腫瘤微環(huán)境及基于微環(huán)境的腫瘤治療策略研究的若干新進(jìn)展①

封 賀 王建莉 路小超 趙同軍

(河北工業(yè)大學(xué)理學(xué)院生物物理研究所，天津 300401)

近年來(lái)，對(duì)微環(huán)境在腫瘤發(fā)展過(guò)程中作用的認(rèn)識(shí)越來(lái)越深入，與腫瘤相關(guān)的微環(huán)境研究已成為最受關(guān)注的研究領(lǐng)域之一，針對(duì)腫瘤微環(huán)境的靶向治療也成為人們研究的熱點(diǎn)。2004年美國(guó)國(guó)立癌癥研究所將腫瘤細(xì)胞及微環(huán)境相關(guān)研究作為重點(diǎn)資助項(xiàng)目，我國(guó)針對(duì)腫瘤微環(huán)境也進(jìn)行了大量的研究。腫瘤微環(huán)境主要由腫瘤細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)蛋白(Extracellular matrix，ECM)、血管、成纖維細(xì)胞、免疫細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞(Endothelial cells，ECs)、神經(jīng)和細(xì)胞外因子組成，這些微環(huán)境因素彼此關(guān)聯(lián)相互影響，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中共同發(fā)揮作用[1]。研究表明，腫瘤微環(huán)境不僅在腫瘤細(xì)胞增殖、免疫反應(yīng)、血管生成、腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移等腫瘤發(fā)展過(guò)程中的多個(gè)階段和過(guò)程起著至關(guān)重要的作用，在癌癥治療期間機(jī)體的調(diào)節(jié)過(guò)程中也扮演重要的角色[2,3]。對(duì)腫瘤微環(huán)境的研究，將有助于人們更加深入地了解腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)理，為臨床實(shí)踐及進(jìn)一步開(kāi)展相關(guān)研究提供參考。本文就近年來(lái)腫瘤微環(huán)境相關(guān)研究及基于微環(huán)境的各種腫瘤治療策略加以綜述。

1 腫瘤微環(huán)境中的細(xì)胞外基質(zhì)

腫瘤的ECM是由膠原蛋白、彈性蛋白、糖蛋白和蛋白聚糖等組成的一個(gè)復(fù)雜的大分子網(wǎng)絡(luò)。這些大分子是由腫瘤細(xì)胞分泌到細(xì)胞外，并附著在腫瘤細(xì)胞表面或細(xì)胞之間。腫瘤細(xì)胞表面黏附的這些蛋白對(duì)腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移起到了非常重要的促進(jìn)作用[4-6]。在腫瘤發(fā)展的不同階段，ECM會(huì)受到膠原酶、透明質(zhì)酸酶、基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinase，MMPs)、基質(zhì)降解酶和金屬蛋白酶抑制劑(Tissue inhibitor of matrixmetalloproteinase，TIMP)等多種酶調(diào)控，因而在功能上會(huì)有所不同[7]。這表現(xiàn)在，一方面ECM的存在能在腫瘤發(fā)展的早期預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移[8]，另一方面隨著腫瘤的發(fā)展，ECM的大量存在會(huì)削弱抗癌藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。另外，在轉(zhuǎn)移的癌癥中，破壞ECM可以提高抗癌藥效[7]。

在針對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的靶向腫瘤治療中，納米技術(shù)成為人們研究的熱點(diǎn)，其治療策略主要有三種，破壞ECM、仿制ECM以抑制腫瘤的進(jìn)展和干預(yù)ECM自然產(chǎn)生機(jī)制[4]。

針對(duì)腫瘤ECM破壞的方法大致包含三種。傳統(tǒng)的方法通常是使用物理的手段，如輻照、高熱和超聲波等來(lái)達(dá)到治療的目的[9,10]。然而物理方法會(huì)存在一些缺點(diǎn)，比如對(duì)正常組織會(huì)造成潛在的物理傷害。相比之下，用某些酶或藥物來(lái)擾亂ECM是一種更加可行的策略，這種方法近年來(lái)取得了很大的進(jìn)展。例如透明質(zhì)酸酶(HAase)和膠原酶可以分解ECM[11]，而使用重新編程的人類 HAase PH20可以提高抗癌的效率[12]。第三種方法是使用化學(xué)藥劑如環(huán)巴胺。環(huán)巴胺可以破壞腫瘤細(xì)胞外的纖維蛋白，減少腫瘤血管并改善腫瘤的血液灌注率，提高抗腫瘤的效果。將含有環(huán)巴胺和紫杉醇的納米聚合物(PEG-PLA NPs)作用于腫瘤組織，可以改變細(xì)胞外基質(zhì)沉淀，改善胰腺癌腫瘤藥物灌注并顯著抑制腫瘤的生長(zhǎng)[13,14]。

在腫瘤的發(fā)展早期，通過(guò)人工仿制ECM，加強(qiáng)ECM對(duì)腫瘤細(xì)胞的束縛，能夠重塑腫瘤微環(huán)境，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。例如，在乳腺癌和黑色素瘤腫瘤模型中，在腫瘤部位使用人工ECM(NFs)超過(guò)3 d，可以有效抑制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[4,8]。

另外，干預(yù)ECM自然產(chǎn)生機(jī)制也逐漸成為人們研究的新領(lǐng)域[4]。最近研究表明，在小鼠乳腺腫瘤模型中，使用LOXL2抗體，可以干預(yù)原生腫瘤膠原蛋白的產(chǎn)生機(jī)制，進(jìn)而抑制腫瘤的生長(zhǎng)[15]。

2 腫瘤血管微環(huán)境

除了細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)腫瘤入侵轉(zhuǎn)移起著重要的促進(jìn)作用外，在實(shí)體腫瘤中，血管生成是腫瘤最為重要的標(biāo)志，參與腫瘤的發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移等各個(gè)階段。

當(dāng)實(shí)體瘤直徑達(dá)到2 mm左右時(shí)，很難在周圍環(huán)境中獲得足夠的氧氣和營(yíng)養(yǎng)，腫瘤細(xì)胞便會(huì)分泌促血管生成因子進(jìn)入腫瘤微環(huán)境誘導(dǎo)血管再生[16]。促血管生成因子中比較重要的有血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-A(Vascular endothelial growth factor A，VEGF-A)、胎盤生長(zhǎng)因子(Placenta growth factor，PLGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)[16]。這些促血管生成因子共同作用激活周圍血管的靜息內(nèi)皮細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子如整合素等促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移和血管形成[16]。人們普遍認(rèn)為，在腫瘤微環(huán)境中由VEGF和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(Vascular endothelial growth factors receptors，VEGFRs)介導(dǎo)的信號(hào)級(jí)聯(lián)通路，可以改變血管通透性進(jìn)而促進(jìn)腫瘤血管新生[17]。最近的研究表明，VEGF/神經(jīng)纖維蛋白-2(Neuropilins-2，NRP-2)信號(hào)傳導(dǎo)可直接促進(jìn)腫瘤干細(xì)胞(Cancer stem cells，CSC)的增殖[18]。因?yàn)樾律苡绊懩[瘤生長(zhǎng)，所以抗血管治療被認(rèn)為是有前景的癌癥治療方案。

2.1腫瘤血管微環(huán)境及腫瘤藥物治療 新生血管為腫瘤生長(zhǎng)提供更多氧氣和營(yíng)養(yǎng)，使得腫瘤細(xì)胞數(shù)量短時(shí)間急劇增多。由于血管生成的過(guò)程受各種血管生成因子調(diào)節(jié)，使得不同腫瘤以及不同腫瘤區(qū)域形成的血管網(wǎng)絡(luò)分布不同，形成的腫瘤血管微環(huán)境存在差異，對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響也會(huì)不同。此時(shí)，相對(duì)于腫瘤周邊區(qū)域，腫瘤中心顯示較高的細(xì)胞增殖速率。此外，新生血管還參與癌細(xì)胞擴(kuò)散等活動(dòng)[19]。

腫瘤內(nèi)已形成血管與附近腫瘤細(xì)胞之間有一段距離，所以血管運(yùn)輸?shù)乃幬锎蚱蒲芷琳喜⒛軠?zhǔn)確到達(dá)治療區(qū)域是腫瘤藥物治療的關(guān)鍵[19]。由于形成腫瘤血管的內(nèi)皮細(xì)胞間隙超過(guò)納米大小，使得納米尺寸的藥物載體可以通過(guò)藥物滲透貫穿血管壁，并積聚在腫瘤組織中釋放抗癌藥物，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，進(jìn)而阻礙腫瘤的生長(zhǎng)[20]。其中，藥物滲透是由血管內(nèi)的壓力梯度驅(qū)動(dòng)并通過(guò)細(xì)胞間隙進(jìn)行的[21]。但腫瘤微環(huán)境會(huì)限制藥物的滲透性，導(dǎo)致腫瘤組織內(nèi)藥物分布不均勻、治療效果不穩(wěn)定。

2.2血管微環(huán)境中的內(nèi)皮細(xì)胞 依據(jù)腫瘤血管微環(huán)境特性，可實(shí)施血管阻斷策略治療腫瘤。通過(guò)快速打破腫瘤內(nèi)已形成的血管網(wǎng)絡(luò)，阻斷其對(duì)腫瘤生長(zhǎng)過(guò)程中氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的供應(yīng)，對(duì)腫瘤細(xì)胞實(shí)行饑餓治療，實(shí)現(xiàn)最終治療腫瘤的目的[22,23]。實(shí)驗(yàn)表明，腫瘤微環(huán)境中ECs產(chǎn)生的血管分泌因子，如凹形(Notch)配體、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(Hepatocyte growth factor,HGF)和細(xì)胞外因子(Wnt)，對(duì)于組織和器官的維持起關(guān)鍵作用[24]。在腫瘤微環(huán)境中針對(duì)ECs的調(diào)控可能有效地破壞腫瘤血管，提高治療的效果。許多制藥公司依據(jù)VEGF特性，開(kāi)發(fā)了VEGF靶向藥物，其中包括針對(duì)VEGFRs的酪氨酸激酶抑制劑等[25]。

VEGF靶向藥物最初不是用于破壞血管微環(huán)境，而是用于抑制腫瘤的血管生成。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，單獨(dú)將血管生成抑制藥物用于荷瘤小鼠模型中能有效抑制其腫瘤生長(zhǎng)。然而，除少數(shù)臨床實(shí)例以外，單獨(dú)將血管生成抑制藥物應(yīng)用于人類腫瘤治療時(shí)則不能有效抑制腫瘤生長(zhǎng)，造成這種結(jié)果的原因可能是人類和小鼠體內(nèi)新生血管對(duì)VEGF的依賴性不同所致[26]。而血管生成抑制劑與抗癌藥物的聯(lián)合療法可能對(duì)腫瘤的治療是有效的。在聯(lián)合療法中，血管生成抑制劑在破壞以前建立的腫瘤血管系統(tǒng)時(shí)，一方面降低血管的分布密度，限制氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的供給，另一方面使得抗癌藥物滲透到腫瘤深層發(fā)揮作用從而殺死癌細(xì)胞[26]。在晚期腎癌中，使用VEGF抑制劑阿西替尼和派姆單抗聯(lián)合治療，在Ⅰ期臨床試驗(yàn)中取得了良好效果[27]。通過(guò)VEGF誘騙受體(VEGF-grab)與放射療法相結(jié)合，可以有效抑制VEGF-A和PLGF的作用，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞的血管新生，使腫瘤血管正常化，最終達(dá)到良好的抗腫瘤效果。這種聯(lián)合療法為臨床治療提供了一個(gè)很好的借鑒[28]。

腫瘤血管網(wǎng)絡(luò)的變化使腫瘤微環(huán)境中的免疫應(yīng)答也發(fā)生變化。研究顯示，VEGF抑制劑和前列腺素E2抑制劑都能抑制腫瘤中ECs的一種二型跨膜蛋白(Fas配體)的表達(dá)，使得CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)，調(diào)動(dòng)機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)揮作用[29]。另外，有報(bào)道VEGF信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑直接抑制T細(xì)胞中的PD1配體表達(dá)，并最終實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制[29]。這些從ECs出發(fā)對(duì)腫瘤血管微環(huán)境調(diào)控，誘導(dǎo)腫瘤微環(huán)境中的免疫應(yīng)答發(fā)生變化，其中涉及的微環(huán)境是實(shí)現(xiàn)抑制腫瘤需要考慮的重要因素。

3 腫瘤微環(huán)境中的巨噬細(xì)胞

巨噬細(xì)胞主要來(lái)源于單核前體細(xì)胞，這些單核前體細(xì)胞通過(guò)趨化因子CCL2、CCL5、CXCL等被招募到腫瘤微環(huán)境中，形成腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(Tumor associated macrophages，TAMs)[30]。TAMs占腫瘤組織重量的比例可以達(dá)到50%，大量巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)與不良預(yù)后密切相關(guān)[31]。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在IFN-γ、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage-colony-stimulating factor，GM-CSF)、脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)、IL-4、IL-10、TGF-β、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)和前列腺素E2(Prostaglandin E2，PGE2)等作用下可以大致極化為兩種狀態(tài)：經(jīng)典活化的M1型巨噬細(xì)胞和替代活化的M2型巨噬細(xì)胞。M1型巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬作用實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的抑制。同時(shí)通過(guò)釋放促炎細(xì)胞因子、免疫激活因子和趨化因子能夠激活免疫系統(tǒng)，從而對(duì)腫瘤產(chǎn)生抑制作用。M2型巨噬細(xì)胞在組織修復(fù)和腫瘤進(jìn)展中扮演重要角色。由M2型巨噬細(xì)胞所分泌的VEGF、纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子bFGF、血小板源生長(zhǎng)因子(Platelet derived growth factor，PDGF)等細(xì)胞因子能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的血管生成。M2產(chǎn)生的蛋白水解分子，如血纖維蛋白溶酶、尿激酶型纖溶酶原激活劑(uPA)、MMP和組織蛋白酶B等可以直接重建細(xì)胞外基質(zhì)[32]。此外M2型巨噬細(xì)胞還可以產(chǎn)生免疫抑制因子，包括PGE2、吲哚胺2、雙加氧酶(IDO)、IL-10，這些免疫抑制因子導(dǎo)致免疫抑制。這些研究清楚地表明，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤明確的調(diào)控作用，促使人們將TAMs作為重要的抗腫瘤藥物靶標(biāo)探索治療對(duì)策。

目前，針對(duì)TAMs的靶向治療主要有以下幾個(gè)策略：第一種是抑制TAMs向腫瘤部位的募集。使用單克隆抗體(mAbs)或化學(xué)藥劑等藥物可以抑制單核細(xì)胞趨化因子和細(xì)胞因子受體，進(jìn)而抑制腫瘤的生長(zhǎng)，這些治療方法目前還在臨床前和臨床試驗(yàn)測(cè)試中[33,34]。其中某些藥物，如CCL-2抗體、CSF-1 抗體、CSF-1R 抑制劑、FLT3抑制劑尚處于小鼠體內(nèi)試驗(yàn)階段?？笽L-6抗體、趨化因子受體CXCR4抑制劑等已處于Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段[34]。第二種策略是減少TAMs的數(shù)量。減少TAMs的數(shù)量主要有兩個(gè)方法，一個(gè)是減少血液中單核細(xì)胞的數(shù)量，而另一個(gè)則是減少腫瘤組織中已經(jīng)存在的巨噬細(xì)胞數(shù)量。在小鼠體內(nèi)使用的藥物主要有雙膦酸鹽、豆莢蛋白、曲貝替定、阿侖單抗及抗毒素等。通過(guò)減少TAMs的數(shù)量，抑制腫瘤的生長(zhǎng)、擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移[35-37]。其中曲貝替定已進(jìn)入Ⅱ期臨床試驗(yàn)[38]。對(duì)M2型巨噬細(xì)胞重編程使其轉(zhuǎn)化為M1型巨噬細(xì)胞是一種新穎的抗腫瘤潛在治療方案。有幾項(xiàng)研究表明，通過(guò)脂多糖、CpG和小干擾RNA(siRNA)激活的受體家族可以將TAMs轉(zhuǎn)化為M1型巨噬細(xì)胞。此外，通過(guò)對(duì)核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB或STAT3信號(hào)通路進(jìn)行處理，可將TAMs轉(zhuǎn)換為M1型巨噬細(xì)胞，如葡聚糖、索拉非尼等藥物正在臨床試驗(yàn)階段[39-42]。還有一個(gè)可行的治療策略就是增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能。多數(shù)腫瘤會(huì)在其表面表達(dá)CD47“不要吃我”蛋白。CD47與巨噬細(xì)胞表達(dá)的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα)結(jié)合，可以有效地逃避巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的吞噬。使用Hu5F9-G4、CC-90002、外來(lái)體-SIRPα等可以抑制CD47與SIRPα相結(jié)合，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，抑制腫瘤的生長(zhǎng)[31,43]。

4 腫瘤微環(huán)境中的成纖維細(xì)胞

成纖維細(xì)胞來(lái)源于纖維母細(xì)胞及其他間質(zhì)細(xì)胞，其主要功能是維持組織的結(jié)構(gòu)骨架，在腫瘤組織中，成纖維細(xì)胞是腫瘤基質(zhì)的重要組成部分。

在微環(huán)境中，腫瘤細(xì)胞通過(guò)分泌生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子招募成纖維細(xì)胞，這些成纖維細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞相互作用形成腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(Cancer-associated fibroblasts，CAF)[44]。CAF的募集受到微血管損傷、細(xì)胞之間接觸和可溶性因子、細(xì)胞因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子以及ECM蛋白、蛋白酶、蛋白酶抑制劑等多種因素的調(diào)控。

腫瘤微環(huán)境中成纖維細(xì)胞對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的調(diào)控是多方面的。在早期階段，CAF通過(guò)和活化的成纖維細(xì)胞形成縫隙連接對(duì)腫瘤產(chǎn)生抑制[45]。隨著腫瘤的發(fā)展,CAF釋放基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、VEGF以及PDGF促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)并且介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的耐藥性。CAF通過(guò)程序性死亡蛋白配體(PD-L2)和凋亡相關(guān)因子配體(FASL)誘導(dǎo)T細(xì)胞的凋亡，進(jìn)而對(duì)免疫產(chǎn)生抑制[46]。此外，CAF還會(huì)分泌細(xì)胞外基質(zhì)、蛋白水解酶、類肝素酶等可以促使細(xì)胞外基質(zhì)重塑[22]。

以CAF為靶標(biāo)的腫瘤治療目前還處于試驗(yàn)階段。一種重要的策略就是阻斷由癌細(xì)胞和CAF激活的信號(hào)通路。例如在小鼠胰腺導(dǎo)管腺癌中，以過(guò)度活躍的黏著斑激酶(FAK)為靶標(biāo)，使用FAK抑制劑(VS-4718)不僅可以減少纖維化，還可以減少腫瘤免疫抑制細(xì)胞的數(shù)量，進(jìn)而提高患者的存活率[47,48]。另一種策略是抑制由CAF表達(dá)的成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)。在荷瘤小鼠體內(nèi)，通過(guò)使用FAP酶抑制劑Talabostat，上調(diào)誘發(fā)抗腫瘤免疫反應(yīng)的特異性趨化因子和細(xì)胞因子，可以達(dá)到抗腫瘤的目的[49]。人類FAP抗體sibrotuzumab在小鼠模型中能表現(xiàn)出特異性和活性，在腫瘤的早期階段可以很好地抑制腫瘤的生長(zhǎng)[50,51]。第三種策略是以FGFR亞型為靶標(biāo)對(duì)腫瘤進(jìn)行治療。在實(shí)體腫瘤的治療中FGFR亞型已作為重要的靶標(biāo)。Lucitanib是一種受體酪氨酸激酶抑制劑，作用于FGFR異構(gòu)體1到3、VEGFR 異構(gòu)體1到3、PDGF α和β，目前在FGF擴(kuò)增轉(zhuǎn)移性乳腺癌中正處于Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段。非特異性受體酪氨酸激酶抑制劑多維替尼，對(duì)FGFR3有抑制作用，目前對(duì)實(shí)體腫瘤(NCT014 97392)的治療已進(jìn)入Ⅰ期臨床試驗(yàn)階段，而對(duì)尿道癌(NCT01732107)和前列腺癌的治療研究則處于Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段[52]。

5 腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞

在腫瘤微環(huán)境中，腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(Tumor infiltrating lymphocyte，TIL)是必不可少的組成部分，對(duì)腫瘤產(chǎn)生重要的調(diào)節(jié)作用。腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(TIL)包含各種各樣的CD3+CD4+和CD3+CD8+T細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(Natural killer cell，NK)以及髓系抑制性細(xì)胞(Myeloid-derived suppressor cell，MDSCs)，是 TME的重要組成部分[53]。由于T細(xì)胞浸潤(rùn)使腫瘤表達(dá)的趨化因子可以介導(dǎo)CD8+效應(yīng)T細(xì)胞的招募，CD8+效應(yīng)T細(xì)胞通過(guò)穿孔素和顆粒酶B的分泌誘導(dǎo)靶標(biāo)細(xì)胞的凋亡。然而，CD4+Th2細(xì)胞和CD4+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是可以有效地抑制CD8+T細(xì)胞抗腫瘤反應(yīng)的[54]。MDSCs通過(guò)多種機(jī)制抑制活化淋巴細(xì)胞的功能，誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(Cytotoxic T lymphocytes，CTL)耗竭。例如，在卵巢癌小鼠模型中，MDSCs高表達(dá)PD-L1和CD80，顯著抑制了對(duì)腫瘤抗原的免疫反應(yīng)。TIL高表達(dá)的TIGIT與腫瘤細(xì)胞表面的CD155結(jié)合后可以顯著抑制NK細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的功能。TIGIT-Fc在體外也能抑制CD8+T細(xì)胞的激活，這種抑制作用取決于骨髓來(lái)源的樹(shù)突細(xì)胞(BMDCs)上CD155的存在以及IL-10的產(chǎn)生[55,56]。 由于TME的多因素復(fù)雜情況，以及腫瘤細(xì)胞表面大量的PD-L1，使腫瘤免疫微環(huán)境處于抑制狀態(tài)。

在以TIL為靶標(biāo)的治療中發(fā)現(xiàn)姜黃素不僅可以激活記憶T細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞，還可以防止調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的形成，從而增強(qiáng)T細(xì)胞對(duì)腫瘤的殺傷作用。同時(shí)，姜黃素還可以改變腫瘤微環(huán)境，增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞的活性，進(jìn)而更好地抑制腫瘤的生長(zhǎng)。此外，姜黃素和免疫療法相結(jié)合，可以抑制TGF-β、吲哚胺2,3和二氧合酶(IDO)等多種免疫抑制因子，增加T細(xì)胞的募集，進(jìn)而達(dá)到更好的抗腫瘤目的[53,57]。單獨(dú)使用TIGIT單抗或與其他免疫療法聯(lián)合使用可對(duì)荷瘤小鼠進(jìn)行免疫治療，增強(qiáng)NK細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫應(yīng)答，有效地抑制腫瘤的生長(zhǎng)，延長(zhǎng)荷瘤小鼠的存活時(shí)間[58]。進(jìn)一步的研究表明，阻斷NKG2A受體可促進(jìn)小鼠和人體中的自然殺傷細(xì)胞(NK)和CD8+T細(xì)胞的效應(yīng)，從而增強(qiáng)抗腫瘤免疫。使用人源化抗NKG2A抗體蒙利珠單抗(Monalizumab)，可增強(qiáng)NK細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的抗腫瘤活性，達(dá)到抗腫瘤的目的。該免疫療法打開(kāi)了癌癥治療新的突破點(diǎn)，對(duì)開(kāi)發(fā)新一代免疫療法有重要意義[59,60]。此外，大量研究表明，淋巴細(xì)胞活化基因-3(Lympho-cyte activation gene-3，LAG-3)不但抑制具有抗腫瘤活性的CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、NK細(xì)胞的增殖，而且直接影響其免疫功能。使用LAG-3抑制劑抑制LAG-3能夠讓T細(xì)胞及NK細(xì)胞重新獲得細(xì)胞毒性，同時(shí)，還能夠降低調(diào)節(jié)性T細(xì)胞抑制免疫反應(yīng)的功能。針對(duì)該靶點(diǎn)的抗體藥物將來(lái)有可能成為重要的抗腫瘤藥物[61,62]。最近與PD-1抗體聯(lián)合治療的策略是人們研究的熱點(diǎn)，如抗CTLA-4、免疫監(jiān)測(cè)點(diǎn)抑制劑BMS-986016、抗GITR BMS-986156、BMS-986205、抗IDO抑制劑等與PD-1抑制劑聯(lián)合治療，已在臨床階段取得良好的進(jìn)展[63,64]。

6 結(jié)論與展望

腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)等多種過(guò)程離不開(kāi)特定的腫瘤微環(huán)境，微環(huán)境方面的研究使人們對(duì)于腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)理的認(rèn)識(shí)越來(lái)越深入，啟發(fā)人們探索腫瘤臨床治療的新途徑。然而，目前基于腫瘤微環(huán)境的惡性腫瘤治療方法還不夠完善。

盡管以TME為目標(biāo)并在臨床前研究階段取得了成功，但就目前而言，將這些策略轉(zhuǎn)化為臨床實(shí)踐還是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn)。值得注意的是，腫瘤微環(huán)境中的成纖維細(xì)胞與巨噬細(xì)胞調(diào)控可能引起微環(huán)境其他因素隨之改變，導(dǎo)致對(duì)腫瘤的影響難以精確估測(cè)。另外，微環(huán)境療法如何與常規(guī)免疫療法更好地結(jié)合，從而提高腫瘤治療效果，重新塑造而不是消除TME將是一種非常有潛力的治療策略，值得進(jìn)一步探索。總之，腫瘤微環(huán)境相關(guān)療法，仍需要進(jìn)行更深入的研究以及大量的臨床驗(yàn)證，從而在腫瘤治療過(guò)程中有效殺死癌細(xì)胞、延遲或預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)。