電針對抑郁模型鼠作用機制探討*

丁少杰,魯 海,張春紅

(1.天津中醫(yī)藥大學(xué),天津 300193；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,天津 300193；3.天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院石學(xué)敏國醫(yī)大師傳承工作室,天津 300193)

抑郁癥是臨床中常見的神經(jīng)精神疾病，以患者持續(xù)情緒低落、焦慮、食欲減退、失眠等為主要表現(xiàn)[1]，具有高患病率、高自殺率、高致殘率等特點[2]?，F(xiàn)階段行之有效的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療手段十分有限，藥物治療、電休克療法以及精神療法是目前使用最多的3種[3]。電針(Electroacupuncture,EA)作為傳統(tǒng)針灸和現(xiàn)代技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物，已廣泛應(yīng)用于抑郁癥的臨床治療，安全且療效肯定[4-5]?；谳^好的臨床療效，眾多學(xué)者開展了電針治療抑郁癥的作用機制研究。通過查閱系列文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)當(dāng)前研究方向主要集中在抑制抑郁模型鼠(Depression Model Rats,DMRs)亢進的HPA軸功能、調(diào)節(jié)相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)濃度、改變海馬區(qū)神經(jīng)結(jié)構(gòu)和功能以及激活胞外特定信號通路等4方面。本研究以電針對DMRs上述4條通路相關(guān)指標(biāo)的影響為導(dǎo)向，探討可能的作用機制，以期為今后進一步機制研究和抑郁癥發(fā)病的解釋提供參考。

1 抑制下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸的亢進狀態(tài)

HPA軸作為生物體內(nèi)復(fù)雜的反饋與負(fù)反饋系統(tǒng)，廣泛參與消化、免疫及情緒等方面的調(diào)節(jié)。長期應(yīng)激刺激和抑郁狀態(tài)引起HPA軸相關(guān)神經(jīng)化學(xué)物質(zhì)和分子濃度改變，而包括下丘腦和海馬在內(nèi)的邊緣系統(tǒng)功能紊亂則導(dǎo)致促皮質(zhì)激素釋放因子、脫氫異雄酮以及加壓素分泌增多，轉(zhuǎn)而影響HPA軸的活性[6]。

相關(guān)研究表明，電針刺激DMRs關(guān)元和雙側(cè)足三里穴可明顯降低促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH) mRNA表達(dá)水平、血清促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)和皮質(zhì)醇(CORT)濃度(P<0.01)，一定程度上抑制DMRs功能極度活躍的HPA軸[7]。韓氏等[8]電針刺激DMRs百會、左側(cè)三陰交穴后發(fā)現(xiàn)，電針組大鼠血漿ACTH、CORT含量以及下丘腦室旁核精氨酸加壓素(AVP)陽性神經(jīng)元的數(shù)量較模型組顯著降低(P<0.05或P<0.01)，且接近正常值,表明電針可能通過降低血漿CORT、ACTH含量及下丘腦室旁核AVP陽性神經(jīng)元數(shù)目，對抗HPA軸功能亢進，改善抑郁狀態(tài)。喬氏等[9]發(fā)現(xiàn)電針“百會”“神門”“太沖”穴亦可明顯下調(diào)血清ACTH、CORT濃度(P<0.01)，抑制HPA軸功能亢進。陳氏等[10]則比較電針和埋線兩種不同干預(yù)手段刺激DMRs百會穴的效應(yīng)。治療后電針組大鼠血清ACTH、CORT含量較模型組明顯降低(P<0.01)，埋線治療也顯著降低動物血清ACTH含量(P<0.01)，但對CORT值無明顯影響。王氏等[11]以“解郁方”(百會、神門、太沖)為基本針刺處方，觀察3種不同頻率(2 Hz、30 Hz、100 Hz)電針對DMRs血清CRH的影響。結(jié)果表明，相較于模型組，3組電針刺激均能有效降低血清CRH含量(P<0.05)，尤以2 Hz時效果最佳。

2 調(diào)節(jié)相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)濃度

2.1 降低谷氨酸(Glu)濃度

資料顯示，抑郁癥患者血漿谷氨酸(Glu)水平顯著增高，且谷氨酰胺(Glx)和谷氨酸比值呈下降趨勢[12]，大腦興奮性氨基酸的毒性作用可能是抑郁癥發(fā)病機制之一。盧氏等[13]電針干預(yù)DMRs百會、印堂穴，觀察其對大鼠海馬及皮層區(qū)相關(guān)氨基酸含量的影響。結(jié)果顯示，電針組海馬區(qū)Glu含量較模型組明顯減低(P<0.05)，而皮層區(qū)無顯著差異；且海馬及皮層區(qū)的天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)含量較模型組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。由此進一步提出電針可能通過對抗高濃度谷氨酸神經(jīng)毒性作用發(fā)揮抗抑郁作用的設(shè)想。紀(jì)氏等[14]研究發(fā)現(xiàn)，電針作用百會、印堂穴可上調(diào)海馬區(qū)興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運體電針AT1 mRNA、電針AT2 mRNA表達(dá)水平(P<0.01)。而存在于星形膠質(zhì)細(xì)胞上的氨基酸轉(zhuǎn)運體(EAAT)能夠清除細(xì)胞外近90%氨基酸，其表達(dá)的增加對維持谷氨酸的正常濃度至關(guān)重要。

2.2 上調(diào)部分單胺類神經(jīng)遞質(zhì)濃度

大腦皮質(zhì)區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)具有廣泛的生物活性，對人的情緒、抽象思維以及高級神經(jīng)活動均有一定的調(diào)節(jié)作用。其中以5-羥色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲腎上腺素(NE)及腎上腺素(E)研究較多。邱氏等[15]持續(xù)電針刺激百會、印堂穴4日，檢測獲得性無助DMRs不同腦區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量。結(jié)果顯示，電針增高大鼠下丘腦5-HT含量、降低5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)含量(P<0.05)。同時，DMRs下丘腦和海馬區(qū)NE、E含量出現(xiàn)下降趨勢，電針則對上述指標(biāo)無明顯的改善作用。另外，模型組和印百組大鼠前額葉皮層內(nèi)5-HT含量較正常組均升高，但大鼠抑郁狀態(tài)并未改善。以上結(jié)果提示電針調(diào)整抑郁狀態(tài)的靶點可能在下丘腦5-HT和5-HIAA代謝。覃氏等[16]亦指出，電針“四關(guān)”穴或單獨刺激太沖穴可顯著增加下丘腦NE、DA、5-HT含量，而單用合谷穴則不具此效應(yīng)。李氏等[17]則提出，脈沖電針、電針預(yù)刺激以及百憂解較模型組均能有效上調(diào)5-HT的表達(dá)(P<0.01)；且電針預(yù)處理對五羥色胺轉(zhuǎn)運體(5-HTT)表達(dá)的上調(diào)趨勢無統(tǒng)計學(xué)意義，力度也不及另外兩種干預(yù)措施。

2.3 減少一氧化氮(NO)的毒性作用

相關(guān)研究表明，在應(yīng)激狀態(tài)下，腦組織內(nèi)一氧化氮合酶(NOS)催化產(chǎn)生的神經(jīng)遞質(zhì)一氧化氮(NO)主要表現(xiàn)其神經(jīng)細(xì)胞的毒性作用，導(dǎo)致神經(jīng)元凋亡[18]。田氏等[19]使用分過光度計法檢測接受電針刺激印堂和足三里穴的DMRs血清NO含量，發(fā)現(xiàn)DMRs血清NO含量明顯高于正常組(P<0.05)，而電針組較正常組和模型組均有明顯差異(P<0.05)，顯著降低血清NO濃度。

2.4 降低血清銅濃度并上調(diào)血清鋅的濃度

鋅作為一種多功能微量元素，廣泛分布于海馬、額葉皮質(zhì)、杏仁核以及嗅球。其可通過抑制N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體活性發(fā)揮抗抑郁作用[20]。而銅沉積則會減少丘腦-下丘腦、中腦-腦橋突觸前5-HT轉(zhuǎn)運蛋白含量[21]，進而降低5-HT濃度。ZHOU等[22]電針刺激大鼠百會、印堂、豐隆及太沖穴，以馬普替林灌胃給藥作為對照。3周后檢測血清銅、鋅、鈣和鎂等元素濃度。結(jié)果顯示，DMRs較正常組血清銅水平明顯增加，鋅元素水平明顯減低(P<0.05)；另外，電針和馬普替林均能明顯降低血清銅含量，同時增加鋅含量(P<0.05)，而對鈣鎂元素?zé)o明顯調(diào)節(jié)作用。Cieslik等[23]研究結(jié)果也支持這一結(jié)論。

3 修復(fù)海馬區(qū)神經(jīng)結(jié)構(gòu)和功能

Liu等[24]研究發(fā)現(xiàn)，連續(xù)3周電針刺激DMRs百會和單側(cè)安眠穴能夠反轉(zhuǎn)海馬區(qū)星形標(biāo)記神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白水平的降低趨勢(P<0.05)。She等[25]則進行了電針抗抑郁作用與海馬區(qū)神經(jīng)突觸改變的相關(guān)性研究。結(jié)果顯示，空白對照組和假電針組大鼠海馬區(qū)GluN2B蛋白表達(dá)顯著降低，電針可恢復(fù)其表達(dá)至正常水平。且各組大鼠間GluN1、GluN2A、GluR1、GluR2蛋白表達(dá)無差異。Borgdorf等[26]亦指出，GluN2B亞基對于CA1區(qū)LTP功能及學(xué)習(xí)和記憶能力的提升至關(guān)重要。簡言之，電針通過增強GluN2B蛋白表達(dá)發(fā)揮保護LTP和改善抑郁行為的作用。姜氏等[27]發(fā)現(xiàn)，經(jīng)慢性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)造模的大鼠海馬區(qū)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)以細(xì)胞核固縮為主，伴隨部分腦區(qū)錐體細(xì)胞變性、數(shù)目減少等不同程度的損傷，電針?biāo)年P(guān)穴可較好地修復(fù)DMRs CA3區(qū)和DG區(qū)受損的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，但對CA1區(qū)細(xì)胞作用不明顯。佘氏等[28]同樣發(fā)現(xiàn)，模型組和假針組大鼠海馬區(qū)出現(xiàn)突觸結(jié)構(gòu)不清晰、線粒體脊破壞以及胞漿含有大量空泡等病理改變，而持續(xù)21日的電針百會、印堂穴可對此產(chǎn)生一定的修復(fù)作用。朱氏等[29]研究發(fā)現(xiàn)，電針百會、三陰交穴能夠提高海馬區(qū)生長抑素(SS)和其前體mRNA表達(dá)(P<0.05)、增強神經(jīng)營養(yǎng)、增加神經(jīng)元數(shù)目、促進神經(jīng)功能恢復(fù)以發(fā)揮抗抑郁作用。

4 維持胞外特定信號通路

相關(guān)研究表明，胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)激活大腦特定區(qū)域內(nèi)2型B淋巴細(xì)胞(Bcl-2)發(fā)揮抗凋亡作用；并且ERK激活的生長調(diào)節(jié)蛋白43(GAP-43)也與精神障礙和長期抑郁狀態(tài)有關(guān)[30-31]。Li等[32]研究發(fā)現(xiàn)電針百會、印堂穴可增加大鼠Bcl-2和GAP-43表達(dá)(P<0.05)，并認(rèn)為這一上調(diào)作用是通過增強ERK磷酸化實現(xiàn)的。梁氏等[33]研究結(jié)果也驗證了這一點。韓氏等[34]發(fā)現(xiàn)電針可同時增加DMRs海馬區(qū)NOS和環(huán)磷酸鳥苷cGMP含量(P<0.01)，保證NO-cGMP第二信使轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的正常運轉(zhuǎn)，維持神經(jīng)遞質(zhì)DA的含量，發(fā)揮抗抑郁作用。

5 小結(jié)

抑郁癥作為臨床多發(fā)的神經(jīng)精神疾病，其有效的治療方案一直以來都是患者及醫(yī)務(wù)工作者關(guān)注的重點?？挂钟羲庪m能迅速并有效地改善癥狀，但多數(shù)僅從單一途徑發(fā)揮作用,且副作用明顯[35]；而現(xiàn)代針灸的運用為抑郁癥的治療提供了新的思路，并開展了眾多相關(guān)機制的研究。

綜上所述，電針主要通過以下4方面，多途徑、多層次、多靶點發(fā)揮抗抑郁作用:①不同程度的降低組織或血清中CRH、ACTH及CORT含量，抑制HPA軸功能亢進。②調(diào)節(jié)部分神經(jīng)遞質(zhì)濃度：降低Glu和NO的濃度，減少其毒性作用；上調(diào)下丘腦5-HT表達(dá)；升高血清鋅而降低血清銅濃度，抑制NMDA受體活性，防止5-HT轉(zhuǎn)運體蛋白的減少。③修復(fù)海馬區(qū)受損的神經(jīng)細(xì)胞，增加神經(jīng)元數(shù)量，恢復(fù)其功能。④增強ERK磷酸化，激活Bcl-2和GAP-43，減少細(xì)胞凋亡，改善抑郁狀態(tài)；保證NO-cGMP通路正常運轉(zhuǎn)，維持DA含量。

盡管當(dāng)前研究初步揭示了抑郁癥的發(fā)病機制及電針改善抑郁行為的作用機制，但仍需要進一步研究。①目前已有研究發(fā)現(xiàn)，微生物-腸-腦軸與人類行為和情緒存在實質(zhì)性關(guān)聯(lián)，腸道微生物是調(diào)節(jié)飲食和抑郁情緒的關(guān)鍵性因素[36]；同樣，壓力應(yīng)激影響腸道菌群的組成，改變的腸道微生物反之可調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)組織相關(guān)可塑性、5-HT能和氨基丁酸能信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，進而產(chǎn)生焦慮或抑郁樣行為[37]。以上信息提示，抑郁癥的發(fā)病機制仍需深入探討。②針對同一指標(biāo)各研究選用的穴位不盡相同，是否存在改善同一指標(biāo)的最優(yōu)單穴或組穴仍待研究。