記憶性ILCs研究進(jìn)展①

王憲偉 田志剛

(合肥微尺度物質(zhì)科學(xué)國家研究中心分子醫(yī)學(xué)部，中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)免疫學(xué)研究所,合肥230027)

固有淋巴細(xì)胞(Innate lymphoid cells，ILCs)是近年來新發(fā)現(xiàn)的一類淋巴細(xì)胞，由NK細(xì)胞、ILC1s、ILC2s、ILC3s、淋巴組織誘導(dǎo)細(xì)胞(Lymphoid tissue-inducer cells,LTi)和ILCregs細(xì)胞組成[1-4]。由于缺少Rag蛋白介導(dǎo)的重排機(jī)制，ILCs細(xì)胞無法表達(dá)多樣性的、抗原特異性的識別受體，因此ILCs屬于固有免疫細(xì)胞。ILCs細(xì)胞亞群在發(fā)育和功能上，與T細(xì)胞亞群一一對應(yīng)。在抵抗病原體和腫瘤的免疫應(yīng)答早期發(fā)揮不可替代的作用。NK細(xì)胞分泌顆粒酶、IFN-γ等，能夠抗病毒、抗腫瘤。ILC1s能夠分泌IFN-γ和TNF-α，應(yīng)答病毒和細(xì)菌感染[5,6]。ILC2s分泌IL-4、IL-5和IL-13,抵抗寄生蟲感染，或促進(jìn)過敏原誘導(dǎo)的Ⅱ型炎癥反應(yīng)[7,8]。ILC3s通過產(chǎn)生IL-17A和IL-22，抵抗胞外菌感染，并修復(fù)受損的腸道上皮[9,10]。LTi細(xì)胞可以產(chǎn)生淋巴毒素β，從而誘導(dǎo)淋巴結(jié)的形成[11]。ILCregs分泌IL-10和TGF-β，負(fù)調(diào)促炎性ILCs亞群，維持組織穩(wěn)態(tài)[12]。與T細(xì)胞不同，ILCs無需預(yù)先致敏，即可迅速反應(yīng)。因而傳統(tǒng)上，我們認(rèn)為ILCs具有固有免疫細(xì)胞的屬性。

免疫記憶是適應(yīng)性免疫細(xì)胞的特征之一。初次致敏誘導(dǎo)抗原特異性T、B細(xì)胞活化，并獲得免疫記憶功能。當(dāng)機(jī)體再次遭遇相同的抗原刺激時，記憶性T、B細(xì)胞表現(xiàn)出更強(qiáng)烈、更迅速的免疫應(yīng)答。2006年，von Andrian研究組發(fā)現(xiàn)，不僅僅是T、B細(xì)胞，NK細(xì)胞也能夠介導(dǎo)抗原特異性接觸性超敏反應(yīng)，這是首次提出“記憶性NK細(xì)胞”的概念[13]。隨后，Lanier和Yokoyama研究組分別在鼠巨細(xì)胞病毒(Murine cytomegalovirus，MCMV)感染模型和細(xì)胞因子誘導(dǎo)模型中獨立地證明了記憶性NK細(xì)胞的存在[14,15]。到目前為止，記憶性NK細(xì)胞已被廣泛報道存在于猴、人等高等動物的病毒感染等多種疾病中[16-19]。有趣的是，最新的研究揭示了ILC1s和ILC2s細(xì)胞同樣也具有免疫記憶功能[20,21]。半抗原致敏的淋巴結(jié)和肝臟IL-7Rα+ILC1s能夠介導(dǎo)長期的過敏性皮炎反應(yīng)[21]；ILC2s則對細(xì)胞因子IL-33等刺激產(chǎn)生免疫記憶，促進(jìn)肺臟過敏性炎癥的進(jìn)程[20]。我們認(rèn)為，這些新的發(fā)現(xiàn)賦予了ILCs適應(yīng)性免疫細(xì)胞的屬性，拓展了ILCs細(xì)胞的研究范疇。本文將討論記憶性ILCs細(xì)胞的研究進(jìn)展，建立記憶性ILCs研究體系，重新認(rèn)識ILCs在疾病進(jìn)程中的作用。

1 記憶性NK細(xì)胞

1.1半抗原誘導(dǎo)記憶性NK細(xì)胞 半抗原誘導(dǎo)的接觸性超敏反應(yīng)是模擬人類接觸性皮炎的經(jīng)典動物模型，通常認(rèn)為是由T細(xì)胞介導(dǎo)的炎性反應(yīng)。然而，von Andrian研究組報道，在T、B細(xì)胞缺陷的Rag2-/-鼠中，CHS(Contact hypersensitivity)反應(yīng)仍能發(fā)生；而在T、B、NK細(xì)胞均缺陷的Rag2-/-γc-/-鼠中，CHS反應(yīng)無法被誘導(dǎo)[13]。這些證據(jù)充分證明了NK細(xì)胞能夠介導(dǎo)T、B細(xì)胞非依賴的抗原特異性免疫記憶反應(yīng)，“記憶性NK細(xì)胞”的概念由此提出[13]。通過過繼轉(zhuǎn)輸實驗發(fā)現(xiàn)，肝臟NK細(xì)胞能夠獲得免疫記憶功能；而脾臟NK細(xì)胞無此功能，說明半抗原誘導(dǎo)的記憶性NK細(xì)胞具有“肝臟限制性”[13]。他們的后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，流感病毒、HSV、HIV免疫過的小鼠中，肝臟NK細(xì)胞能夠保護(hù)小鼠更好地抵抗第二次病毒感染；此外，趨化因子受體CXCR6在記憶性NK細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)維持中發(fā)揮重要作用[22]。記憶性NK細(xì)胞“肝臟限制性”謎題直到2013年才被揭開。我們發(fā)現(xiàn)肝臟NK細(xì)胞是一個異質(zhì)性群體，由CD49a+肝臟駐留NK細(xì)胞(Liver-resident NK cells,LrNK)和CD49b+傳統(tǒng)NK細(xì)胞(conventional NK cells,cNK)組成，LrNK細(xì)胞不參與血液循環(huán)[23-25]。LrNK細(xì)胞高表達(dá)CXCR6，能夠獲得對半抗原的免疫記憶潛能，從而介導(dǎo)接觸性皮炎反應(yīng)[23]。因其組織駐留特性，這群具有免疫記憶功能的NK細(xì)胞僅存在于肝臟中[23]。另有研究報道Ahr-/-鼠中，CD49a+LrNK細(xì)胞顯著減少，來源于Ahr-/-鼠的LrNK細(xì)胞不能將免疫記憶傳遞給受者鼠，揭示了AhR對于LrNK細(xì)胞發(fā)育及免疫記憶功能的重要性[26]。

CD49b+cNK細(xì)胞也被報道能夠介導(dǎo)CHS反應(yīng)。半抗原前體莫諾苯宗(Monobenzone)誘導(dǎo)的CHS反應(yīng)主要由CD49b+cNK細(xì)胞介導(dǎo)[27]。皮膚黑色素細(xì)胞將莫諾苯宗代謝成為半抗原，進(jìn)而以炎性小體依賴的方式激活巨噬細(xì)胞，分泌IL-18，從而活化CD49b+cNK細(xì)胞，并使其獲得對半抗原的免疫記憶功能[27]。記憶性CD49b+cNK細(xì)胞能夠特異性殺傷黑色素細(xì)胞，控制B16.F10黑色素瘤的生長[27]。最近的研究表明，Ly49分子完全缺陷可導(dǎo)致NK細(xì)胞無法介導(dǎo)CHS反應(yīng)；敲入Ly49C/I使Ly49-/-鼠重新獲得對半抗原的免疫記憶，這表明接受過“教育”的NK細(xì)胞具有記憶潛能[28]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Ly49C/I能夠與特定序列肽段相互作用，促進(jìn)NK細(xì)胞介導(dǎo)的記憶反應(yīng)，這表明半抗原可能與Ly49C/I敏感性肽段形成復(fù)合物，進(jìn)而活化NK細(xì)胞[28]。然而，這些發(fā)現(xiàn)意味著抗原特異性是由體內(nèi)Ly49C/I敏感性自身肽段決定的，無法解釋NK細(xì)胞如何區(qū)分不同的半抗原?？乖R別問題依然是肝臟記憶性NK細(xì)胞領(lǐng)域面臨的主要問題。此外，Ly49C/I僅表達(dá)于循環(huán)的CD49b+cNK；而且CD49b+cNK缺少CXCR6的表達(dá)，未知的因子可能參與了記憶性CD49b+cNK的肝臟限制性形成。因此，我們認(rèn)為在半抗原誘導(dǎo)的記憶性NK細(xì)胞體系中，可能存在CD49a+CXCR6+LrNK細(xì)胞和CD49b+Ly49C/I+cNK細(xì)胞分別介導(dǎo)的兩種機(jī)制。

1.2MCMV病毒誘導(dǎo)小鼠記憶性NK細(xì)胞 2009年，Lanier研究組首次在病毒感染模型中證明了記憶性NK細(xì)胞的存在[14]。MCMV病毒感染后0～7 d，NK細(xì)胞活化，開始克隆擴(kuò)增；7～14 d，效應(yīng)性NK細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡，數(shù)量減少；存活的NK細(xì)胞最終進(jìn)入穩(wěn)定的免疫記憶階段，其動力學(xué)過程與CD8+T細(xì)胞類似[14]。

NK細(xì)胞的完全活化需要3個信號：①抗原識別信號Ly49H、Ly49D等；②共刺激信號CD226分子；③Ⅰ型干擾素、IL-12等促炎性信號[29]。NK細(xì)胞表面的活化性受體Ly49H，能夠識別MCMV病毒組分m157蛋白，并激活下游的DAP12接頭分子[14,29]?；罨允荏wLy49D，一方面能夠促進(jìn)Ly49H+NK細(xì)胞獲得免疫記憶[30]；另一方面，也能夠直接識別MHCⅠ類分子H-2Dd，在小鼠骨髓移植模型中應(yīng)答同種異基因的供者細(xì)胞，形成記憶性Ly49D+NK細(xì)胞[31]。Ly49H+NK細(xì)胞表面的共刺激分子CD226能夠結(jié)合DC(Dendritic cell)細(xì)胞表達(dá)的CD155和CD112分子，向下游Fyn和PKCη傳遞信號，活化NK細(xì)胞[32]。促炎性因子Ⅰ型干擾素、IL-12、IL-18、IL-33等均被報道能通過多種機(jī)制促進(jìn)記憶性Ly49H+NK細(xì)胞的形成[33-36]。IL-12刺激可以促進(jìn)轉(zhuǎn)錄因子STAT4和Zbtb32的表達(dá)[35,37]。STAT4結(jié)合Runx1和Runx3基因的啟動子區(qū)，進(jìn)而促進(jìn)二者的表達(dá)；Runx1進(jìn)而調(diào)控Ly49H+NK細(xì)胞的細(xì)胞周期，促進(jìn)其細(xì)胞增殖[38]。Zbtb32則可以通過抑制轉(zhuǎn)錄因子Blimp-1表達(dá)，促進(jìn)Ly49H+NK細(xì)胞的活化[37]。另一個炎性因子IFN-α，能夠促進(jìn)STAT1、STAT2和IRF9的表達(dá)[39]。最近的研究表明，STAT1、STAT2或IRF9缺陷的小鼠中，Ly49H+NK細(xì)胞活化擴(kuò)增以及細(xì)胞存活能力顯著降低，這些結(jié)果揭示了Ⅰ型干擾素對于記憶性Ly49H+NK細(xì)胞形成及維持的重要作用[39]。

在Lanier研究組建立的過繼轉(zhuǎn)輸模型中，MCMV病毒感染的第7天，供者Ly49H+NK細(xì)胞可擴(kuò)增1 000倍，達(dá)到效應(yīng)峰值[14]；隨后，效應(yīng)性Ly49H+NK細(xì)胞以Bim分子依賴的方式進(jìn)入凋亡期[40]。少量效應(yīng)Ly49H+NK細(xì)胞依賴BNIP3和BNIP3L介導(dǎo)的自噬相關(guān)機(jī)制，清除受損的線粒體，降低胞內(nèi)ROS水平，從而抵抗細(xì)胞凋亡[41]。與半抗原誘導(dǎo)的“肝臟限制性”記憶NK細(xì)胞不同，記憶性Ly49H+NK細(xì)胞能夠在脾臟、肝臟等多種淋巴組織和非淋巴組織中長期維持，該過程受到IL-15的調(diào)控[42]。盡管記憶性Ly49H+NK細(xì)胞的形成過程描述的較為詳盡，但效應(yīng)性NK細(xì)胞轉(zhuǎn)化為記憶細(xì)胞的機(jī)制仍然不清楚。最新的研究表明，轉(zhuǎn)化的過程可能受到表觀遺傳的調(diào)控。與初始或效應(yīng)NK細(xì)胞相比，記憶性NK細(xì)胞的ISRE元件基因的染色質(zhì)開放程度更高；而TCF-LEF、NF-κB等通路相關(guān)基因的開放程度較低[43]。NK細(xì)胞記憶開關(guān)的分子調(diào)控機(jī)制仍需進(jìn)一步的研究。

記憶性Ly49H+NK細(xì)胞與CD8+T細(xì)胞有很多共同的特征。它們都經(jīng)歷了克隆擴(kuò)增、細(xì)胞凋亡、免疫記憶等階段，二者免疫應(yīng)答時相是一致的[14]。其活化都需要抗原識別分子、共刺激分子、促炎性分子三條信號，且這些信號均由DC細(xì)胞提供[29]。免疫記憶形成過程中，NK細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞共用部分關(guān)鍵調(diào)控因子，比如Bim促進(jìn)效應(yīng)細(xì)胞凋亡，BNIP3介導(dǎo)的自噬幫助效應(yīng)細(xì)胞抵抗凋亡，以及IL-15維持記憶細(xì)胞存活等。免疫細(xì)胞代謝是近年來活躍的研究領(lǐng)域，記憶性NK細(xì)胞和T細(xì)胞在代謝上也有共同之處。效應(yīng)性T細(xì)胞傾向于使用葡萄糖作為能量，代謝方式以有氧糖酵解為主；而記憶性T細(xì)胞的脂肪酸氧化水平更高，這種代謝方式有利于記憶性細(xì)胞的長期存活[44,45]。代謝同樣能夠調(diào)控NK細(xì)胞的功能和存活能力[46]。與人初始NK細(xì)胞相比，記憶性NKG2C+NK細(xì)胞表現(xiàn)出更高的有氧糖酵解和氧化磷酸化水平[47]。ARID5B介導(dǎo)的代謝重編程對于記憶性NK細(xì)胞的形成和維持起到關(guān)鍵作用[47]。

1.3HCMV病毒誘導(dǎo)人記憶性NK細(xì)胞 除小鼠外，記憶性NK細(xì)胞在病毒感染的猴、人等高等動物中也是存在的。NK細(xì)胞先天缺陷的人極易受到HCMV病毒的威脅，其中NKG2C+NK細(xì)胞亞群是控制HCMV感染的關(guān)鍵因素。有研究表明，器官移植的患者中，潛伏的HCMV病毒出現(xiàn)再活化，選擇性地誘導(dǎo)NKG2C+NK細(xì)胞擴(kuò)增，這些擴(kuò)增的NK細(xì)胞能夠持續(xù)存活一年以上[18]。鑒于上述特性，人NKG2C+NK細(xì)胞被認(rèn)為是記憶樣NK細(xì)胞。此外，在漢坦病毒、HCV等病毒感染的人群中也發(fā)現(xiàn)了這種記憶樣NKG2C+NK細(xì)胞[17,48]。后續(xù)的研究表明，這些患者均存在HCMV的共感染，因此HCMV是驅(qū)動人記憶樣NK細(xì)胞的主要因素[17,48]。有研究應(yīng)用RNA流式細(xì)胞術(shù)在CMV和SIV感染的猴子中也確定了病毒感染誘導(dǎo)的記憶性NKG2C+NK細(xì)胞的存在[49]。

人NKG2C+NK細(xì)胞如何識別HCMV病毒一直是困擾這一領(lǐng)域的難題。最新的研究表明，被HCMV感染的細(xì)胞能夠通過MHCⅠ類分子HLA-E將HCMV病毒組分UL-40蛋白遞呈給NK細(xì)胞表面的NKG2C/CD94復(fù)合物，這就提供了NK細(xì)胞活化所需的抗原識別信號[50]。與小鼠記憶性Ly49H+NK細(xì)胞類似，人NKG2C+NK細(xì)胞的完全活化仍需IL-12等促炎性信號的協(xié)助[51]。人NKG2C+NK細(xì)胞中，F(xiàn)cRγ陰性的亞群表現(xiàn)出對HCMV病毒更強(qiáng)的免疫應(yīng)答，該過程是抗體依賴的[19]。HCMV感染可以活化FcRγ陰性細(xì)胞中的CD3ζ-Zap70信號通路，并且PLZF、HELIOS等基因啟動子區(qū)出現(xiàn)甲基化[19]。此外，人記憶樣NKG2C+NK細(xì)胞IFNG基因表現(xiàn)出持續(xù)的染色質(zhì)開放狀態(tài)，這意味著當(dāng)機(jī)體再次遭遇HCMV感染或HCMV再活化時，人NKG2C+NK細(xì)胞能夠更迅速的產(chǎn)生IFN-γ，以達(dá)到控制病毒的目的[52]。

1.4細(xì)胞因子誘導(dǎo)泛特異性記憶NK細(xì)胞 2009年，Yokoyama研究組首次在沒有特定抗原的條件下誘導(dǎo)出了記憶性NK細(xì)胞[15]。細(xì)胞因子IL-12/15/18聯(lián)合刺激可使小鼠cNK細(xì)胞獲得免疫記憶潛能；當(dāng)再次用IL-12等細(xì)胞因子刺激時，cNK細(xì)胞分泌IFN-γ的能力進(jìn)一步增強(qiáng)，這種類型的免疫記憶被稱為泛特異性記憶NK細(xì)胞[15]。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的記憶性NK細(xì)胞具有長壽命特征，能夠存活至少12周[53]。機(jī)制上，細(xì)胞因子刺激誘導(dǎo)小鼠cNK細(xì)胞Ifng基因呈現(xiàn)持續(xù)的去甲基化狀態(tài)，這種長期的免疫印跡導(dǎo)致cNK細(xì)胞能夠更強(qiáng)烈地響應(yīng)細(xì)胞因子刺激[54]。并且，這種表觀遺傳修飾能夠傳遞給NK細(xì)胞的子細(xì)胞，這意味著記憶性NK細(xì)胞分裂產(chǎn)生的細(xì)胞即使不經(jīng)歷細(xì)胞因子/抗原刺激也能獲得免疫記憶功能[53,54]。此外，人CD56bright和CD56dimNK細(xì)胞均能被細(xì)胞因子IL-12/15/18誘導(dǎo)獲得免疫記憶樣功能[55]。

細(xì)胞因子誘導(dǎo)的記憶性NK細(xì)胞具有以下特性：①強(qiáng)烈的二次應(yīng)答；②長期存活能力；③無需特定抗原?；谏鲜鰞?yōu)勢，多項研究已將細(xì)胞因子誘導(dǎo)的記憶性NK細(xì)胞用于腫瘤免疫治療。對小鼠cNK細(xì)胞用IL-12/15/18預(yù)刺激，并聯(lián)合化療可顯著抑制RMA-S腫瘤細(xì)胞的生長[56]。更重要的是，在一項Ⅰ期臨床實驗中，細(xì)胞因子誘導(dǎo)的人記憶性NK細(xì)胞被應(yīng)用于AML患者治療，結(jié)果顯示44%的患者病情得到完全緩解，這表明記憶性NK細(xì)胞可能是腫瘤免疫治療的新策略[57]。

1.5其他類型記憶性NK細(xì)胞 記憶性NK細(xì)胞在自然界是廣泛存在的。SIV病毒免疫過的恒河猴能夠特異性的殺傷荷載Gag和Env蛋白的DC細(xì)胞，表明猴NK細(xì)胞具有免疫記憶功能[16]。小鼠肝臟CXCR6+NK細(xì)胞能夠?qū)α鞲胁《?、HIV、HSV等產(chǎn)生免疫記憶，保護(hù)機(jī)體抵抗第二次致死性感染[22]。后續(xù)研究表明高表達(dá)CXCR6的肝臟CD49a+LrNK細(xì)胞亞群是應(yīng)答流感病毒感染，并獲得免疫記憶功能的主要細(xì)胞群體[58]。此外，人CD56dimNK細(xì)胞能夠?qū)α鞲胁《井a(chǎn)生記憶，這種記憶性NK細(xì)胞表現(xiàn)出NKp46內(nèi)化的特征[59]。這些研究為基于記憶性NK細(xì)胞的新型疫苗策略的研究和應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。

2 記憶性ILC1s

傳統(tǒng)上，ILC1s被定義為能夠分泌IFN-γ和TNF，且不具備殺傷功能的輔助性ILCs細(xì)胞亞群[1-5]。ILC1s與NK細(xì)胞共同構(gòu)成抵抗病毒感染的第一道固有免疫防線，ILC1s甚至比NK細(xì)胞更早啟動免疫應(yīng)答[6]。然而，最近的一項研究表明ILC1s也能夠介導(dǎo)半抗原誘導(dǎo)的免疫記憶反應(yīng)，這賦予了其適應(yīng)性免疫細(xì)胞的屬性[21]。胸腺和淋巴結(jié)中存在一群特殊的IL-7Rα+NK細(xì)胞，這群細(xì)胞發(fā)育上不依賴骨髓來源的NK前體細(xì)胞[60,61]。自ILCs概念出現(xiàn)后，這群IL-7Rα+NK細(xì)胞已被劃分為ILC1s細(xì)胞[1]。有趣的是，半抗原皮膚致敏可誘導(dǎo)IL-7Rα+ILC1s向引流淋巴結(jié)遷移，該過程依賴趨化因子受體CXCR3[21]。IL-7Rα+ILC1s進(jìn)入淋巴結(jié)后，能夠應(yīng)答半抗原，并分泌大量的IFN-γ和TNF，處于功能活化狀態(tài)[21]。致敏48 h，IL-7Rα+ILC1s免疫應(yīng)答達(dá)到峰值；72 h，IL-7Rα+ILC1s獲得免疫記憶功能，并遷出引流淋巴結(jié)[21]。記憶性ILC1s依賴CXCR6選擇性地長期駐留在肝臟，其穩(wěn)態(tài)維持依賴肝臟中的IL-7分子[21]。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞可以產(chǎn)生CXCL16[62]，而肝實質(zhì)細(xì)胞則能產(chǎn)生IL-7[63,64]，因此肝竇是一個富含CXCL16和IL-7的獨特微環(huán)境，為記憶性IL-7Rα+ILC1s在肝臟中的長期駐留和存活提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。這項研究揭示了淋巴結(jié)-肝臟軸對于記憶性IL-7Rα+ILC1s的形成及長期維持具有重要意義。

接觸性皮炎是生活中常見的過敏性皮膚病，通常認(rèn)為T細(xì)胞在其中起關(guān)鍵作用。然而在小鼠CHS模型中，NK細(xì)胞及IL-7Rα+ILC1s均被證明能夠介導(dǎo)半抗原誘導(dǎo)的皮炎反應(yīng)，這暗示人NK細(xì)胞或ILC1s可能也有類似的作用。一項針對ACD(Allergic contact dermatitis)患者的研究表明，CD56brightNK細(xì)胞在炎性皮膚部位大量聚集，這群NK細(xì)胞高表達(dá)CXCR3，與小鼠記憶性IL-7Rα+ILC1s表型一致[65]。然而，在體外實驗中，來源于ACD患者的NK細(xì)胞無法對過敏原金屬鎳離子二次應(yīng)答，這可能是由于人NK細(xì)胞不能直接識別鎳離子[65]。因此，體內(nèi)模型如人源化小鼠，可能是研究人類記憶性NK細(xì)胞或ILC1s的理想體系。

記憶性ILC1s與T細(xì)胞既有共同特征，也有區(qū)別之處。二者具有類似的遷移模式，記憶性T細(xì)胞遵循淋巴結(jié)-骨髓軸，而記憶性ILC1s則依賴淋巴結(jié)-肝臟軸。IL-7對于記憶性T細(xì)胞和ILC1s的維持都起到至關(guān)重要的作用。IL-15是NK細(xì)胞和ILC1s發(fā)育的核心調(diào)控因子，且記憶性NK細(xì)胞和T細(xì)胞的存活均依賴IL-15，是否記憶性ILC1s也需要IL-15尚不清楚。二者的區(qū)別之處在于免疫應(yīng)答的動力學(xué)和識別機(jī)制，ILC1s在應(yīng)答72 h后即獲得免疫記憶功能，遠(yuǎn)早于T細(xì)胞；T細(xì)胞依賴特定TCR識別抗原，而ILC1s如何識別多種抗原尚不清楚。

3 其他記憶性ILCs亞群

ILC2s被定義為：功能上分泌IL-4、IL-5和IL-13,發(fā)育上依賴轉(zhuǎn)錄因子GATA3和Rorα的ILCs亞群[1-4,7,8]。ILC2s在過敏原、寄生蟲等導(dǎo)致的Ⅱ型免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。最新的研究揭示了ILC2s具有適應(yīng)性免疫應(yīng)答的特征——免疫記憶[20,66]。過敏原致敏可以誘導(dǎo)肺臟ILC2s迅速擴(kuò)增、活化[20]。由于ILC2s無法直接識別過敏原，肺上皮細(xì)胞產(chǎn)生的IL-33是ILC2s激活的關(guān)鍵因素。隨后，ILC2s獲得對IL-33的免疫記憶潛能，IL-33再刺激可誘導(dǎo)記憶性ILC2s的二次應(yīng)答，使其分泌更高水平的IL-5和IL-13，促進(jìn)肺臟炎癥的發(fā)生[20]。此外，記憶性ILC2s能夠更好地促進(jìn)Th2細(xì)胞分化，從而啟動適應(yīng)性免疫應(yīng)答[20]。盡管腸道ILC2s高表達(dá)IL-25R，肺臟初始ILC2s中IL-25R表達(dá)處于較低水平[20]。然而，當(dāng)肺臟ILC2s進(jìn)入免疫記憶狀態(tài)后，IL-25R的表達(dá)顯著上調(diào)[20]。因此，IL-25R可能是肺臟記憶性ILC2s的分子標(biāo)志。此外，IL-33也能誘導(dǎo)淋巴結(jié)ILC2s的活化，是否淋巴結(jié)ILC2s也具有免疫記憶功能尚不清楚[20]?？紤]到淋巴結(jié)-肝臟軸對于記憶性ILC1s的重要意義，可能類似的遷移模式同樣存在于記憶性ILC2s體系中，這值得進(jìn)一步深入的研究。記憶性ILC2s的發(fā)現(xiàn)具有重要價值，它促使我們以適應(yīng)性免疫的角度重新思考ILC2s在哮喘等易復(fù)發(fā)的慢性炎癥中的作用。到目前為止，是否ILCs其他亞群，包括ILC3s、LTi細(xì)胞和ILCregs等具有免疫記憶功能尚不清楚。

4 結(jié)語

近十年來，ILCs發(fā)育和固有免疫功能的研究日趨成熟，已形成包括NK細(xì)胞、ILC1s、ILC2s、ILC3s、LTi細(xì)胞和ILCregs等家族成員構(gòu)成的完整體系。然而，ILCs的適應(yīng)性免疫屬性的研究仍較薄弱?，F(xiàn)已有證據(jù)表明，多種ILCs細(xì)胞能夠?qū)乖蚣?xì)胞因子刺激產(chǎn)生免疫記憶，包括對半抗原、MCMV病毒、細(xì)胞因子IL-12/15/18記憶的NK細(xì)胞，對半抗原記憶的ILC1s，對IL-33記憶的ILC2s。目前是否ILC3s及其他ILCs亞群也具有免疫記憶功能尚不清楚。此外，盡管小鼠中存在記憶性ILC1s和ILC2s，是否人類也具有類似的亞群仍需深入的研究。ILCs細(xì)胞不具有Rag蛋白介導(dǎo)的多樣性受體表達(dá)，它們?nèi)绾巫R別多種半抗原、病毒抗原等仍是這一領(lǐng)域面臨的最大挑戰(zhàn)。記憶性ILCs的發(fā)現(xiàn)，不僅是對ILCs基礎(chǔ)生物學(xué)認(rèn)識的突破，更具有廣泛的應(yīng)用價值。記憶性NK細(xì)胞在預(yù)防免疫及腫瘤免疫治療中已展現(xiàn)巨大的價值，記憶性ILCs的研究進(jìn)展將繼續(xù)推動其在人類疾病治療中的應(yīng)用。