NGF在子宮內(nèi)膜異位癥疼痛患者血清及腹腔液表達的臨床意義

張黎敏 陳麗紅 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科 （福建 福州 350005）

內(nèi)容提要： 目的：探討子宮內(nèi)膜異位癥（Endometriosis，EMT）患者血清及腹腔液中神經(jīng)生長因子（Nerve Growth Factor，NGF）的表達及意義。方法：選擇2016年10月～2017年10月福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院確診EMT患者25例為EMT組，按視覺模擬評分法（VAS）分為輕度疼痛9例，中度疼痛10例，重度疼痛6例。選取除外內(nèi)異癥、無疼痛癥狀的卵巢良勝腫瘤、CINⅢ級或輸卵管積水等患者25例為對照組。ELISA檢測EMT組、對照組患者血清及腹腔液中NGF含量。結(jié)果：EMT組患者血清和腹腔液中NGF水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），重度疼痛患者較輕度疼痛、中度疼痛患者患者血清和腹腔液中NGF顯著增加，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：EMT組患者血清和腹腔液中NGF均明顯高表達，NGF水平的改變與EMT疼痛的發(fā)生有關(guān)。

子宮內(nèi)膜異位癥（Endometriosis，EMT）是育齡婦女中發(fā)病率高，危害性大的一類疾病，可引起不孕、月經(jīng)異常等，但疼痛常是EMT患者最突出、典型的癥狀，患者中慢性盆腔痛及痛經(jīng)發(fā)病率為50%～90%[1]。EMT組織可以分泌神經(jīng)生長因子（Nerve Growth Factor，NGF），NGF作為一種疼痛介質(zhì)，可介導(dǎo)EMT疼痛的發(fā)生。本研究擬通過檢測EMT患者血清及腹腔液NGF變化來探討EMT疼痛發(fā)生的機制。通過檢測EMT患者NGF水平升高，探討它們在EMT患者疼痛管理中的作用。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選取2016年10月～2017年10月就診于福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院的患者，并有手術(shù)指征患者，經(jīng)腹腔鏡或開腹手術(shù)和術(shù)后病理檢查確診，分別納入EMT和對照組。EMT組入選標準：手術(shù)確診內(nèi)異癥患者25例。并對EMT組患者以疼痛程度分級，采用視覺模擬評分法（VAS）[2]，1～3分為輕度疼痛，共9例，4～6分為中度疼痛，共10例，7～10分為重度疼痛，共6例。對照組為除外內(nèi)異癥、無疼痛癥狀的卵巢良勝腫瘤、CINⅢ級或輸卵管積水等患者25例。排除標準：同時合并內(nèi)異癥、子宮腺肌癥或伴其他內(nèi)分泌疾病、術(shù)前3個月內(nèi)接受過激素類藥物治療。患者年齡24～48歲，本研究已獲患者知情同意，并經(jīng)倫理委員會批準。

1.2 方法

血清、腹腔液NGF檢測方法：采用ELISA法，450nm酶標儀（南京華東電子科技公司）。采集患者入院后手術(shù)前肘部靜脈血4mL，術(shù)中腹腔積液4mL，以3000r/min離心10min，收集上清液；先加待測液10μL，再加稀釋液40μL；每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的NGF抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37?C水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次。每孔加入底物A、B各50μL，37?C避光孵育15min。每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，450nm酶標儀（南京華東電子科技公司）檢測OD值，計算相應(yīng)濃度。

表1. 兩組血清、腹腔液NGF水平比較(n=25,±s,pg/mL)

表1. 兩組血清、腹腔液NGF水平比較(n=25,±s,pg/mL)

組別 血清NGF 腹腔液NGF EMT組 56.88±24.01 67.52±27.78對照組 40.76±22.40 45.68±17.01

表2. EMT組不同疼痛分級患者血清、腹腔液NGF水平比較(±s,pg/mL )

表2. EMT組不同疼痛分級患者血清、腹腔液NGF水平比較(±s,pg/mL )

注：與重度疼痛相比，aP＜0.05

疼痛分級 n 血清NGF 腹腔液NGF輕度 9 41.22±13.40a 59.7±23.06a中度 10 52.90±21.87a 57.80±25.08a重度 6 87±7.69 102.6±9.52 F 14.22 7.84 P 0.000 0.03

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS23.0統(tǒng)計軟件。計量資料以±s表示，組間差異比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用兩樣本t檢驗。檢驗水準P=0.05，P＜0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組血清、腹腔液NGF水平比較

與對照組比較，EMT組血清及腹腔液NGF水平升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 EMT組輕度疼痛患者血清及腹腔液

EMT組不同疼痛分級患者血清、腹腔液NGF水平比較見表2。

3.討論

繼發(fā)性、漸近性痛經(jīng)是EMT的典型癥狀，除痛經(jīng)外，還包括慢性盆腔痛（Chronic Pelvic Pain，CPP）、大便疼痛和性交痛，可呈周期性發(fā)作或持續(xù)時間長，嚴重影響育齡婦女的身心健康，并造成嚴重的社會經(jīng)濟負擔(dān)[3-5]。臨床上對于疼痛的評價常用的是視覺模擬評分法（Visual Analogue Scoring，VAS）[2]，將疼痛的程度用0～10表示，0表示無痛，10代表最痛，患者根據(jù)自身疼痛程度選擇一個數(shù)字代表疼痛程度。緩解疼痛，改善生活質(zhì)量也是臨床治療的主要目的和重要的評價指標。疼痛的治療是EMT治療的關(guān)鍵及難題，現(xiàn)臨床藥物多種，但目前本病尚無藥物能夠徹底治愈。

EMT疼痛發(fā)生的機制尚不清楚，EMT疼痛患者的免疫機制異常及神經(jīng)調(diào)節(jié)日漸關(guān)注。趙冬梅等[6]認為炎癥介質(zhì)IL-6在EMT患者血清和組織標本中高表達，揭示了炎癥因子促進EMT發(fā)生進展的潛在機制。本研究表明，NGF與VAS之間呈相關(guān)性（P＜0.05），血清NGF的測定可能提供EMT疼痛檢測客觀指標。