桃品種資源抗根癌病評價

郝峰鴿，王新衛(wèi),曹 珂，方偉超， 陳昌文，朱更瑞，王力榮

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 鄭州果樹研究所，鄭州 450009；2.河南科技學(xué)院，河南新鄉(xiāng) 453003)

桃根癌病又稱冠癭病，是由根癌土壤桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)引起的細菌性病害，該病原菌通過傷口進入，將自身的T-DNA 整合到寄主的核基因組上，表達后產(chǎn)生大量的生長素和細胞分裂素刺激細胞過度增殖，在植株根部、根頸部、莖甚至枝條上形成大小不一的癭瘤[1-4]。桃幼苗受害后葉片黃化，植株矮化；成齡樹感染此病后樹勢變?nèi)?、果實小、產(chǎn)量低、甚至死亡，經(jīng)濟損失嚴重[4-5]。近年來，隨著中國桃栽培面積的擴大和新品種的大量引進，再加上苗木生產(chǎn)和調(diào)運中缺乏檢疫措施，更加劇了該病害的傳播蔓延[6]。根癌土壤桿菌特異的侵染方式，使得傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)、物理及化學(xué)防治均無良好效果。利用生防菌K84和K1026的拮抗作用防治桃根癌病取得了一定的成效，但其應(yīng)用也受到很大限制[6-7]。

選育抗病砧木和品種是防治根癌病的重要途徑之一。前人以‘筑波4號’和‘筑波5號’[8]、毛桃[9]、陜甘山桃[10]、新疆桃[11]、蒙古扁桃[12]、長柄扁桃[13]、 野生櫻桃李[14-15]、大葉草櫻[16]等種子的實生苗為材料，對其抗根癌病能力進行初步鑒定，在各個不同種中均發(fā)現(xiàn)一定比例的免疫或高抗植株。筆者對38份桃及其近緣種野生資源972個單株的抗根癌病能力進行評價，篩選出伏牛山望10、蒙古扁桃、四道嶺野生李、壽粉等4份高抗根癌病種質(zhì)，但沒有發(fā)現(xiàn)免疫個體[17]。

中國桃品種資源豐富，不同資源可能在攜帶有抗根癌病基因的同時，還具有其他優(yōu)良性狀，因而，桃抗性資源在育種尤其是生產(chǎn)上應(yīng)用價值更高。本試驗以不同地理來源的桃栽培品種為材料，采用強致病力菌株接種評價，以期篩選出抗性種質(zhì)，為桃抗根癌病砧木和品種的選育提供抗性材料。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 植物材料 試驗于2014-2015 年進行。所用植物材料共179 份(表1)，以中國地方品種為主，還包括部分育成品種及國外品種。毛桃為砧木，每份材料4 株。試驗用苗定植時檢查均無根瘤癥狀，常規(guī)大田管理，待新梢長至30 cm時，摘心促發(fā)側(cè)枝。

1.1.2 病原菌 本試驗所用菌株AT4-3是從19 株野生型致病根癌土壤桿菌(為中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所李世訪研究員饋贈)中篩選出的致病性最強的一株。

1.2 方 法

1.2.1 病原菌的培養(yǎng) 將菌株AT4-3(生物Ⅱ型)接種于YEB液體培養(yǎng)基中，28 ℃下，200 r·min-1搖床培養(yǎng)約16 h。培養(yǎng)好的菌液在5 000 r·min-1條件下離心10 min，用滅菌蒸餾水重懸，并調(diào)整濃度為109cfu·mL-1。

1.2.2 病原菌接種 接種參照Bliss等[7]的方法。選生長較直立、健壯的新梢，從距枝條頂端10 cm的位置，用解剖刀劃1 cm長的傷口，深及木質(zhì)部，在傷口處涂抹1滴菌液(約20 μL)，然后用封口膜包裹保濕，每植株接種2 個枝條，每個枝條接種3 個位點，位點間間隔約5 cm，同時接種無菌水為對照。

1.2.3 抗病性調(diào)查與評價 接種后60 d，用游標(biāo)卡尺測量癭瘤最大直徑，并根據(jù)平均瘤直徑的大小，將每份材料對根癌病的抗性分為5 個等級。免疫(R0)：不發(fā)病，與對照無差異；高度抗病(HR)：瘤徑0.01～4.00 mm；中度抗病(MR)：瘤徑4.01～8.00 mm；中度感病(MS)：瘤徑8.01～12.00 mm；高度感病(HS)：瘤徑>12.01 mm。

待調(diào)查結(jié)束后，從基部剪掉接種枝條并銷毀。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同桃品種資源的抗性評價

2014和2015 年對179 份材料進行抗根癌病鑒定，不同品種的瘤直徑平均值分別為3.44～25.48 mm和5.89～31.40 mm，未發(fā)現(xiàn)免疫品種。2 a鑒定中抗性表現(xiàn)較好且穩(wěn)定的品種有‘二接白’‘肉蟠桃’‘緋桃’‘紅桃’‘砂子早生’‘南山甜桃’‘深州離核水蜜’‘張黃9號’‘鴛鴦垂枝’‘臨白10號’等(表1)。

表1 供試品種資源的抗根癌病鑒定結(jié)果Table 1 Response of peach cultivars to A.tumefaciens

(續(xù)表1ContinuedTable1)

品種名稱Cultivar地理來源Geographic origin瘤大小/mm Tumor diameter20142015抗性水平Resistance20142015大金旦 Dajindan云南 Yunnan17.34±6.2324.78±3.68HSHS大久保 Okubo日本 Japan21.77±4.8719.15±3.86HSHS大離核黃肉 Dalihehuangrou新疆 Xinjiang25.10±8.1231.40±6.28HSHS大雪桃 Daxuetao河北 Hebei15.86±6.4819.38±4.13HSHS大趙黃桃 Dazhaohuangtao河南 Henan21.95±6.4523.44±4.06HSHS單瓣紫桃 Danbanzitao華北 Northern China13.68±7.8217.49±5.80HSHS吊枝白 Diaozhibai安徽 Anhui12.27±7.5322.64±4.73HSHS敦煌冬桃 Dunhuangdongtao甘肅 Gansu18.01±7.2120.20±5.14HSHS二接白 Erjiebai河南 Henan3.44±8.565.89±2.10HRMR二早桃 Erzaotao云南 Yunnan18.78±5.7623.40±4.65HSHS緋桃 Feitao華北 Northern China4.01±7.8710.64±3.02MRMS肥城白里10號 Feichengbaili 10山東 Shandong14.94±8.12-HS-肥城白里17號 Feichengbaili 17山東 Shandong8.36±6.2316.14±4.21MSHS肥城紅里6號 Feichenghongli 6山東 Shandong13.44±8.14-HS-粉壽星 Fenshouxing江蘇 Jiangsu8.56±5.048.95±3.45MSMS奉化蟠桃 Fenghuapantao浙江 Zhejiang10.24±11.2316.69±4.17MSHS佛羅里達王 Flordaking美國 America19.84±6.1818.54±2.87HSHS佛羅里達冠 Flordacrest美國 America16.77±6.1418.04±3.54HSHS佛羅里達金 Flordagold美國 America21.66±6.2218.53±3.12HSHS高臺1號 Gaotai 1甘肅 Gansu22.07±5.1826.69±4.85HSHS割谷 Gegu河北 Hebei16.47±6.0819.79±5.13HSHS光肅肉桃 Guangsuroutao不詳 Unknown17.67±6.6121.71±4.17HSHS光義白花桃 Guangyibaihuatao貴州 Guizhou16.82±6.5417.32±3.39HSHS貴州水蜜 Guizhoushuimi貴州 Guizhou4.76±8.7314.09±4.22MRHS和田黃肉 Hetianhuangrou新疆 Xinjiang11.76±8.0514.29±4.62MSHS黑布袋 Heibudai河南 Henan18.92±4.2522.50±3.89HSHS紅垂枝 Hongchuizhi華北 Northern China17.91±6.4317.56±4.57HSHS紅花碧桃 Honghuabitao華北 Northern China17.98±8.1217.55±3.68HSHS紅李光 Hongliguang新疆 Xinjiang9.77±5.8916.07±5.14MSHS紅桃 Hongtao江蘇 Jiangsu4.15±10.2510.23±3.24MRMS紅鴨嘴Hongyazui河北 Hebei9.76±13.1812.85±3.16MSHS紅葉桃 Hongyetao華北 Northern China18.52±6.7817.15±4.15HSHS華光 Huaguang河南 Henan15.99±6.23-HS-黃臘桃 Huanglatao廣西 Guangxi20.61±6.3224.41±5.12HSHS黃李光 Huangliguang新疆 Xinjiang14.76±7.3712.75±6.83HSHS黃艷 Huangyan云南 Yunnan12.60±7.4816.54±3.10HSHS黃粘胡 Huangnianhu云南 Yunnan20.65±4.2111.40±3.24HSMS琿春桃 Hunchuntao吉林 Jilin22.02±4.8929.00±5.18HSHS火煉金丹 Huolianjindan云南 Yunnan14.66±5.3216.14±3.85HSHS雞嘴白 Jizuibai河南 Henan16.79±7.3112.11±3.57HSHS吉林8501 Jilin 8501吉林 Jilin18.12±6.4519.00±3.24HSHS吉林8601 Jilin 8601吉林 Jilin17.10±7.45-HS-吉林8701 Jilin 8701吉林 Jilin23.58±4.8718.3±4.05HSHS吉林8801 Jilin 8801吉林 Jilin23.35±4.1222.20±3.67HSHS吉林8903 Jili 8903吉林 Jilin12.70±10.15-HS-嘉慶蟠桃 Jiaqingpantao浙江 Zhejiang14.93±6.3217.03±3.45HSHS絳桃 Jiangtao華北 Northern China10.99±6.7515.24±4.82MSHS金鳳 Jinfeng河南 Henan20.80±5.5724.71±3.76HSHS金童5號 Babygold 5美國 America15.00±6.1219.84±4.81HSHS金童6號 Babygold 6美國 America11.24±7.55-MS-金童7號 Babygold 7美國 America9.24±4.1413.37±2.56MSHS金童8號 Babygold 8美國 America12.16±7.2514.18±2.64HSHS金童9號 Babygold 9美國 America6.47±8.9516.81±3.15MRHS

(續(xù)表1ContinuedTable1)

品種名稱Cultivar地理來源Geographic origin瘤大小/mm Tumor diameter20142015抗性水平Resistance20142015京玉 Jingyu北京 Beijing18.44±6.4728.38±5.84HSHS久仰青桃 Jiuyangqingtao貴州 Guizhou18.13±7.5520.63±2.89HSHS喀什1號 Kashi 1新疆 Xinjiang23.34±7.3524.32±4.51HSHS喀什2號 Kashi 2新疆 Xinjiang9.90±5.9511.19±3.28MSMS喀什3號 Kashi 3新疆 Xinjiang17.16±5.2424.55±6.55HSHS喀什4號 Kashi 4新疆 Xinjiang13.07±7.8621.13±5.22HSHS喀什黃肉李光 Kashihuangrouliguang新疆 Xinjiang25.48±6.9824.99±6.28HSHS卡拉 Maria Carla意大利 Italia10.44±5.6920.37±4.01MSHS離核蟠桃 Lihepantao浙江 Zhejiang14.48±7.1113.66±3.48HSHS離核甜仁 Lihetianren新疆Xinjiang12.91±7.1813.96±3.57HSHS臨白10號 Linbai 10甘肅 Gansu7.82±6.0811.57±3.89MRMS臨城桃 Linchengtao山東 Shandong9.97±7.01-MS-六月白 Liuyuebai河北 Hebei10.19±6.2810.96±4.10MSMS龍1-2-4 Long 1-2-4甘肅 Gansu9.45±5.5313.55±3.95MSHS龍華水蜜 Longhuashuimi上海 Shanghai6.47±11.0312.50±2.64MRHS陸林水蜜 Lulinshuimi江蘇 Jiangsu17.03±6.3320.65±3.55HSHS瑪麗維拉 Maravilha美國 America13.10±6.0117.43±3.88HSHS芒夏露 Mangxialu江蘇 Jiangsu22.05±6.7224.34±5.21HSHS毛桃變油桃 Maotaobianyoutao河南 Henan8.30±5.8717.35±3.52MSHS玫瑰紅 Meiguihong河南 Henan6.49±10.1216.54±4.28MRHS米揚山 Miyangshan新疆 Xinjiang20.14±6.0822.95±4.25HSHS墨玉8號 Moyu 8新疆 Xinjiang17.85±5.4820.30±3.89HSHS南方紅花早 Nanfanghonghuazao不詳 Unknown9.59±6.5421.14±5.26MSHS南方早紅 Nanfangzaohong河南 Henan16.58±8.9518.17±3.56HSHS南山甜桃 Nanshantiantao廣東 Guangdong5.49±8.6311.09±2.08MRMS平稗子 Pingbaizi江蘇 Jiangsu18.51±5.74-HS-齊桃 Qitao甘肅 Gansu14.20±7.5621.29±5.14HSHS秦嶺冬桃 Qinlingdongtao陜西 Shaanxi11.65±4.7716.31±4.10MSHS青桃 Qingtao貴州 Guizhou14.85±5.3917.57±4.15HSHS青州白皮蜜桃 Qingzhoubaipimitao山東 Shandong17.87±4.4325.84±5.64HSHS青州紅皮蜜桃 Qingzhouhongpimitao山東 Shandong13.18±9.17-HS-秋白桃 Qiubaitao云南 Yunnan13.72±10.1518.91±3.77HSHS秋香蜜 Qiuxiangmi江蘇 Jiangsu11.80±5.6112.70±3.16MSHS人面桃 Renmiantao華北 Northern China11.99±5.2515.04±4.20MSHS肉蟠桃 Roupantao甘肅 Gansu5.74±7.847.56±2.18MRMR沙紅桃 Shahongtao陜西 Shaanxi20.08±5.4723.02±5.16HSHS砂子早生 SunagoWase日本 Japan4.09±12.1011.37±3.22MRMS山東四月半 Shandongsiyueban山東 Shandong12.69±5.6512.72±3.06HSHS上海水蜜 Chinese Cling上海 Shanghai14.29±7.5618.98±4.02HSHS深州白蜜 Shenzhoubaimi河北 Hebei18.02±6.3416.25±3.65HSHS深州離核水蜜 Shenzhouliheshuimi河北 Hebei6.60±8.9510.29±2.98MRMS深州水蜜 Shenzhoushuimi河北 Hebei15.18±7.3219.63±4.21HSHS石頭桃 Shitoutao河南 Henan11.44±6.0913.96±3.62MSHS石窩水蜜 Shiwoshuimi北京 Beijing12.84±6.7820.31±4.08HSHS壽粉 Shoufen北京 Beijing10.64±6.178.64±2.50MSMS曙光 Shuguang河南 Henan9.83±6.1823.89±4.01MSHS雙喜紅 Shuangxihong河南 Henan10.28±5.07-MS-斯蜜 Nectaross意大利 Italia20.68±6.2528.97±5.34HSHS松森 Matsumori日本 Japan16.77±8.1215.42±4.05HSHS酸桃 Suantao山東 Shandong16.72±7.1224.02±4.62HSHS天津水蜜 Tianjinshuimi天津 Tianjin18.78±5.3419.92±4.20HSHS鐵4-1 Tie 4-1新疆 Xinjiang21.55±7.2123.79±4.82HSHS徒溝1號 Tugou 1甘肅 Gansu12.26±8.9524.87±5.37HSHS

(續(xù)表1ContinuedTable1)

品種名稱Cultivar地理來源Geographic origin瘤大小/mm Tumor diameter20142015抗性水平Resistance20142015吐-2 Tu-2新疆 Xinjiang7.28±5.7513.75±3.64MRHS萬州香桃 Wanzhouxiangtao不詳 Unknown11.41±6.33-MS-望漠小米桃 Wangmoxiaomitao不詳 Unknown18.27±5.35-HS-烏黑雞肉桃 Wuheijiroutao山東 Shandong16.14±8.9416.51±3.42HSHS五寶桃 Wubaotao華北 Northern China11.09±8.189.11±2.58MSMS五月火 May Fire美國 America13.78±4.4617.85±4.05HSHS五月鮮 Wuyuexian北京 Beijing13.63±5.2114.87±3.17HSHS五月鮮扁干 Wuyuexianbiangan北京 Beijing15.56±5.3822.25±5.08HSHS西教2號 Xijiao 2陜西 Shaanxi19.27±7.1620.11±5.62HSHS西教3號 Xijiao 3陜西 Shaanxi10.12±5.2013.25±4.20MSHS下廟1號 Xiamiao 1陜西 Shaanxi16.13±6.1816.20±4.33HSHS仙桃 Xiantao廣西 Guangxi20.66±4.2821.72±3.22HSHS香蕉桃 Xiangjiaotao遼寧 Liaoning20.63±5.1326.37±3.66HSHS小白桃 Xiaobaitao河南 Henan12.32±9.1427.06±4.21HSHS小紅花 Xiaohonghua江蘇 Jiangsu16.85±6.1219.80±4.03HSHS小金旦 Xiaojindan不詳 Unknown16.62±6.1225.76±5.18HSHS新疆黃肉 Xinjianghuangrou新疆 Xinjiang14.63±7.5623.83±3.68HSHS新疆蟠桃 Xinjiangpantao新疆 Xinjiang22.03±4.1226.92±3.74HSHS新疆蟠桃無花粉 Xinjiangpantaowuhuafen新疆 Xinjiang8.36±6.1512.26±3.16MSHS興津油桃 Okitsu日本 Japan19.54±4.3119.88±3.84HSHS燕紅 Yanhong北京 Beijing18.39±5.4520.43±5.10HSHS陽泉肉桃 Yangquanroutao山西 Shanxi12.26±7.5613.94±3.06HSHS葉縣冬桃 Yexiandongtao河南 Henan6.23±9.7813.06±2.90MRHS葉縣黃肉桃 Yexianhuangroutao新疆 Xinjiang19.48±7.0520.05±4.83HSHS鶯歌桃 Yinggetao不詳 Unknown21.01±6.5524.15±4.52HSHS鷹嘴 Yingzui安徽 Anhui21.02±5.3423.22±5.14HSHS迎春 Yingchun河南 Henan8.13±6.0122.26±3.52MSHS油蟠桃 Youpantao甘肅 Gansu15.49±5.3415.39±4.68HSHS玉露蟠桃 Yulupantao浙江 Zhejiang14.96±5.1225.32±6.22HSHS豫白 Yubai河南 Henan11.14±6.5615.23±3.26MSHS鴛鴦垂枝 Yuanyangchuizhi華北 Northern China7.95±5.4610.86±2.37MRMS園春白 Yuanchunbai河北 Hebei12.48±6.2424.22±5.18HSHS早白鳳 Zaobaifeng上海 Shanghai15.10±8.3421.50±3.18HSHS早春桃 Zaochuntao不詳 Unknown16.12±7.8420.41±3.87HSHS早鳳王 Zaofengwang不詳 Unknown11.14±5.75-MS-早紅2號 Early Red 2美國 America14.65±8.09-HS-早上海水蜜 Zaoshanghaishuimi上海 Shanghai8.73±5.839.49±3.02MSMS早熟黃甘 Zaoshuhuanggan甘肅 Gansu17.90±5.38-HS-張白5號 Zhangbai 5甘肅 Gansu7.97±5.2315.21±5.23MRHS張白甘 Zhangbaigan甘肅 Gansu11.18±7.1512.57±4.18MSHS張黃9號 Zhanghuang 9甘肅 Gansu7.14±5.0111.06±3.27MRMS長嶺早玉露 Changlingzaoyulu浙江 Zhejiang20.61±5.0223.36±4.16HSHS長生蟠桃 Changshengpantao浙江 Zhejiang11.91±6.0117.10±3.58MSHS中華壽桃 Zhonghuashoutao山東 Shandong16.23±7.1924.71±3.46HSHS朱粉垂枝 Zhufenchuizhi華北 Northern China13.49±8.5420.66±4.08HSHS

注：“-”表示因植株生長弱或死亡而沒接種，無數(shù)據(jù)；上表的品種地理來源及表3的生態(tài)群劃分均參照文獻[18]。

Note: “-”No data because the poor growth vigor or dead plants were not inoculated; Geographic origin of every cultivar and their ecological variety group in table 3 were confirmed according to reference [18].

2.2 不同桃品種資源的抗性分布

由表2可看出，在2014 年的抗性鑒定中，抗病材料21 份，其中高度抗病材料1 份；感病材料158 份，其中高度感病材料120 份；抗病材料和感病材料分別占供試材料總數(shù)的11.7%和88.3%，而高度抗病和高度感病材料分別占供試材料總數(shù)的0.6%和67.0%。在2015 年的抗性鑒定中，中度抗病材料2 份，占供試材料總數(shù)的1.2%；中度感病材料16 份，占供試材料總數(shù)的9.8%；高度感病材料146 份，占供試材料總數(shù)的 89.0%。從總體上看，2015 年的發(fā)病程度較2014 年嚴重。

表2 供試地方品種的根癌病抗性分布Table 2 Distributed proportion of resistance to crown gall disease of peach cultivars

2.3 不同桃品種資源的抗性與生態(tài)群的關(guān)系

對抗性表現(xiàn)和生態(tài)品種群的關(guān)系進行分析，在2014 年的抗性鑒定中，抗性材料中來源于華北平原區(qū)品種群的較多，其中包括 1 份高度抗病材料和6 份中度抗病材料，占該群體總數(shù)的10.3%；其次為西北干旱區(qū)品種群，有中度抗病材料6 份，占該群體總數(shù)的16.2%。在2015 年的重復(fù)鑒定中，華北平原區(qū)品種群和西北干旱區(qū)品種群各有中度抗病材料1 份，其余均為中度感病和高度感病材料(表3)。

表3 不同品種的抗性與生態(tài)群的關(guān)系Table 3 Relationship between resistance and ecological variety group

注：Ⅰ～Ⅶ及其他分別表示西北干旱區(qū)、華北平原區(qū)、長江流域區(qū)、云貴高原區(qū)、東北高寒區(qū)、華南熱帶、亞熱帶區(qū)、國外等不同桃品種生態(tài)群。

Note:Ⅰ to Ⅶ and others indicated northwest China arid region,northern China plain region, Yangtze river region, Yunnan-Guizhou plateau region, tropical and subtropical region of southern China,cold area of northeast China,abroad peach ecological variety group individually.

3 討 論

3.1 不同桃品種資源抗性差異分析

本試驗所涉及的材料大多為不同地理來源的品種資源，具有廣泛的遺傳背景。在連續(xù)2 a的鑒定中，不同品種的瘤直徑平均值分別為3.44～25.48 mm和5.89～31.40 mm，表現(xiàn)出很大的差異。本研究團隊在對38 個自花授粉群體共計972 個個體的實生苗抗根癌病鑒定中[17]發(fā)現(xiàn)其平均瘤直徑多小于地方品種，即野生資源對根癌病的抗性強于地方品種。Maria等[19]認為，櫻桃李抗根結(jié)線蟲的Ma基因同時具有抗根癌病能力；在葡萄土壤桿菌侵染葡萄的抗性相關(guān)基因的文庫篩選研究中，199 條抗性ESTs被定位到與抗白粉病連鎖的SSR標(biāo)記所在的區(qū)域[20]；Moriya等[21]通過對蘋果的抗根癌病基因分析發(fā)現(xiàn)，該基因所處的區(qū)段與抗瘡痂病的Vh2、Vh4基因及抗白粉病的QTL位點相同。以上研究結(jié)果表明，這些真菌性病害和線蟲抗性基因同樣可作用于根癌病這一細菌性病害。在品種的選育過程中，一些與不良性狀連鎖的抗性基因丟失，這是造成地方品種抗根癌病能力低的原因。另外，本試驗中，品種資源為嫁接苗而野生資源為實生苗，植株的生理年齡存在差異，這是否會造成不同桃種質(zhì)資源對根癌病抗性表現(xiàn)的差異，還需以兩者嫁接苗為材料一同做抗性鑒定。

供試的品種資源大多數(shù)表現(xiàn)為高度感病，在抗性表現(xiàn)較好的10份資源中，‘緋桃’和‘鴛鴦垂枝’為觀賞品種，在進化中處于普通桃的低級狀態(tài)[18]，即所受的選擇壓力小而保留了更多的抗性基因。因此，在今后的桃抗根癌病品種篩選中，抗性品種及越接近原始的材料更應(yīng)受到關(guān)注。

3.2 外界環(huán)境對癭瘤生長的影響

試驗發(fā)現(xiàn)，不同年份癭瘤大小差異明顯。有研究表明，癭瘤的形成與溫度和濕度關(guān)系密切；癭瘤生長過程中，表面形成龜裂(圖1)，加大了水分的散失，容易干枯[22]。試驗進行的第2年降水頻率較高，減少了癭瘤的失水干枯，有利于癭瘤形成。此外，盡管不同品種不同年份接種后的癌瘤直徑有差異，但在總體中的位次卻相似，這說明2 a 的鑒定結(jié)果重復(fù)性較好。因此，為了減少大田鑒定環(huán)境條件的影響，僅用分類標(biāo)準(zhǔn)來衡量抗性大小并不準(zhǔn)確，還需要通過與標(biāo)準(zhǔn)品種對比才能準(zhǔn)確判定供試材料的抗性表現(xiàn)。

從癭瘤的形態(tài)來看，其內(nèi)部存在不同程度的干枯(圖2)，這主要是因為快速生長的癭瘤沒有形成完整的輸導(dǎo)組織與枝條的導(dǎo)管相連[15]，最終無法得到水分及礦質(zhì)營養(yǎng)，從中心開始干枯死亡；與枝條正常表皮組織相鄰的癭瘤卻可獲得水分及營養(yǎng)而一直生長，輕者產(chǎn)生傷口，為其他病原菌的侵染提供入口，嚴重者可能環(huán)繞枝條或根一周生長，使得光合產(chǎn)物運輸阻斷而導(dǎo)致死亡。

圖1 癭瘤表面開裂Fig.1 Rupture of crown gall surface

圖2 癭瘤不同程度的枯死Fig.2 Varying withered crown gall

3.3 桃品種資源抗根癌病類型

根癌土壤桿菌侵染過程主要包括：病原菌附著到寄主細胞表面、T-DNA穩(wěn)定整合到寄主植物核基因組上及瘤的生長增殖等關(guān)鍵時期[23]。Lin等[24]將月季的根癌病抗性表現(xiàn)分為2個過程：抗形成(免疫)和抗擴展，分別用發(fā)病率和瘤大小來衡量。李虎等[15]以野生櫻桃李接種后的枝條為材料，通過半定量PCR分析發(fā)現(xiàn)，極高感株在接種后8 d，可檢測到生長素合成酶基因(iaaH，iaaM)和細胞分裂素合成酶基因(ipt)的表達，到18 d時表達明顯升高；而高抗(本試驗中為免疫)株系即使到18 d，ipt、iaaM、iaaH基因也基本不表達，這表明病原菌沒有將其T-DNA整合到寄主基因組上或者整合成功，但致瘤基因(ipt、iaaM、iaaH)轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄前受阻，最終使得一些株系表現(xiàn)出抗形成能力。在本試驗中，供試材料均發(fā)病，即不存免疫類型，但癭瘤的大小有差異，如2015 年鑒定中，抗性表現(xiàn)最好的‘二接白’瘤直徑為 5.89 mm，最差的大離核黃肉瘤直徑為31.40 mm，這表明不同品種抗擴展能力差異很大。