飼料中不同葉酸、維生素B12水平對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)及免疫力的影響

，，，，，

(1.天津市晨輝飼料有限公司 天津市水族動(dòng)物功能性飼料企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 301800；2.天津農(nóng)學(xué)院 水產(chǎn)學(xué)院，天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300384)

葉酸和維生素B12(VB12)均屬于B族維生素，是一類(lèi)具有輔酶功能的水溶性維生素，在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)中起著重要作用[1]。葉酸作為一碳基團(tuán)的供體或受體，其輔酶以四氫葉酸的形式參與許多生化反應(yīng)，在氨基酸和核苷酸等物質(zhì)代謝中起著重要的作用[2]。VB12是甲基鈷胺的輔酶，參與體內(nèi)一碳基團(tuán)的代謝，與葉酸一起合成甲硫氨酸和膽堿，在生物代謝過(guò)程中起到轉(zhuǎn)甲基的作用[3]。方春林等[4]認(rèn)為，葉酸和VB12是衡量水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)狀況的指標(biāo)，魚(yú)類(lèi)體內(nèi)缺乏葉酸和VB12時(shí)，均表現(xiàn)為食欲減退，生長(zhǎng)性能低下。趙志勇[5]、吳凡等[6]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，葉酸、VB12均對(duì)魚(yú)體生長(zhǎng)有明顯的促進(jìn)作用。

黃顙魚(yú)Pelteobagrusfulvidraco俗稱(chēng)黃姑、黃臘丁、嘎魚(yú)等，隸屬于鲇形目Siluriformes、鲿科Bagridae、黃顙魚(yú)屬Pelteobagrus，廣泛分布于中國(guó)各大水系[7]。隨著市場(chǎng)需求的擴(kuò)大，天然水域中的黃顙魚(yú)數(shù)量銳減，多數(shù)通過(guò)人工養(yǎng)殖來(lái)滿(mǎn)足市場(chǎng)需求[8]。然而，隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大和養(yǎng)殖密度的增加，黃顙魚(yú)病害頻發(fā)，使其品質(zhì)大幅降低。黃顙魚(yú)病害頻發(fā)主要與自身攝取營(yíng)養(yǎng)不足、免疫力低下有關(guān)。因此，研究黃顙魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)免疫有助于提高其免疫功能和抗病能力，推動(dòng)其養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展[9]。葉酸和VB12為黃顙魚(yú)健康生長(zhǎng)發(fā)育所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，參與生物體內(nèi)許多重要反應(yīng)和重要物質(zhì)的合成，因魚(yú)體自身不能合成葉酸和VB12，只能從飼料中攝取。目前，有關(guān)葉酸和VB12對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)、免疫力影響的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)中，在飼料中添加不同含量的葉酸和VB12，以探究其對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)及免疫力的影響，旨在為黃顙魚(yú)養(yǎng)殖技術(shù)的提升提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)所用黃顙魚(yú)購(gòu)自天津市和來(lái)科技有限公司，在天津市晨輝飼料有限公司循環(huán)水養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室對(duì)魚(yú)體消毒并暫養(yǎng)一周后，挑選體格健壯、規(guī)格一致的黃顙魚(yú)900尾，隨機(jī)分為9個(gè)試驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組進(jìn)行試驗(yàn)，每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)為30尾魚(yú)。

1.2 方法

1.2.1 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在藍(lán)色塑料周轉(zhuǎn)箱(58 cm×68 cm×40 cm)中進(jìn)行,養(yǎng)殖周期為56 d，每天7:00、19:00飼喂兩次，日投喂量為體質(zhì)量的3%～6%，養(yǎng)殖期間水溫為24～30 ℃，pH為7.5～8.0，溶解氧為7.3～8.0。每天記錄死亡魚(yú)數(shù)及投餌量。

1.2.2 試驗(yàn)飼料的制備 本試驗(yàn)中以葉酸、VB12為影響因素，葉酸水平為0.15%、0.30%、0.45%，VB12水平為0.05%、0.10%、0.15%，采用雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)中的“3×3因子設(shè)計(jì)”法，配制成Diet 1、Diet 2、Diet 3、Diet 4、Diet 5、Diet 6、Diet 7、Diet 8、Diet 9共9種飼料，以不添加葉酸和VB12的飼料作為對(duì)照組。

表1 試驗(yàn)飼料組成(風(fēng)干基礎(chǔ))Tab.1 Ingredients of the test diets (air-dry basis) w/%

注：1) 預(yù)混料為每千克飼料提供：Cu (CuSO4) 3.50 mg，F(xiàn)e (FeSO4) 140 mg，Mn (MnSO4) 15 mg，Zn (ZnSO4) 40 mg，I (KI) 0.50 mg，Se (H2NaOSe) 0.30 mg，Co 0.25 mg，Mg 100 mg，Na 100 mg，VA 6000 IU，VD32000 IU，VB19 mg，VB29 mg，VB545 mg，VB67.50 mg，VC 90 mg，VE 60 mg，VK310 mg，煙酸 45 mg，D-泛酸 30 mg，肌醇 80 mg，膽堿 2000 mg

Note：1) The premix provides the following(per kg of diet)：Cu (CuSO4) 3.50 mg，F(xiàn)e (FeSO4) 140 mg，Mn (MnSO4) 15 mg，Zn (ZnSO4) 40 mg，I (KI) 0.50 mg，Se (H2NaOSe) 0.30 mg，Co 0.25 mg，Mg 100 mg，Na 100 mg，VA 6000 IU，VD32000 IU，VB19 mg，VB29 mg，VB545 mg，VB67.50 mg，VC 90 mg，VE 60 mg，VK310 mg，nicotinic acid 45 mg， D-pantothenic acid 30 mg，inositol 80 mg，and choline 2000 mg

表2試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)成分(干物質(zhì)基礎(chǔ))

Tab.2 Nutrient levels of the test diets (air-drybasis)w/%

注：飼料營(yíng)養(yǎng)水平均為實(shí)測(cè)值

Note：Nutrient levels are measured and expressed as average values

1.2.3 指標(biāo)測(cè)定與計(jì)算

(1) 生長(zhǎng)指標(biāo)。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，禁食24 h，分別稱(chēng)取每個(gè)重復(fù)中黃顙魚(yú)的體質(zhì)量。生長(zhǎng)指標(biāo)計(jì)算公式為

增重率(WGR)=100%×(lnWt-lnW0)/W0，

特定生長(zhǎng)率(SGR)=100%×(lnWt-lnW0)/t，

飼料系數(shù)(FCR)=F/(Wt-W0)。

其中：Wt、W0分別為試驗(yàn)終末和初始魚(yú)體質(zhì)量(g)；F為飼料攝入量(干質(zhì)量，g)；t為試驗(yàn)時(shí)間(d)。

(2) 免疫指標(biāo)。從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)取5尾魚(yú)，用1 mL注射器從尾靜脈取血，后將血液轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中，于4 ℃下靜置6 h，以4000 r/min離心10 min，分離血清于-20 ℃下保存?zhèn)溆?。采血后將黃顙魚(yú)在冰浴條件下進(jìn)行解剖，剝?nèi)「闻K。

黃顙魚(yú)血清和肝臟組織中的補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定，試驗(yàn)操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示(mean±S.D.)。采用SPSS 18.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單、雙因子方差分析(ANOVA)，采用Duncan法進(jìn)行組間多重比較，顯著性水平設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中葉酸、VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

從表3可見(jiàn)：各試驗(yàn)組飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)終末體質(zhì)量、增重率及特定生長(zhǎng)率均有極顯著性影響(P<0.01)，添加葉酸和VB12的試驗(yàn)組黃顙魚(yú)終末體質(zhì)量、增重率、特定生長(zhǎng)率和飼料系數(shù)均顯著優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)；二者的交互作用對(duì)黃顙魚(yú)終末體質(zhì)量、增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)均無(wú)顯著性影響(P>0.05)。在其中一因素水平固定的情況下，黃顙魚(yú)終末體質(zhì)量、增重率、特定生長(zhǎng)率均隨著另一因素水平的增加而增加，飼料系數(shù)有下降趨勢(shì)；在葉酸水平為0.15%時(shí)，VB12水平變化對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)無(wú)顯著性影響(P>0.05)；在葉酸水平為0.30%和0.45%時(shí)，隨VB12水平的升高，黃顙魚(yú)終末體質(zhì)量、增重率、特定生長(zhǎng)率顯著升高(P<0.05)。當(dāng)飼料葉酸/VB12水平為0.45%/0.15%時(shí)，黃顙魚(yú)終末體質(zhì)量、增重率及特定生長(zhǎng)率最高且飼料系數(shù)最低，除與葉酸/VB12水平為0.15%/0.15%、0.30%/0.15%、0.45%/0.10%無(wú)顯著性差異(P>0.05)外，均顯著高于其他組(P<0.05)。

表3飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)指標(biāo)的影響

Tab.3EffectsofdietaryfolicacidandvitaminB12levelsonthegrowthperformanceofyellowcatfishPelteobagrusfulvidraco

組別group葉酸/%folic acidVB12/%vitamin B12終末體質(zhì)量/gfinal body weight增重率/%weight gain rate特定生長(zhǎng)率/(%·d-1)specific growth rate飼料系數(shù)food conversion ratioDiet 10.150.0555.67±1.44c75.04±4.15c1.00±0.04c3.04±0.03bDiet 20.150.1057.93±1.51bc80.48±4.62bc1.05±0.04bc2.99±0.12bcDiet 30.150.1560.64±0.91abc92.16±3.95abc1.17±0.04abc2.65±0.06dDiet 40.300.0556.53±1.17c77.77±3.69c1.03±0.01bc3.03±0.03bDiet 50.300.1059.40±0.50bc86.21±1.77bc1.11±0.02abc2.79±0.04bcdDiet 60.300.1563.42±1.61ab99.41±4.57ab1.23±0.04ab2.74±0.05cdDiet 70.450.0558.53±1.17bc84.10±4.29bc1.09±0.04bc2.95±0.03bcDiet 80.450.1061.49±1.78abc93.87±6.84abc1.18±0.06abc2.78±0.02bcdDiet 90.450.1566.92±0.89a108.67±2.06a1.31±0.02a2.66±0.08d對(duì)照control44.51±1.30d38.95±6.39d0.59±0.05d3.37±0.01a兩因素主效應(yīng)檢驗(yàn) main effect test of the two factors0.1558.081b82.559b1.073b2.894a0.3059.783ab87.799ab1.123ab2.857a0.4562.314a95.544a1.194a2.799a0.0559.910c78.969b1.038b3.011a0.1059.609b86.852b1.114b2.856b0.1563.660a100.081a1.237a2.683c雙因子方差分析(P值) Two-way ANVOA(P Value)葉酸 folic acid0.003**0.005**0.006**0.161VB120.000**0.000**0.000**0.000**葉酸×VB120.7360.9350.9660.197

注：同列中標(biāo)有不同小寫(xiě)字母者表示組間有顯著性差異(P<0.05)，標(biāo)有相同小寫(xiě)字母者表示組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)；*表示有顯著性影響(P<0.05),**表示有極顯著性影響(P<0.01)，下同

Note:The means with different letters within the same column are significantly different among the groups at the 0.05 probability level, and the means with the same letters within the same column are not significant differences;*means significant effect(P<0.05)，** means very significant effect(P<0.01), et sequentia

因素水平效應(yīng)檢測(cè)表明：飼料中添加葉酸的最優(yōu)水平為0.45%，在此水平下，黃顙魚(yú)的終末體質(zhì)量、增重率、特定生長(zhǎng)率均最高，且與0.15%葉酸水平組有顯著性差異(P<0.05)，對(duì)黃顙魚(yú)飼料系數(shù)影響不顯著(P>0.05)；飼料中添加VB12的最優(yōu)水平為0.15%，在此水平下，黃顙魚(yú)的各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)均最好，且顯著好于其他VB12水平組(P<0.05)。

2.2 飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)血清中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量的影響

從表4可見(jiàn)：葉酸、VB12各水平及其交互作用對(duì)黃顙魚(yú)血清中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量均無(wú)顯著性影響(P>0.05);葉酸/VB12水平為0.45%/0.15%時(shí)，黃顙魚(yú)血清中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量最高，對(duì)照組含量最低，各試驗(yàn)組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表4飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)血清中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量的影響

Tab.4EffectsofdietaryfolicacidandvitaminB12levelsonserumcomplementC3andcomplementC4contentsofyellowcatfishPelteobagrusfulvidraco

組別 group葉酸/% folic acid VB12/%vitamin B12補(bǔ)體/(mg·dL-1)complement C3補(bǔ)體/(mg·dL-1) complement C4Diet 10.150.055.95±0.213.26±0.20Diet 20.150.106.05±0.383.14±0.14Diet 30.150.157.15±.0153.47±0.29Diet 40.300.056.12±0.613.12±0.12Diet 50.300.106.33±0.313.50±0.46Diet 60.300.156.23±0.442.93±0.29Diet 70.450.056.44±0.113.41±0.26Diet 80.450.107.03±0.123.02±0.71Diet 90.450.157.35±0.403.87±0.15對(duì)照 control5.87±0.342.86±0.14兩因素主效應(yīng)檢驗(yàn) main effect test of the two factors0.156.3833.2900.306.2273.1810.456.9383.4320.056.1683.4170.106.5763.2170.156.8043.270雙因子方差分析(P值) Two-way ANVOA (P value)葉酸 folic acid0.0520.476VB120.1090.601葉酸×VB120.2270.117

2.3 飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)肝臟補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量的影響

從表5可見(jiàn)：葉酸、VB12各水平及其交互作用對(duì)黃顙魚(yú)肝臟補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量無(wú)顯著性影響(P>0.05)；葉酸/VB12水平為0.45%/0.15%時(shí)，黃顙魚(yú)肝臟補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量最高，對(duì)照組含量較低，各試驗(yàn)組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表5飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)肝臟中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量的影響

Tab.5EffectsofdietaryfolicacidandvitaminB12levelsonlivercomplementC3andcomplementC4contentsofyellowcatfishPelteobagrusfulvidraco

組別 group葉酸/%folic acidVB12/%vitamin B12補(bǔ)體 /(mg·mg-1 prot)complement C3補(bǔ)體/(mg·mg-1 prot)complement C4Diet 10.150.0578.53±4.1027.76±2.64Diet 20.150.1082.25±1.8725.76±1.27Diet 30.150.1584.14±2.2628.37±1.09Diet 40.300.0584.19±1.5326.91±2.13Diet 50.300.1079.49±0.7527.03±1.57Diet 60.300.1580.65±2.5728.16±2.51Diet 70.450.0581.33±0.9024.28±1.28Diet 80.450.1081.41±2.7225.35±2.25Diet 90.450.1586.57±1.5028.89±2.30對(duì)照 control 79.97±1.5320.81±0.75兩因素主效應(yīng)檢驗(yàn) main effect test of the two factors0.1583.52827.6770.3082.23427.3700.4580.42325.9740.0584.02926.6940.1081.04726.0500.1581.11028.097雙因子方差分析(P值) Two-way ANVOA (P value)葉酸 folic acid0.3200.471VB120.2600.447葉酸×VB120.5420.801

2.4 飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)血清中免疫指標(biāo)的影響

從表6可見(jiàn)：飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)血清中NO含量、NOS活性均有極顯著性影響(P<0.01)，二者的交互作用對(duì)黃顙魚(yú)血清中NO含量、NOS活性無(wú)顯著性影響(P>0.05)；在VB12添加水平固定的情況下，0.45%葉酸水平試驗(yàn)組黃顙魚(yú)NO含量及NOS活性均顯著高于0.15%組(P<0.05)；在葉酸/VB12水平為0.45%/0.15%時(shí)，NO含量、NOS活性均達(dá)到最高。因素水平效應(yīng)檢測(cè)表明：葉酸各水平間黃顙魚(yú)血清中NO含量有顯著性差異(P<0.05)，0.30%、0.45%葉酸水平組NOS活性顯著高于0.15%水平組(P<0.05)，最優(yōu)水平為0.45%；VB12各水平間黃顙魚(yú)血清中NO含量有顯著性差異(P<0.05)，0.10%、0.15% VB12水平組NOS活性顯著高于0.05%水平組(P<0.05)，最優(yōu)水平為0.15%。

表6飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)血清中NO、NOS的影響

Tab.6EffectsofdietaryfolicacidandvitaminB12levelsonserumNOcontentandNOSactivityofyellowcatfishPelteobagrusfulvidraco

組別 group葉酸/%folic acidVB12/% vitamin B12NO/(μmoL·L-1)NOS/(U·mL-1)Diet 10.150.054.01±0.05c8.14±0.05bDiet 20.150.104.12±0.12c8.19±0.22bDiet 30.150.154.30±0.09c8.26±0.15abDiet 40.300.054.41±0.13bc8.22±0.23abDiet 50.300.104.46±0.09bc8.69±0.47abDiet 60.300.154.93±0.20ab9.20±0.23abDiet 70.450.054.95±0.09ab9.22±0.13abDiet 80.450.105.20±0.10a9.47±0.17aDiet 90.450.155.41±0.10a9.48±0.30a對(duì)照 control 3.33±0.18d6.78±0.32c兩因素主效應(yīng)檢驗(yàn) main effect test of the two factors0.154.147c5.543b0.304.601b6.051a0.455.189a6.241a0.054.459c5.646b0.104.595b6.006a0.154.883a6.184a雙因子方差分析(P值) Two-way ANVOA (P value)葉酸 Folic acid0.000**0.000**VB120.001**0.001**葉酸×VB120.6350.129

2.5 飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)肝臟免疫指標(biāo)的影響

從表7可見(jiàn)：飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)肝臟中NO含量均有極顯著性影響(P<0.01)，二者的交互作用對(duì)黃顙魚(yú)血清中NO含量、NOS活性均無(wú)顯著性影響(P>0.05)；在VB12添加水平固定的情況下，0.45%葉酸水平組NO含量及NOS活性均高于0.15%組；在葉酸/VB12水平為0.45%/0.15%時(shí)，NO含量、NOS活性均達(dá)到最高。因素水平效應(yīng)檢測(cè)表明：葉酸0.45%水平組黃顙魚(yú)血清中NO含量和NOS活性含量顯著高于0.15%水平組(P<0.05)，最優(yōu)水平為0.45%；0.15% VB12水平組黃顙魚(yú)血清中NO含量顯著高于0.05%水平組(P<0.05)， VB12各水平組NOS活性無(wú)顯著性差異(P>0.05)，最優(yōu)水平為0.15%。

表7飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)肝臟組織NO、NOS的影響

Tab.7EffectsofdietaryfolicacidandvitaminB12levelsonliverNOcontentandNOSactivityofyellowcatfishPelteobagrusfulvidraco

組別 group葉酸/%folic acidVB12/%vitamin B12NO/(μmoL·g-1 prot)NOS/(U·g-1 prot)Diet 10.150.055.07±0.04c6.31±0.14bcDiet 20.150.105.57±0.06bc6.41±0.10abcDiet 30.150.155.98±0.10ab6.46±0.27abcDiet 40.300.055.93±0.10ab6.53±0.31abcDiet 50.300.106.18±0.17ab6.62±0.32abcDiet 60.300.156.04±0.25ab6.78±0.22abDiet 70.450.055.93±0.17ab6.84±0.18abDiet 80.450.106.26±0.09ab7.02±0.05abDiet 90.450.156.53±0.17a7.45±0.29a對(duì)照 control4.89±0.16c5.54±0.13c兩因素主效應(yīng)檢驗(yàn) main effect test of the two factors0.155.543b6.394b0.306.051a6.643ab0.456.241a7.107a0.055.646b6.561a0.106.006a6.686a0.156.184a6.898a雙因子方差分析(P值) Two-way ANVOA (P value)葉酸 folic acid0.000**0.004**VB120.001**0.215葉酸×VB120.1290.864

3 討論

3.1 飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)的影響

葉酸和VB12均為機(jī)體非常重要的水溶性維生素，二者分別參與機(jī)體一碳單位的轉(zhuǎn)移及代謝，對(duì)生物合成和細(xì)胞分裂生長(zhǎng)具有重要的作用[3,5,10]。趙智勇[5]在研究草魚(yú)Ctenopharyngodonidellus魚(yú)種葉酸需要量的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加3.6～4.3 mg/kg的葉酸可促進(jìn)草魚(yú)的生長(zhǎng)，還可提高草魚(yú)的飼料利用率。魏建軍等[11]探討葉酸和VB12對(duì)中華絨螯蟹Eriocheirsinensis生長(zhǎng)、非特異性免疫和免疫力的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加葉酸和VB12可顯著促進(jìn)中華絨螯蟹幼蟹的生長(zhǎng)，葉酸/VB12的添加水平為2.3/0.2 mg/kg時(shí)幼蟹生長(zhǎng)最佳。吳凡等[6]研究VB12對(duì)草魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)飼料中VB12的添加量為0.10 mg/kg時(shí)，草魚(yú)幼魚(yú)的特定增長(zhǎng)率和增重率最高。本試驗(yàn)中通過(guò)在飼料中添加葉酸和VB12發(fā)現(xiàn)，葉酸、VB12對(duì)黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)均具有顯著性影響。在葉酸/VB12水平為0.45%/0.15%時(shí)，黃顙魚(yú)的增重率和特定增長(zhǎng)率最高，飼料系數(shù)最低，這與上述學(xué)者的研究結(jié)果基本一致，表明飼料中添加適宜的葉酸和VB12可提高黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)性能，提高飼料利用率。

3.2 飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)組織中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量的影響

目前，魚(yú)類(lèi)抗應(yīng)激系統(tǒng)如何形成還未見(jiàn)明確報(bào)道，但在淋巴器官和免疫能力成熟之前，先天防御機(jī)制是至關(guān)重要的，而補(bǔ)體系統(tǒng)是非特異性免疫中非常重要的組成部分，參與機(jī)體的防御功能，并且可以增強(qiáng)機(jī)體在應(yīng)急條件下維持穩(wěn)態(tài)的能力[12]。目前，有關(guān)維生素對(duì)黃顙魚(yú)體內(nèi)補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4的影響鮮有報(bào)道。Sesay等[13]研究表明，飼料中葉酸含量為2.0、5.0 mg/kg時(shí)，武昌魚(yú)Megalobramaamblycephala血清中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量得到顯著提升。本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)肝臟及血清中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量無(wú)顯著性影響，但當(dāng)葉酸/VB12添加量為0.45%/0.15%時(shí)，黃顙魚(yú)肝臟及血清中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量最高，這與上述學(xué)者的研究結(jié)果基本一致，說(shuō)明葉酸和VB12的添加對(duì)提升黃顙魚(yú)組織及血清中補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4含量有一定的促進(jìn)作用。

3.3 飼料中葉酸和VB12水平對(duì)黃顙魚(yú)組織中NO含量、NOS活性的影響

一氧化氮NO是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的參與體內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的氣體信號(hào)分子[14]，在神經(jīng)、免疫、呼吸等系統(tǒng)中均發(fā)揮著重要作用[15]。NO的生物合成主要受NOS調(diào)節(jié)，此外，其還受底物濃度和輔助因子的調(diào)節(jié)[16-17]。目前，尚未見(jiàn)有關(guān)葉酸和VB12對(duì)魚(yú)類(lèi)組織中NO及NOS影響的報(bào)道。姜雅秋[18]研究表明，葉酸和VB12可顯著降低Hhcy造成的血管內(nèi)皮的損傷，使血漿中NO含量上升，NOS活性提高；賈文斌等[19]的試驗(yàn)表明，給予適當(dāng)?shù)陌被岷途S生素制劑干預(yù)，可明顯減輕力竭疲勞大鼠Rattusnorvegicus骨骼肌的損傷，使保護(hù)性物質(zhì)NO、NOS增高。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中添加葉酸和VB12對(duì)黃顙魚(yú)肝臟組織和血清中的NO含量、NOS活性有顯著性影響，在添加的葉酸/VB12水平為0.45%/0.15%時(shí)，肝臟組織和血清中NO含量、NOS活性均達(dá)到最高。這與姜雅秋[18]、賈文斌等[19]的研究結(jié)果一致，但劉歡[20]研究發(fā)現(xiàn)，葉酸能提高腦缺血大鼠抗氧化能力，使NO含量降低，這種結(jié)果的差異可能與試驗(yàn)對(duì)象不同有關(guān)。

4 結(jié)語(yǔ)

黃顙魚(yú)攝食缺乏葉酸和VB12的飼料會(huì)表現(xiàn)出生長(zhǎng)緩慢、飼料轉(zhuǎn)化率低等癥狀，在飼料中添加葉酸和VB12可改善黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)性能，提高免疫力。本試驗(yàn)結(jié)果表明，葉酸水平為0.45%、VB12水平為0.10%時(shí)，可顯著促進(jìn)黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)，提高黃顙魚(yú)的免疫力，明顯降低飼料成本。