桂林西瓜霜的快速檢驗(yàn)方法

廣西桂林食品藥品檢驗(yàn)所（541002）蔣玲 謝黔鋒 饒偉文

桂林西瓜霜由西瓜霜、青黛、大黃、黃連、黃柏、山豆根等14味藥組成，具有清熱解毒、消腫止痛的功效。臨床上用于風(fēng)熱上攻，肺胃熱盛所致的乳蛾、喉痹、口糜、急慢性咽喉炎，口腔潰瘍等癥[1]。收載于《中國(guó)藥典》2005年版一部，其青黛、大黃、黃連、黃柏的TLC鑒別方法操作步驟較多，檢驗(yàn)周期長(zhǎng)。為了配合藥品抽樣車(chē)在藥品抽樣現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行快速檢驗(yàn)，提高抽樣命中率，本研究對(duì)桂林西瓜霜的快速檢驗(yàn)方法進(jìn)行了研究，效果較滿(mǎn)意?，F(xiàn)報(bào)告如下：

1 儀器與試藥

BUT2030-40-06超聲波清洗器，必能信超聲（上海）有限公司；ZF-I型三用紫外分析儀，上海顧村電光儀器廠(chǎng)。

桂林西瓜霜，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供，批號(hào)分別為060236、060305、060307。缺青黛的陰性樣品、缺大黃的陰性樣品、缺黃連和黃柏的陰性樣品，桂林三金藥業(yè)有限公司提供。大黃對(duì)照藥材，中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)120984-200301；靛玉紅對(duì)照品，中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)0717-200303；鹽酸小檗堿對(duì)照品，中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110713-200608；硅膠GF254薄層板，藥品快檢專(zhuān)用TLC板，天津思利達(dá)色譜技術(shù)開(kāi)發(fā)公司；硅膠GF254：青島海洋化工廠(chǎng)。所用試劑均為分析純。

附圖1 青黛和大黃的薄層色譜圖

2 方法與結(jié)果

2.1 青黛、大黃的薄層色譜鑒別 取樣品2.5 g，加鹽酸4 m L 濕潤(rùn)，再加二氯甲烷10mL，振搖或超聲提取2min，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取大黃對(duì)照藥材0.2g，同法制成對(duì)照藥材溶液。取靛玉紅對(duì)照品，加二氯甲烷制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。吸取上述3種溶液各3μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚（60～90℃）－環(huán)己烷－乙酸乙酯－甲酸（1:1:1:0.1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，分別置可見(jiàn)光及紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與靛玉紅對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，可見(jiàn)光下顯相同的紫紅色斑點(diǎn)；在與大黃對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，紫外光燈（365nm）下顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)。而同法操作，陰性對(duì)照溶液均無(wú)對(duì)應(yīng)的特征斑點(diǎn)。見(jiàn)附圖1。

2.2 黃連、黃柏的薄層色譜鑒別 取2.1項(xiàng)下的供試品溶液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液，吸取上述2種溶液各2μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以乙酸乙酯－無(wú)水乙醇－甲酸（7:1:2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，并在其下方另顯1～2個(gè)黃色熒光斑點(diǎn)，而同法操作，陰性對(duì)照溶液均無(wú)對(duì)應(yīng)的特征斑點(diǎn)。結(jié)果見(jiàn)附圖2。

附圖2 黃連、黃柏的薄層色譜圖

3 討論

3.1 桂林西瓜霜為中藥保護(hù)品種，陰性樣品由桂林三金藥業(yè)有限公司制備。為了盡量減少對(duì)照藥材的使用，便于快檢，故選擇鹽酸小檗堿對(duì)照品作對(duì)照，采取在其下方另顯1～2個(gè)斑點(diǎn)作為結(jié)果判斷依據(jù)。大黃中蒽醌類(lèi)成分多以結(jié)合型蒽醌的形式存在，與糖通過(guò)苷鍵結(jié)合，遇酸可水解成游離型的蒽醌，后者可溶于親脂性的有機(jī)溶劑。靛玉紅在親脂、親水性的有機(jī)溶劑中都有較好的溶解性。小檗堿與鹽酸成鹽后易溶于沸水，在三氯甲烷和二氯甲烷中也能溶解。本文用鹽酸酸化使結(jié)合型蒽醌水解，同時(shí)使小檗堿成鹽，然后用二氯甲烷提取。提取溶劑比較了酸性乙醇、不同濃度鹽酸加三氯甲烷或二氯甲烷等溶劑，發(fā)現(xiàn)鹽酸加三氯甲烷或二氯甲烷的提取效果較好，故選擇毒性相對(duì)較小的鹽酸加二氯甲烷。由于鹽酸用量少，免去了分液這一步驟，直接濾過(guò)，濾液作為青黛、大黃、黃連、黃柏的共用供試液。

3.2 青黛、大黃的鑒別，比較了①石油醚（60～90℃）－環(huán)己烷－乙酸乙酯－甲酸（1:1:1:0.1）、②石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15:5:1）的上層溶液、③三氯甲烷－乙酸乙酯－甲酸（18:1:0.5）、④環(huán)己烷－乙酸乙酯（2:1），結(jié)果①和②均能使待測(cè)組分有效分離，斑點(diǎn)清晰，故選擇配制較簡(jiǎn)便的①作為展開(kāi)劑。

3.3 黃連、黃柏的鑒別，展開(kāi)劑比較了①乙酸乙酯－無(wú)水乙醇－甲酸（7:1:2）、②乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水（5:3:1:1）、③乙酸乙酯－無(wú)水乙醇－濃氨溶液（6:3:1.5）、④乙酸乙酯－無(wú)水乙醇－濃氨溶液（35:5:1），結(jié)果以①為好?！吨袊?guó)藥典》方法的展開(kāi)劑中有苯，毒性大，不采用。

3.4 用本方法檢驗(yàn)了同一生產(chǎn)企業(yè)的3批樣品，結(jié)果均符合規(guī)定。同時(shí)取樣按《中國(guó)藥典》2005年版一部桂林西瓜霜項(xiàng)下的方法檢驗(yàn)，結(jié)論與本方法相同。

3.5 本方法曾在不同溫度、濕度下試驗(yàn)，重現(xiàn)性較好；用自制的硅膠GF254薄層板試驗(yàn)，斑點(diǎn)也能有效分離。經(jīng)對(duì)比，按《中國(guó)藥典》方法檢驗(yàn)，耗時(shí)約5h，而本方法只需1h，且用乙酸乙酯等毒性小的溶劑替換了藥典方法中苯、甲醇等毒性大的溶劑，達(dá)到了快檢“簡(jiǎn)便、快捷、環(huán)保、統(tǒng)一”的要求，適用于藥品抽樣時(shí)的快速檢驗(yàn)，在基層藥品經(jīng)營(yíng)、使用單位亦適用。