• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    miRNA調(diào)控昆蟲(chóng)與病毒互作的研究進(jìn)展

    2019-02-15 12:15:30郭建洋萬(wàn)方浩
    生物安全學(xué)報(bào) 2019年2期
    關(guān)鍵詞:桿狀病毒靶標(biāo)宿主

    魯 莎, 郭建洋, 席 羽, 萬(wàn)方浩,,*

    1青島農(nóng)業(yè)大學(xué)植物醫(yī)學(xué)學(xué)院,山東 青島 266109; 2中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲(chóng)害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100193; 3中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所,廣東 深圳 518120

    作為非編碼RNA家族重要成員之一的miRNA是一類長(zhǎng)度為18~25個(gè)堿基的小RNA分子,在基因的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中發(fā)揮重要作用,可以通過(guò)mRNA剪切或者抑制蛋白質(zhì)翻譯的方式負(fù)調(diào)控靶標(biāo)基因(Florisetal.,2016; Kraussetal.,2018)。Leeetal. (1993)在秀麗隱桿線蟲(chóng)Caenorhabditiselegans中發(fā)現(xiàn)了第一個(gè)miRNA:lin-4,負(fù)調(diào)控lin-14基因表達(dá),使其在翻譯水平上受到抑制。隨后第二個(gè)miRNA分子let-7也在線蟲(chóng)中被成功鑒定,與lin-4調(diào)控機(jī)制相似(Reinhartetal.,2000)。此后被鑒定的miRNA的數(shù)量快速增長(zhǎng),截至2018年3月,在miRNA序列數(shù)據(jù)庫(kù)miRBase (http:∥www.mirbase.org/)第22版中收錄miRNA前體38589個(gè),共計(jì)產(chǎn)生48885個(gè)成熟miRNA,涵蓋了271個(gè)物種,其中包括33種昆蟲(chóng)、35種病毒;另有一專門(mén)針對(duì)病毒miRNA的數(shù)據(jù)庫(kù)Vir-Mir (http:∥alk.ibms.sinica.edu.tw/cgi-bin/miRNA/miRNA.cgi)統(tǒng)計(jì)獲得病毒miRNA前體30439個(gè),其中雙鏈DNA病毒(dsDNA)26339個(gè),昆蟲(chóng)中主要存在的桿狀病毒miRNA前體1683個(gè)。研究表明,miRNA可以調(diào)節(jié)大約50%的蛋白編碼基因,參與包括生長(zhǎng)發(fā)育、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡、激素分泌等多種生理過(guò)程(Taftetal.,2010),以及包括肺癌、結(jié)腸癌、病毒感染等多種病理過(guò)程(Gangaraju & Lin,2009; Katsushima & Kondo,2014)。

    病毒是害蟲(chóng)生物防治中的一種主要防治措施,然而,隨著病毒制劑的不斷應(yīng)用,昆蟲(chóng)與病毒之間相互作用、協(xié)同進(jìn)化,昆蟲(chóng)發(fā)展出對(duì)病毒的抗性,而病毒也相應(yīng)發(fā)展出應(yīng)對(duì)這種抗性的對(duì)策。近年來(lái),隨著miRNA不斷被發(fā)現(xiàn),昆蟲(chóng)與病毒中產(chǎn)生的miRNA研究熱度增大,其在兩者互作中的調(diào)控作用也成為關(guān)注熱點(diǎn)。宿主昆蟲(chóng)與病毒的基因組都能編碼miRNA,這些miRNA能調(diào)控大量基因的表達(dá)。研究表明,病毒侵染后的昆蟲(chóng),其體內(nèi)的miRNA表達(dá)水平發(fā)生顯著變化(Wuetal.,2013),引起差異表達(dá)的原因可能是宿主自身產(chǎn)生的免疫應(yīng)答反應(yīng),也可能是病毒感染所誘導(dǎo)的調(diào)控因子導(dǎo)致;另一方面,病毒編碼的miRNA也可調(diào)控自身復(fù)制相關(guān)基因或直接作用于宿主免疫相關(guān)基因。本文從miRNA的生成、調(diào)控機(jī)制及其功能等方面綜述miRNA的生物學(xué)特性,重點(diǎn)闡述其在昆蟲(chóng)和病毒互作中的調(diào)控作用,為害蟲(chóng)生物防治提供新的思路。

    1 miRNA的生成機(jī)制

    成熟miRNA的形成過(guò)程包括若干步驟:首先,編碼miRNA的基因在RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子的指導(dǎo)下被轉(zhuǎn)錄成初始miRNA(primitive miRNA, pri-miRNA)(Leeetal.,2004)。在細(xì)胞核內(nèi),pri-miRNA經(jīng)RNaseⅢ家族的Drosha內(nèi)切酶剪切后,形成帶有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的長(zhǎng)70~100 nt的前體miRNA(precursor miRNA, pre-miRNA)(Leeetal.,2003),這一過(guò)程中Pasha蛋白作為輔助蛋白與Drosha形成復(fù)合體(Yeometal.,2006)。加工好的pre-miRNA再由轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Exportin-5從細(xì)胞核主動(dòng)運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)中。Exportin-5可特異性識(shí)別經(jīng)RNaseⅢ(Drosha)剪切后在3′末端有2個(gè)未配對(duì)核苷酸的pre-miRNA,并保護(hù)pre-miRNA從核內(nèi)到胞質(zhì)的完整性(Zeng & Cullen, 2004)。轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中的pre-miRNA再進(jìn)一步被Dicer(RNaseⅢ家族中專門(mén)消化雙鏈RNA的酶分為dicer 1和dicer 2,將長(zhǎng)鏈dsRNA剪切成約21 nt的短鏈dsRNA)及其輔助因子TRBP切割成18~25個(gè)核苷酸長(zhǎng)度的雙鏈miRNA:miRNA*分子。miRNA*雙體中成熟miRNA鏈會(huì)選擇性地整合到RISC(RNA induced silencing complex)中識(shí)別靶基因,通過(guò)與靶標(biāo)mRNA的特定序列互補(bǔ)或不完全互補(bǔ)結(jié)合(Trujillordetal.,2010),誘導(dǎo)靶標(biāo)mRNA剪切或阻止其翻譯,從而調(diào)控靶基因表達(dá);另一條鏈miRNA*或許會(huì)快速降解(Leeetal.,2003)。還有一些來(lái)源和上述過(guò)程不同的miRNA,稱為mirtron (Du & Zamore,2005; Ghildiyaletal.,2010)。mirtron由一些小的內(nèi)含子經(jīng)過(guò)剪接和去分支后,可不經(jīng)過(guò)Drosha酶切而直接形成pre-miRNA,再進(jìn)一步加工為成熟的miRNA (Yangetal.,2014)。

    2 miRNA的調(diào)控機(jī)制

    miRNA與RISC結(jié)合形成miRISC效應(yīng)復(fù)合物后才能夠調(diào)控靶標(biāo)基因的表達(dá)。通常由miRNA的種子序列(5′第2~8位核苷酸)來(lái)識(shí)別靶基因,有2種機(jī)制來(lái)調(diào)控靶基因的表達(dá):mRNA剪切和翻譯抑制。miRNA與其靶基因的互補(bǔ)程度決定了它以何種機(jī)制沉默靶基因,當(dāng)其與靶基因幾乎完全互補(bǔ)時(shí)就會(huì)使mRNA降解;當(dāng)其與靶基因不完全互補(bǔ)時(shí)則會(huì)引起mRNA的翻譯抑制。盡管這個(gè)模型已被許多實(shí)驗(yàn)證實(shí),但在后續(xù)的研究中發(fā)現(xiàn)了例外,擬南芥Arabidopsisthaliana(L.)中miRNA-172盡管與靶標(biāo)基因APETALA2有近乎完全的堿基配對(duì),卻通過(guò)抑制靶標(biāo)基因的翻譯而行使功能(Chen,2004);哺乳動(dòng)物的miRNA-196與靶標(biāo)基因HOXB8的3′端非翻譯區(qū)(3′-UTR)幾乎完全互補(bǔ),卻導(dǎo)致靶基因的降解(Kawasaki & Taira,2004)。而miRNA與靶標(biāo)基因結(jié)合的位點(diǎn)也存在多種結(jié)合方式:早些時(shí)候認(rèn)為miRNA的靶標(biāo)位點(diǎn)位于靶基因的3′-UTR區(qū),但Schnall-Levinetal. (2010)利用軟件MinoTar (http:∥www.minotar.csail.mit.edu)預(yù)測(cè)并通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí),在mRNA的編碼區(qū)和5′-UTR區(qū)也有很多miRNA的結(jié)合位點(diǎn)。Lytleetal. (2007)研究發(fā)現(xiàn),let-7不僅靶向3′-UTR,同時(shí)靶向5′-UTR。 miRNA對(duì)基因的表達(dá)調(diào)控是一個(gè)十分復(fù)雜的機(jī)制,往往不是一對(duì)一的對(duì)應(yīng)關(guān)系,有可能一個(gè)靶基因由多個(gè)miRNA共同調(diào)控,也有可能一個(gè)miRNA調(diào)控多個(gè)靶基因表達(dá)(Legeaietal. 2010; Yuetal.,2007)。

    3 miRNA的功能研究

    從第一個(gè)miRNA發(fā)現(xiàn)至今,已經(jīng)有數(shù)以萬(wàn)計(jì)的miRNA在不同的生物中被發(fā)現(xiàn),miRNA在生物體中發(fā)揮的功能越來(lái)越引起人們的重視。目前對(duì)于其功能的研究主要還是通過(guò)基因突變或在miRNA的靶位點(diǎn)上引入突變來(lái)抑制miRNA的作用,通過(guò)觀察生物體的表型變化來(lái)推測(cè)miRNA的功能,這是一種反向遺傳學(xué)的研究方法(Jackson & Standart,2007)。另外一種推測(cè)miRNA功能的方法是對(duì)相應(yīng)的miRNA進(jìn)行過(guò)量表達(dá)。但是很多生物體的表型變化特征不明顯,因而人們開(kāi)始利用表達(dá)譜分析和生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)靶基因來(lái)研究其相對(duì)應(yīng)的miRNA功能。

    對(duì)已發(fā)現(xiàn)的一些miRNA的功能研究表明,miRNA幾乎參與了生物體的整個(gè)生命過(guò)程,主要調(diào)控生理和病理2個(gè)方面。生理方面如細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育、組織分化、胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡及形態(tài)發(fā)生等。病理方面包括miRNA的異常表達(dá)會(huì)引起人類的各種疾病發(fā)生,如癌癥、心血管紊亂、艾滋病、白血病、糖尿病等(Kloosterman & Plasterk,2006)。實(shí)驗(yàn)表明,miRNA在生物抵抗外界不良環(huán)境中起著十分重要的作用,miRNA的異常表達(dá)受環(huán)境壓力的影響,當(dāng)miRNA表達(dá)量變化時(shí)可以影響相應(yīng)的靶基因表達(dá),從而使生物體更好地適應(yīng)環(huán)境改變(Lema & Cunningham,2010)。例如,當(dāng)寄生蜂Glyptapantelesflavicoxis(Marsh)寄生舞毒蛾LymantriadisparL.后,舞毒蛾體內(nèi)相關(guān)miRNA發(fā)生顯著變化,從中發(fā)現(xiàn)miRNA對(duì)昆蟲(chóng)適應(yīng)環(huán)境變化起到了積極的促進(jìn)作用(Gundersen-Rindal & Pedroni,2010)。

    4 miRNA在昆蟲(chóng)與病毒互作中的作用

    4.1 病毒編碼的miRNA在宿主—病毒互作中的作用

    目前,已確定300種能編碼miRNA的病毒,這些病毒包括皰疹病毒、桿狀病毒、腺病毒、多瘤病毒、囊泡病毒和主要侵染鱗翅目昆蟲(chóng)的Nudivirus(Belluttietal.,2015; Kozomara & Griffiths-Jones,2014; Liuetal.,2017; Singhetal.,2014)。miRNA已經(jīng)在不同的桿狀病毒如斜紋夜蛾核型多角體病毒(SpltNPV)、苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒(AcMNPV)和家蠶核型多角體病毒(BmNPV)中被預(yù)測(cè),其中一些已在實(shí)驗(yàn)中證實(shí):Kharbandaetal. (2015)預(yù)測(cè)了48個(gè)新的SpltNPV編碼的miRNA,其中10個(gè)在Sf21細(xì)胞中進(jìn)行了驗(yàn)證;AcMNPV-miR-1被證實(shí)在AcMNPV感染的細(xì)胞中表達(dá),調(diào)節(jié)靶標(biāo)基因的表達(dá)以達(dá)到促進(jìn)病毒自身感染的目的(Zhuetal.,2013,2016)。為了揭示由BmNPV編碼的miRNA并闡明它們?cè)贐mNPV和宿主互作中產(chǎn)生的作用,Singhetal. (2010)通過(guò)檢測(cè)中腸和脂肪體組織中病毒miRNA的表達(dá)譜報(bào)道了4種BmNPV編碼的miRNA。其中一種miRNA:BmNPV-miR-3,可調(diào)節(jié)DNA結(jié)合蛋白的表達(dá),在病毒侵染階段發(fā)揮重要作用。BmNPV-miR-3在BmNPV侵染早期階段表達(dá),并對(duì)DNA結(jié)合蛋白進(jìn)行負(fù)調(diào)控,使用鎖核酸技術(shù)(locked nucleic acid,LNA)抑制BmNPV-miR-3的表達(dá)后,DNA結(jié)合蛋白的表達(dá)量增加,同時(shí)病毒量增加,而過(guò)表達(dá)BmNPV-miR-3則導(dǎo)致其表達(dá)量減少,病毒量也相應(yīng)減少。

    隨著對(duì)miRNA的深入研究,病毒來(lái)源的miRNA在調(diào)節(jié)病毒—宿主互作中發(fā)揮的重要作用被更多發(fā)現(xiàn)。病毒miRNA可直接改變宿主生理機(jī)制,干擾宿主與病毒互作中的宿主防御機(jī)制。一些病毒miRNA,如KUN-miR-1和OvHV-2-miR-5直接與昆蟲(chóng)宿主靶標(biāo)基因相互作用,直接調(diào)控病毒感染和病毒復(fù)制(Hussainetal.,2012; Riazetal.,2014; Wuetal.,2016)。BmNPV-miR-1通過(guò)調(diào)節(jié)輸出蛋白-5輔因子Ran來(lái)抑制其宿主miRNA的表達(dá),從而導(dǎo)致病毒增殖增強(qiáng)(Singhetal.,2012)。AcMNPV-miR-1是一種由AcMNPV編碼的miRNA,其堿基序列與病毒基因ODV-E25的編碼區(qū)完全匹配,通過(guò)下調(diào)ODV-E25 mRNA的表達(dá)削弱病毒的產(chǎn)生(Zhuetal.,2013)。Zhuetal. (2016)將Ac18和Ac95鑒定為AcMNPVmiR-1的2個(gè)新靶點(diǎn),盡管AcMNPV-miR-1與ac18和ac95顯示不完全匹配,但它可同時(shí)調(diào)節(jié)它們的表達(dá),總之,ac18的輕度表達(dá)和ac95的下調(diào)表達(dá)意味著AcMNPV-miR-1通過(guò)上調(diào)Ac18同時(shí)下調(diào)Ac95來(lái)抑制細(xì)胞感染和病毒復(fù)制?;谏鲜鰣?bào)道,可以認(rèn)為病毒miRNA可能靶向大量細(xì)胞轉(zhuǎn)錄物和病毒,利用miRNA作為調(diào)節(jié)細(xì)胞環(huán)境的有效手段,構(gòu)建病毒適宜生長(zhǎng)的內(nèi)部環(huán)境。

    4.2 昆蟲(chóng)編碼的miRNA在宿主—病毒互作中的作用

    研究表明,病毒感染可誘導(dǎo)宿主miRNA表達(dá)譜的變化。miRNA微芯片測(cè)序結(jié)果表明,棉鈴蟲(chóng)Helicoverpaarmigera(Hübner)感染棉鈴蟲(chóng)核型多角體病毒(HaSNPV)后脂肪體內(nèi)有127個(gè)差異表達(dá)的宿主miRNA(張松斗,2017)。埃及伊蚊Aedesaegypti(L.)感染登革熱病毒(DENV)會(huì)改變miRNA表達(dá)譜,在感染后第9天,23種miRNA表達(dá)量發(fā)生變化(Campbelletal.,2014)。白紋伊蚊AedesalbopictusSkuse感染DENV病毒后,miR-252在血淋巴中表達(dá)增加,并且抑制此miRNA導(dǎo)致病毒拷貝增加,而miRNA的過(guò)表達(dá)則抑制病毒繁殖(Yanetal.,2014)。埃及伊蚊感染ZIKV(一種主要由埃及伊蚊傳播的黃病毒)時(shí),感染組織與未感染組織相比較,其17種miRNA表達(dá)量發(fā)生變化,其中aae-miR-2940-3p和aae-miR-1-5p明顯上調(diào)表達(dá)(Saldaaetal.,2017)。感染BmCPV的家蠶BombyxmoriL.和正常家蠶比較,有58個(gè)miRNA表達(dá)差異顯著,10個(gè)差異表達(dá)的miRNA通過(guò)qRT-PCR方法進(jìn)一步被證實(shí)(施莉莉,2016),它們?cè)诓《靖腥竞蟊磉_(dá)水平的改變意味著可能在病毒—宿主互作中起作用。而桿狀病毒感染時(shí)sfrmiR-184下調(diào)4種不同基因的表達(dá)(Mehrabadietal.,2013)。斜紋夜蛾P(guān)rodenialitura(Fabricius)幼蟲(chóng)受到桿狀病毒感染后,大多數(shù)宿主miRNA表達(dá)水平下降,但在Sf9細(xì)胞中的miRNA、Bantam增加(Shietal.,2016)。

    有些種類的病毒能夠利用宿主細(xì)胞的miRNA促進(jìn)自身復(fù)制(Joplingetal.,2005),而其他的一些宿主miRNA卻能阻止病毒增殖(Sanghvi & Steel,2012)。Wolbachia能夠利用埃及伊蚊miRNA調(diào)控宿主的基因(如metalloprotease、MCTl、MCM6和methyltransferase)表達(dá)來(lái)抑制登革熱病毒的復(fù)制或促進(jìn)自身增殖(Osei-Amoetal.,2012)。當(dāng)白紋伊蚊感染登DENV后,miR-252表達(dá)增加,并且當(dāng)加入此miRNA抑制劑時(shí)導(dǎo)致病毒復(fù)制,而加入類似物時(shí)抑制病毒復(fù)制,推斷miR-252對(duì)DENV的復(fù)制侵染具有抑制作用(Yanetal.,2014)。HaSNPV能夠操縱棉鈴蟲(chóng)miR-14下調(diào)Ha-ECR基因的表達(dá),從而調(diào)節(jié)宿主幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育以促進(jìn)自身的復(fù)制(Jayachandranetal.,2013)。谷實(shí)夜蛾Helicoverpazea(Boddie)中的Hz-miR-24負(fù)調(diào)控編碼DNA依賴性RNA聚合酶家族的HvAV-3e的轉(zhuǎn)錄物DdRP和DdRPβ,從而對(duì)病毒復(fù)制起到調(diào)控作用(Hussain & Asgari,2010)。

    5 總結(jié)與展望

    miRNA的發(fā)現(xiàn)讓研究者對(duì)基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)控機(jī)制的理解又進(jìn)了一層。有關(guān)在昆蟲(chóng)免疫方面起作用的miRNA報(bào)道極少,Kayvanetal. (2013)證實(shí)小菜蛾P(guān)lutellaxylostellaL. miR-8正向調(diào)節(jié)絲氨酸蛋白酶抑制劑serpin27的轉(zhuǎn)錄水平,serpin27調(diào)節(jié)Toll途徑的激活和參與昆蟲(chóng)黑化反應(yīng)的酚氧化酶,在被半閉彎尾姬蜂DiadegmasemiclausumHellen寄生后,miR-8表達(dá)水平降低,導(dǎo)致serpin27轉(zhuǎn)錄水平顯著下降,作為宿主免疫應(yīng)答的一部分,miR-8及其靶標(biāo)基因serpin27在寄生后下調(diào)表達(dá)來(lái)激活宿主免疫系統(tǒng)。Yuanetal. (2017)報(bào)道了serpin-5和serpin-9在棉鈴蟲(chóng)感染桿狀病毒后上調(diào)表達(dá),抑制黑化反應(yīng),降低棉鈴蟲(chóng)的存活率。棉鈴蟲(chóng)核型多角體病毒(HearNPV)是近幾十年來(lái)越來(lái)越多地被用作害蟲(chóng)防治的生物殺蟲(chóng)劑,在桿狀病毒殺死害蟲(chóng)之前,它必須侵入并躲避宿主的免疫反應(yīng)。

    越來(lái)越多的昆蟲(chóng)或病毒的miRNA被發(fā)現(xiàn)和鑒定出來(lái),miRNA在昆蟲(chóng)宿主與病毒互作中調(diào)控作用的研究也成為熱點(diǎn)。昆蟲(chóng)miRNA能夠調(diào)控靶標(biāo)基因抑制病毒在其體內(nèi)的大量復(fù)制增殖,而病毒miRNA則利用宿主miRNA或自身產(chǎn)生的miRNA提高自身的增殖能力,從miRNA的角度揭示了昆蟲(chóng)與病毒之間的相互作用影響與協(xié)同進(jìn)化關(guān)系。進(jìn)一步探索miRNA在昆蟲(chóng)與病毒互作中的調(diào)控作用,可以為害蟲(chóng)生物防治提供新思路與新方法;研究miRNA在昆蟲(chóng)—病毒中的作用機(jī)制,可以為病毒制劑的研發(fā)提供理論基礎(chǔ)。

    猜你喜歡
    桿狀病毒靶標(biāo)宿主
    桿狀病毒載體滅活方法的研究進(jìn)展
    南美白對(duì)蝦白斑綜合癥桿狀病毒病(WSSV)的危害及預(yù)防措施
    “百靈”一號(hào)超音速大機(jī)動(dòng)靶標(biāo)
    病原體與自然宿主和人的生態(tài)關(guān)系
    科學(xué)(2020年3期)2020-11-26 08:18:22
    龜鱉類不可能是新冠病毒的中間宿主
    納米除草劑和靶標(biāo)生物的相互作用
    復(fù)雜場(chǎng)景中航天器靶標(biāo)的快速識(shí)別
    《豬流行性腹瀉病毒N蛋白桿狀病毒表達(dá)與間接ELISA方法建立》圖版
    凡納濱對(duì)蝦對(duì)蝦桿狀病毒PCR檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用
    表現(xiàn)為扁平苔蘚樣的慢性移植物抗宿主病一例
    淫妇啪啪啪对白视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 日韩高清综合在线| 国产精品久久久久久久久免| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲乱码一区二区免费版| 久久精品国产清高在天天线| 最后的刺客免费高清国语| 老司机福利观看| 国产午夜精品论理片| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲av成人av| 亚洲欧美日韩高清专用| 99精品在免费线老司机午夜| 中文字幕av成人在线电影| 深夜精品福利| 免费观看的影片在线观看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 在线播放无遮挡| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 成人欧美大片| 成人国产一区最新在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久久国产成人免费| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 一区二区三区激情视频| 亚洲18禁久久av| 最后的刺客免费高清国语| 久久精品国产亚洲av天美| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国内精品美女久久久久久| 91麻豆精品激情在线观看国产| 免费搜索国产男女视频| 欧美极品一区二区三区四区| h日本视频在线播放| 日本色播在线视频| 毛片一级片免费看久久久久 | 亚洲精品亚洲一区二区| 嫩草影院精品99| 无人区码免费观看不卡| 色5月婷婷丁香| 此物有八面人人有两片| 嫩草影院精品99| 少妇人妻精品综合一区二区 | 1024手机看黄色片| 免费在线观看日本一区| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲内射少妇av| 久久九九热精品免费| 亚洲图色成人| 精品福利观看| 高清日韩中文字幕在线| 一本一本综合久久| 看片在线看免费视频| 九九在线视频观看精品| 久久中文看片网| 嫩草影院入口| 黄色丝袜av网址大全| 少妇高潮的动态图| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 岛国在线免费视频观看| 内地一区二区视频在线| 在线观看免费视频日本深夜| 免费电影在线观看免费观看| 麻豆成人午夜福利视频| 午夜视频国产福利| 免费看a级黄色片| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产美女午夜福利| 色5月婷婷丁香| 最好的美女福利视频网| 日本爱情动作片www.在线观看 | 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 男人舔奶头视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚州av有码| 亚洲精品影视一区二区三区av| 黄片wwwwww| 亚洲av熟女| 成年免费大片在线观看| 91狼人影院| 午夜福利在线在线| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 在线a可以看的网站| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 观看免费一级毛片| 成人av一区二区三区在线看| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲欧美激情综合另类| 在线国产一区二区在线| 3wmmmm亚洲av在线观看| 91在线精品国自产拍蜜月| 美女高潮的动态| netflix在线观看网站| 国产高清视频在线播放一区| 听说在线观看完整版免费高清| x7x7x7水蜜桃| 看免费成人av毛片| 97超视频在线观看视频| 毛片女人毛片| 在线国产一区二区在线| 日韩中字成人| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 九色成人免费人妻av| 午夜精品在线福利| 免费在线观看日本一区| 亚洲精品一区av在线观看| 日韩强制内射视频| 99久国产av精品| 国产伦在线观看视频一区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 老司机午夜福利在线观看视频| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 精品久久久久久久久亚洲 | 九九在线视频观看精品| 波多野结衣高清作品| 99在线视频只有这里精品首页| 中文字幕久久专区| 免费看a级黄色片| 欧美成人性av电影在线观看| 国产精品永久免费网站| 12—13女人毛片做爰片一| 麻豆国产97在线/欧美| 国产美女午夜福利| 色综合色国产| 深夜精品福利| 成人鲁丝片一二三区免费| 黄色配什么色好看| 国产精品一区二区三区四区久久| 热99re8久久精品国产| 在线观看舔阴道视频| 日日啪夜夜撸| 99国产精品一区二区蜜桃av| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲 国产 在线| 露出奶头的视频| 精品无人区乱码1区二区| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 久久九九热精品免费| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 成人av一区二区三区在线看| 免费看美女性在线毛片视频| 高清在线国产一区| 亚洲成人久久性| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 国产单亲对白刺激| 小说图片视频综合网站| 亚洲无线在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲中文字幕日韩| 成人特级av手机在线观看| 久久久国产成人精品二区| 日韩精品中文字幕看吧| 国产成人福利小说| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久精品人妻少妇| 欧美成人a在线观看| av黄色大香蕉| 日韩一本色道免费dvd| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 久久精品国产亚洲av天美| 一区二区三区激情视频| 久久久精品欧美日韩精品| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲欧美日韩东京热| 日韩精品有码人妻一区| 99精品久久久久人妻精品| 赤兔流量卡办理| 亚洲乱码一区二区免费版| 午夜福利在线观看吧| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 91在线观看av| 香蕉av资源在线| 国产淫片久久久久久久久| 免费av观看视频| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 国产中年淑女户外野战色| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 韩国av在线不卡| 看十八女毛片水多多多| 久久久久久久午夜电影| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 成年免费大片在线观看| 999久久久精品免费观看国产| 91久久精品国产一区二区三区| 欧美3d第一页| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 制服丝袜大香蕉在线| 色尼玛亚洲综合影院| 1000部很黄的大片| 欧美在线一区亚洲| 欧美高清成人免费视频www| 黄片wwwwww| 亚洲欧美清纯卡通| 搞女人的毛片| 亚洲av成人av| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 天堂√8在线中文| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 少妇熟女aⅴ在线视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 禁无遮挡网站| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产亚洲91精品色在线| 婷婷丁香在线五月| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产午夜精品论理片| www.色视频.com| 99在线视频只有这里精品首页| 黄色一级大片看看| 九九热线精品视视频播放| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 免费在线观看影片大全网站| 亚洲七黄色美女视频| 精品久久久久久久久久久久久| 国内精品美女久久久久久| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产综合懂色| 国产 一区精品| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产精品人妻久久久久久| 黄片wwwwww| 1024手机看黄色片| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 久久久精品欧美日韩精品| 国产久久久一区二区三区| 亚洲成人久久性| 亚洲七黄色美女视频| 国内精品久久久久精免费| 村上凉子中文字幕在线| 国产精品一区www在线观看 | 日韩 亚洲 欧美在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产av不卡久久| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产精品福利在线免费观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 日本成人三级电影网站| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲在线观看片| 婷婷色综合大香蕉| 99精品久久久久人妻精品| 伦理电影大哥的女人| 精品久久久久久久久av| 精品一区二区三区av网在线观看| 少妇丰满av| 人妻少妇偷人精品九色| 欧美区成人在线视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲自偷自拍三级| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲美女黄片视频| 欧美色视频一区免费| 国产精品乱码一区二三区的特点| 18禁在线播放成人免费| 免费一级毛片在线播放高清视频| 日日撸夜夜添| 精品久久久久久成人av| www日本黄色视频网| 麻豆国产av国片精品| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产免费av片在线观看野外av| 久久99热6这里只有精品| 国产极品精品免费视频能看的| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 久久草成人影院| 在线播放无遮挡| 村上凉子中文字幕在线| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美高清成人免费视频www| 日本色播在线视频| 中国美女看黄片| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 别揉我奶头 嗯啊视频| 欧美最新免费一区二区三区| 午夜福利欧美成人| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| bbb黄色大片| 成人综合一区亚洲| 麻豆成人av在线观看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产一区二区在线av高清观看| 桃红色精品国产亚洲av| 性欧美人与动物交配| 中文字幕久久专区| 99视频精品全部免费 在线| 最好的美女福利视频网| 国产av在哪里看| 国产精品久久久久久精品电影| 国产精品av视频在线免费观看| av在线天堂中文字幕| 能在线免费观看的黄片| 99久久成人亚洲精品观看| 日本熟妇午夜| av中文乱码字幕在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 99在线视频只有这里精品首页| 免费在线观看日本一区| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产一区二区在线av高清观看| 日本欧美国产在线视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产毛片a区久久久久| 亚洲精品在线观看二区| 国国产精品蜜臀av免费| 日本一二三区视频观看| 亚洲人成网站在线播| 色5月婷婷丁香| 午夜福利在线在线| or卡值多少钱| 亚洲人与动物交配视频| 日日夜夜操网爽| 国产精品一区二区性色av| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产精华一区二区三区| 在线播放国产精品三级| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 久久人人精品亚洲av| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 日本在线视频免费播放| av天堂中文字幕网| 国产一区二区在线观看日韩| 国产精品精品国产色婷婷| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 特级一级黄色大片| ponron亚洲| АⅤ资源中文在线天堂| 精品人妻熟女av久视频| 国产精品电影一区二区三区| 色哟哟哟哟哟哟| 长腿黑丝高跟| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲av电影不卡..在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 日韩 亚洲 欧美在线| 成人一区二区视频在线观看| 日韩欧美 国产精品| 国产男人的电影天堂91| 色视频www国产| 欧美日韩国产亚洲二区| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产成人福利小说| 少妇人妻精品综合一区二区 | 好男人在线观看高清免费视频| 99热这里只有是精品50| 国产一区二区三区视频了| 成人国产麻豆网| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲美女搞黄在线观看 | av专区在线播放| 日本黄大片高清| 99热只有精品国产| 日日干狠狠操夜夜爽| 色视频www国产| 亚洲无线观看免费| 97碰自拍视频| 舔av片在线| 99热6这里只有精品| 色综合婷婷激情| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 午夜视频国产福利| 国产精品一区二区性色av| 久久精品影院6| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产成人a区在线观看| 国产乱人视频| 国产精品日韩av在线免费观看| 人妻少妇偷人精品九色| 中文字幕av在线有码专区| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 在线播放无遮挡| 日韩人妻高清精品专区| 久久久久久国产a免费观看| 在现免费观看毛片| 国产色爽女视频免费观看| 国产高清视频在线播放一区| 哪里可以看免费的av片| 国产中年淑女户外野战色| 看片在线看免费视频| 无遮挡黄片免费观看| 日本免费a在线| 亚洲欧美激情综合另类| 在线国产一区二区在线| 久久精品人妻少妇| 偷拍熟女少妇极品色| 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 一区二区三区高清视频在线| 变态另类丝袜制服| 国产精品一区www在线观看 | 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 99九九线精品视频在线观看视频| 99热6这里只有精品| 中国美白少妇内射xxxbb| av国产免费在线观看| 男女之事视频高清在线观看| 校园春色视频在线观看| 国产老妇女一区| 天堂√8在线中文| 老司机午夜福利在线观看视频| 在线观看66精品国产| 天堂√8在线中文| 国产v大片淫在线免费观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 精品久久国产蜜桃| 亚洲图色成人| 1000部很黄的大片| 搡老妇女老女人老熟妇| 精品久久久久久久久久久久久| 国产高清视频在线播放一区| 最近中文字幕高清免费大全6 | 色综合色国产| 精品乱码久久久久久99久播| 很黄的视频免费| 黄色配什么色好看| 日韩欧美三级三区| 韩国av在线不卡| 欧美最新免费一区二区三区| 成人特级av手机在线观看| 老司机福利观看| 国内精品美女久久久久久| 一夜夜www| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 最好的美女福利视频网| 嫩草影院入口| 午夜视频国产福利| 国产精品无大码| 春色校园在线视频观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲精品成人久久久久久| 夜夜爽天天搞| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产男靠女视频免费网站| 色精品久久人妻99蜜桃| 一本精品99久久精品77| 小说图片视频综合网站| 亚洲熟妇熟女久久| 99久国产av精品| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 成年女人永久免费观看视频| 免费看av在线观看网站| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲无线在线观看| 亚洲第一电影网av| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲黑人精品在线| 日日夜夜操网爽| 久久人人精品亚洲av| 亚洲精品久久国产高清桃花| 成人一区二区视频在线观看| 国产真实伦视频高清在线观看 | 内地一区二区视频在线| 1000部很黄的大片| 国产黄色小视频在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 12—13女人毛片做爰片一| 免费看美女性在线毛片视频| 国产久久久一区二区三区| 日日啪夜夜撸| 91av网一区二区| 欧美日韩乱码在线| 高清在线国产一区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 欧美性感艳星| 一本精品99久久精品77| 悠悠久久av| 岛国在线免费视频观看| 91在线观看av| 国产高清激情床上av| 国产精品一区www在线观看 | 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲人与动物交配视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| 久久中文看片网| 中文字幕精品亚洲无线码一区| h日本视频在线播放| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产单亲对白刺激| 亚洲第一区二区三区不卡| 日韩强制内射视频| 日韩欧美在线二视频| 亚洲一区二区三区色噜噜| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产精品av视频在线免费观看| x7x7x7水蜜桃| 免费av不卡在线播放| 男女边吃奶边做爰视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产av在哪里看| 简卡轻食公司| 国产熟女欧美一区二区| 一个人免费在线观看电影| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产伦精品一区二区三区视频9| 免费看av在线观看网站| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲欧美日韩高清专用| 九九在线视频观看精品| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产精品不卡视频一区二区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 成人国产麻豆网| 91精品国产九色| 亚洲精品在线观看二区| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲一区二区三区色噜噜| 桃红色精品国产亚洲av| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产黄色小视频在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 亚洲自偷自拍三级| 中文在线观看免费www的网站| 婷婷六月久久综合丁香| 精品日产1卡2卡| 国产一区二区三区av在线 | 亚洲精品亚洲一区二区| 国产淫片久久久久久久久| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久午夜福利片| 国产黄片美女视频| 日本爱情动作片www.在线观看 | 韩国av一区二区三区四区| 国产黄a三级三级三级人| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲自拍偷在线| 国产欧美日韩一区二区精品| 国内精品久久久久久久电影| 日本三级黄在线观看| 久久国产乱子免费精品| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲精品国产成人久久av| 欧美最黄视频在线播放免费| 久久人人精品亚洲av| 国产淫片久久久久久久久| 日本成人三级电影网站| 我要搜黄色片| 国产色婷婷99| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 美女 人体艺术 gogo| 免费无遮挡裸体视频| 最近中文字幕高清免费大全6 | 国产欧美日韩精品一区二区| 日本与韩国留学比较| 我要搜黄色片| 少妇的逼水好多| 国产91精品成人一区二区三区| 校园春色视频在线观看| 国产 一区精品| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲最大成人中文| 18禁在线播放成人免费| 欧美高清性xxxxhd video| 国语自产精品视频在线第100页| 精品久久久久久久久亚洲 | 国内精品美女久久久久久| 日本五十路高清| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产精品精品国产色婷婷| 精品久久久久久久久久久久久| 欧美bdsm另类| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 最近最新免费中文字幕在线| 黄色欧美视频在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲专区中文字幕在线| videossex国产| 亚洲色图av天堂| 国产精品日韩av在线免费观看| 一级av片app| 欧美又色又爽又黄视频| 简卡轻食公司| 久久香蕉精品热| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产精品一区www在线观看 | 97超视频在线观看视频| 日本一本二区三区精品| 亚洲美女黄片视频| 免费看日本二区| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产淫片久久久久久久久| 日本成人三级电影网站| 校园人妻丝袜中文字幕| 色综合婷婷激情| 亚洲熟妇中文字幕五十中出|