氣相色譜儀測定復(fù)方丹參滴丸給藥制劑中異龍腦和龍腦含量

張奇 沈陽市鐵西區(qū)衛(wèi)生健康服務(wù)與行政執(zhí)法中心（沈陽市鐵西區(qū)疾病預(yù)防控制中心） （遼寧 沈陽 110021）

內(nèi)容提要： 目的：使用氣相色譜法測定復(fù)方丹參滴丸給藥制劑中異龍腦、龍腦的含量。方法：實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜法進(jìn)行測定，乙酸乙酯作為溶劑，水楊酸甲作為內(nèi)標(biāo)。色譜柱為HP-5型5%PHMEsiloxana石英毛細(xì)管柱。氮?dú)庾鳛楸敬螌?shí)驗(yàn)的載氣，分流的比例為10:1。FID檢測器，檢測器所設(shè)置溫度為250?C；進(jìn)樣口溫度為200?C；柱的溫度為100?C，保持在12min。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后可明顯地發(fā)現(xiàn)異龍腦在0.010～0.30mg/mL，龍腦在0.020～0.60mg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，異龍腦的平均回收率為97.6%，RSD為0.64%。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可明顯看出，本次實(shí)驗(yàn)方法較為的快速、準(zhǔn)確、可靠、所以說氣相色譜法可以應(yīng)用于復(fù)方丹參滴丸給藥制劑中異龍腦、龍腦含量的測定。

此次研究涉及的藥劑是復(fù)方丹參滴丸的水溶液，復(fù)方丹參滴丸的成分非常的復(fù)雜多樣，其中最主要的就是丹參以及冰片，所以說復(fù)方丹參滴丸具有極好的活血化瘀、理氣止痛的功效[1]。為了能夠更深入的研究處方中冰片的含量，使用氣相色譜法測試此類藥劑中的異龍腦、龍腦的含量，而藥劑中的冰片的含量則是這兩種藥品含量的和[2]。

1.資料與方法

1.1 一般資料

Agilent 6890氣相色譜儀、FID檢測器是本次實(shí)驗(yàn)主要的實(shí)驗(yàn)器具。此次異龍腦和龍腦含量的測試主要使用的藥劑有：龍腦對照品（批號(hào)BCBM2364V）、異龍腦對照品（批號(hào)MKBJ9230V）、水楊酸甲脂對照品，均來自于Sigam。乙酸乙醇作為本次實(shí)驗(yàn)的色譜純。

1.2 方法

色譜條件：色譜柱為Hp-5型5%PHMEsiloxana石英毛細(xì)血管柱，血管柱的溫度為100?C，時(shí)間為12min，總程序也是12min。FID氫火焰離子化檢測器，檢測器溫度為250?C；本次實(shí)驗(yàn)主要是使用氮?dú)庾鳛楸敬螌?shí)驗(yàn)的載氣；載氣的氣流流速為1.0mL/min；進(jìn)樣口的溫度為200?C，分流的比例為：10:1。

實(shí)驗(yàn)所用的內(nèi)標(biāo)溶液的準(zhǔn)備：首先是準(zhǔn)備內(nèi)標(biāo)溶液。在實(shí)驗(yàn)開始之后，將適量的水楊酸甲酯反之在適宜的量瓶中，之后將適量的水楊酸甲酯與乙酸乙酯進(jìn)行融合，制成實(shí)驗(yàn)需要的8mg/mL溶液備用。第二，準(zhǔn)備對照品的溶液備[3]。首先取龍腦對照品，精密稱取15mg、20mg以及25mg，將三份對照品放置在100mL的量瓶中，隨后在三個(gè)量瓶中分別加入4mL的內(nèi)標(biāo)溶液，之后再加入乙酸乙酯支撐的不同濃度的龍腦對照品溶液，進(jìn)行異龍腦溶液的制備[4]。選取一定的異龍腦對照品，精密稱取8mg、9mg以及12mg，將稱好的三份異龍腦對照品放置在100mL量瓶之中，在三個(gè)試管中都加入4mL的內(nèi)標(biāo)溶液，并加入不同濃度的對照組品溶液。第三，供試品溶液的制備。使用一定量的藥劑，并將藥劑放在離心管中，同時(shí)要加入適量的乙酸乙酯，之后就是將混合之后的物質(zhì)進(jìn)行劇烈搖動(dòng)，之后對這些物質(zhì)進(jìn)行萃取[5]。如果發(fā)生了乳化的情況就可以加入NaCL進(jìn)行破乳處理，將藥劑進(jìn)行5min的離心處理，隨后就可以使用吸管吸取萃取液并放在量瓶中。這個(gè)過程要重復(fù)兩次，進(jìn)行兩次萃取操作，每一次萃取10mL，隨后將萃取之后的溶液進(jìn)行合并，加入2mL內(nèi)標(biāo)液，在進(jìn)行定容時(shí)采用的是乙酸乙酯，并將溶液進(jìn)行搖晃，直至溶液中的物質(zhì)充分的溶解，使之成為供試品溶液。第四，根據(jù)相應(yīng)的處方的規(guī)定將丹參以及三七用水進(jìn)行煎煮處理，使之成為溶液，并將溶液中的多余的物質(zhì)進(jìn)行過濾，最后將這個(gè)溶液進(jìn)行濃縮，在濃縮后的濾液中加入一定的乙醇，靜置一段時(shí)間，使得濾液中一些物質(zhì)可以沉淀下去，待濾液分層之后，取上層清液，對乙醇進(jìn)行二次回收處理，并將得到的溶液進(jìn)行不斷的濃縮處置，直至其成為稠膏。將溶液濃縮成為稠膏之后，將適量的經(jīng)過在熔融處理的聚乙二醇中加入稠膏中，并將兩者攪拌均勻，最后在稠膏中加入液體石蠟，使稠膏成為包薄膜衣的滴丸，也就是陰性樣品[6]。制作出陰性樣品之后，稱取適量的陰性樣品0.2g，將稱好的陰性樣品放置在50mL的塑料離心管之中，然后制作陰性溶液備用。

專屬性的試驗(yàn)：將所有已經(jīng)制作完成的溶液分別注入氣相色譜儀，進(jìn)行測定測，并使用內(nèi)標(biāo)法計(jì)算其中的龍腦和異龍腦含量。有實(shí)驗(yàn)可以看出，空白的溶劑、陰性樣品對藥劑中的龍腦和異龍腦含量不產(chǎn)生影響。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，首先選取龍腦對照品，重量大約是100mg，將稱取的100mg龍腦對照品放置在50mL量瓶中，隨后在龍腦對照品中加入制作的龍腦對照品母液。并吸取龍腦對照品母液15、10、5、3、1以及0.5(單位：mL），將選取的溶液放置在50mL量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)液2mL，將溶液配制成不同濃度的龍腦對照品溶液。

精密度的實(shí)驗(yàn)：選擇同時(shí)進(jìn)行制作的藥劑制作份供試品溶液，并在一定的色譜條件下檢測其中的含量。樣品中冰片的平均含量是0.356mg/mL，RSD的含量為0.76%。

加速回收率的實(shí)驗(yàn)：選擇一定量的給藥劑并將藥劑放在離心管內(nèi)，將其分成9份，并在藥劑中加入異龍腦標(biāo)準(zhǔn)液，隨后制備供異龍腦回收率試驗(yàn)溶液。選取給藥制劑5mL，將選取的給藥制劑放在50mL的塑料離心管中，隨后加入1.2mg/mL的龍腦標(biāo)準(zhǔn)液，制備供龍腦回收率試驗(yàn)溶液。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 22.0對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，用x±s對數(shù)據(jù)進(jìn)行表示，對計(jì)量資料進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)使用t，對計(jì)數(shù)資料進(jìn)行檢驗(yàn)則使用χ2，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，測定樣品中冰片的平均含量為0.356mg/mL，RSD為0.86%，所以說精密度是比較好的。并且可以發(fā)現(xiàn)，龍腦以及異龍腦不同的濃度范圍內(nèi)才能表現(xiàn)出良好的線性關(guān)系。根據(jù)加樣回收率試驗(yàn)的結(jié)果可以明顯的發(fā)現(xiàn)，異龍腦的平均回收率為98.43%，RSD為0.65%；龍腦的平均回收率為98.53%，RSD為0.96%，可見異龍腦的平均回收率是低于龍腦的平均回收率的，且龍腦的RSD要明顯的低于異龍腦的RSD。

3.討論

在對相關(guān)的溶劑進(jìn)行選擇時(shí)，主要的選擇原則就是對實(shí)驗(yàn)的影響較小，其中最適合的就是乙酸乙酯溶劑，其對樣品有較好的溶解效果，又可以有效地避免空白溶劑的干擾，本次實(shí)驗(yàn)所使用的研究方法，都是經(jīng)過一定的試驗(yàn)得到驗(yàn)證的，并且所有的研究步驟都非常的安全謹(jǐn)慎，得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果非常的可靠。綜上所述，氣相色譜法可以應(yīng)用于復(fù)方丹參滴丸給藥制劑中異龍腦、龍腦含量的測定。