14例。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

3.2 兩組患者治療前后臨床癥狀改善情況比較 治療前，兩組患者臨床癥狀評分差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。治療后，兩組患者的臨床癥狀評分均較治療前明顯降低，觀察組降低更明顯，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表 1。

表1 兩組慢性萎縮性胃炎患者臨床癥狀改善情況比較（分，±s）

表1 兩組慢性萎縮性胃炎患者臨床癥狀改善情況比較（分，±s）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05；與對照組治療后比較，△P＜0.05；對照組：替普瑞酮；觀察組：替普瑞酮+胃蘇顆粒

組別觀察組對照組例數(shù)50 50治療前12.35±3.41 12.36±3.39治療后2.37±1.01*△6.58±1.06*

3.3 兩組患者治療前后胃黏膜病理學評分比較 治療前，兩組患者的胃黏膜病理學評分差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。治療后，觀察組和對照組患者的胃黏膜病理學評分均較治療前明顯降低，觀察組的降低程度更明顯，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

3.4 兩組患者治療前后胃黏膜TFF2、NF-κB表達水平比較 治療前，兩組胃黏膜TFF2、NF-κB表達水平差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。治療后，兩組胃黏膜TFF2 mRNA表達水平均較治療前升高（P＜0.05），觀察組優(yōu)于對照組（P＜0.05）；兩組胃黏膜NF-κB mRNA表達水平均較治療前降低（P＜0.05），觀察組優(yōu)于對照組（P＜0.05）。見表 3。

表3 兩組慢性萎縮性胃炎患者胃黏膜TFF2、NF-κB表達比較（±s）

表3 兩組慢性萎縮性胃炎患者胃黏膜TFF2、NF-κB表達比較（±s）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05；與對照組治療后比較，△P＜0.05；TFF2：三葉因子 2；NF-κB：核轉錄因子-κB；對照組：替普瑞酮；觀察組：替普瑞酮+胃蘇顆粒

組別觀察組治療前治療后對照組治療前治療后例數(shù)50 TFF2NF-κB 0.37±0.04 1.12±0.09*△18.05±4.28 7.82±1.92*△50 0.36±0.04 0.78±0.06*18.07±4.31 11.56±3.78*

3 討論

CAG的發(fā)病機制復雜，迄今為止尚未完全明了。Hp感染被認為是關鍵的致病因素，根除Hp可有效抑制CAG患者胃黏膜的活動性炎癥，延緩或阻止胃黏膜萎縮的發(fā)展。但是，胃黏膜萎縮、腸化是否可逆轉尚無定論[8]。中醫(yī)藥治療CAG有明顯優(yōu)勢，甚至可逆轉胃黏膜腸上皮化生、異型增生[9]。胃蘇顆粒由紫蘇梗、陳皮及香附等組成。紫蘇梗開郁和胃；陳皮理氣健脾；香附疏肝解郁；枳殼行氣開竅；香櫞、佛手理氣和中；雞內(nèi)金、檳榔消食健胃。組方具有疏肝和胃、消脹止痛的功效[10]。研究顯示，胃蘇顆?？梢种莆杆岱置凇⒈Ｗo胃黏膜、促進胃動力[11]。胃蘇顆?？赡芡ㄟ^調控血清中表皮生長因子（EGF）、一氧化氮（NO）、白介素 32（IL-32）、轉化生長因子 β1（TGF-β1）水平以減輕炎性損傷，保護胃黏膜[12]。替普瑞酮是臨床常用的胃黏膜保護劑，廣泛用于各種胃黏膜病變[13]。

TFF2是一種胃竇黏膜上皮細胞合成和分泌的小分子蛋白質。TFF2在慢性淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、胃癌中呈進行性減低，提示TFF2是一種胃黏膜保護和修復因子。研究發(fā)現(xiàn)，TFF2可促進胃黏膜糖蛋白分泌及生成具有黏膜保護作用的復合物；可促進黏膜上皮細胞向黏膜破損部位移行[14-15]。NF-κB作為多向性轉錄調節(jié)的因子，在正常胃黏膜、慢性萎縮性胃炎、胃癌中的陽性表達率呈逐步增強[16]。NF-kB可調控炎癥反應各階段的一系列炎癥因子的表達，從而在炎癥反應、腫瘤的發(fā)生等過程中發(fā)揮重要作用[17]。

表2 兩組慢性萎縮性胃炎患者胃黏膜病理學評分比較（分，±s）

表2 兩組慢性萎縮性胃炎患者胃黏膜病理學評分比較（分，±s）

注：與同組治療前比較，*P＜0.05；與對照組治療后比較，△P＜0.05；；對照組：替普瑞酮；觀察組：替普瑞酮+胃蘇顆粒

組別觀察組治療前治療后對照組治療前治療后例數(shù)50 50炎性反應2.68±0.07 0.79±0.04*△2.67±0.07 1.13±0.05*活動性2.57±0.06 0.76±0.04*△2.56±0.06 1.15±0.05*萎縮2.42±0.06 0.95±0.05*△2.40±0.06 1.17±0.05*腸上皮化生2.48±0.06 0.91±0.05*△2.47±0.06 1.16±0.05*異型增生2.21±0.06 0.85±0.05*△2.23±0.06 1.02±0.05*

本研究結果顯示，替普瑞酮聯(lián)合胃蘇顆?？娠@著改善CAG患者的臨床癥狀和胃黏膜病理學情況，提高胃黏膜TFF2 mRNA表達水平（P＜0.05），降低胃黏膜 NF-κB mRNA 表達水平（P＜0.05），推測胃蘇顆粒治療慢性萎縮性胃炎的作用機制可能與上調胃黏膜TFF2、下調胃黏膜NF-κB的表達有關。但由于研究樣本偏少、隨訪時間較短，相關結果尚需進一步驗證。