探討氯吡格雷藥物代謝相關(guān)基因CYP2C19多態(tài)性對冠心病經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)后患者預(yù)后的影響

劉亞萍

徐州醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇徐州 221006

隨著PCI技術(shù)的日漸成熟以及新型支架材料的不斷涌現(xiàn)，其作為一種有效的血運(yùn)重建技術(shù)，在冠心病臨床治療中的地位愈加鞏固，極大的改善了冠心病患者的預(yù)后；然而即便給予PCI術(shù)后患者氯吡格雷聯(lián)合阿司匹林以強(qiáng)化抗血小板治療，仍然無法避免術(shù)后主要心血管不良事件（MACE）的發(fā)生[1-3]。研究表明[4]，冠心病患者從服用氯吡格雷中的獲益與其CYP2C19基因型別關(guān)系密切?；诖?，該研究對該院2015年12月—2017年12月期間收治的60例PCI術(shù)后長期服用氯吡格雷的冠心病患者進(jìn)行研究，旨在探討CYP2C19基因多態(tài)性對其預(yù)后的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取于該院住院治療的冠心病患者120例為研究對象。入選標(biāo)準(zhǔn)：①漢族，年齡≥18歲；②已行冠脈造影確診并植入支架；③氯吡格雷服用時(shí)間≥30 d；④該研究經(jīng)院倫理委員批準(zhǔn)，患者簽署自費(fèi)項(xiàng)目同意書及知情同意書。

1.2 方法

于患者住院期間采集靜脈血2 mL，置于乙二胺四乙酸抗凝管中送實(shí)驗(yàn)室檢測。DNA提取采用廣州賽哲科技有限公司提供的DNA提取試劑盒，并使用CYP2C19基因特異引物進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增，將所獲帶有生物素標(biāo)記的擴(kuò)增產(chǎn)物與CYP2C19基因檢測探針進(jìn)行特異雜交反應(yīng)，隨即通過酶促顯色反應(yīng)使雜交信號(hào)表現(xiàn)出特定顏色，采用由上海百傲科技有限公司提供的BE 3.0型基因芯片檢測系統(tǒng)對芯片進(jìn)行掃描，得到芯片上特定基因位點(diǎn)與DNA擴(kuò)增產(chǎn)物的雜交圖像，分析圖像，判斷基因型[5]。結(jié)果判斷：突變純合 型 （CYP2C19*2/*2、*3/*3）、 突 變 雜 合 型（CYP2C19*1/*2、*1/*3） 和野生型（CYP2C19*1/*1），并以不同基因型編碼的酶對氯吡格雷藥物代謝動(dòng)力學(xué)的影響為依據(jù)將突變純合型、突變雜合型及野生型基因分別歸為慢代謝型（PM）、中間代謝型（IM）及快代謝型（EM）[6]。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)3組性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）及藥物使用情況等資料；通過再入院及電話等方式進(jìn)行6個(gè)月的隨訪，觀察患者M(jìn)ACE事件發(fā)生情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，行t檢驗(yàn),多組間比較采用單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比表示，行χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Logistic回歸分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測結(jié)果

120例患者中PM型患者13例 （10.83%）；IM型患者 56例（46.67%）；EM 型患者 50例（41.67%）；1例（0.83%）檢測結(jié)果為陰性，無法判斷其類型。其中CYP2C19*1的頻率為 65.20%；CYP2C19*2頻率為26.6%、CYP2C19*3頻率為6.60%。

2.2 基線資料

PM、IM、EM 組年齡分別為（60.52±8.97）、（62.30±9.23）歲、（61.78±9.15）歲；BMI指數(shù)為（23.04±2.48）、（22.75±2.55）、（22.97±2.62）kg/m2，三組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=1.756、2.132、1.543，P＞0.05）；3 組性別構(gòu)成比、年齡、BMI指數(shù)及吸煙等冠心病高危因素對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表1。

表1 3組臨床基線資料對比[n（%）]

2.3 藥物使用情況

3組藥物使用分布情況對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表 2。

2.4 MACE發(fā)生情況

攜帶功能缺失型等位基因組 （IM及PM組）的MACE發(fā)生率明顯高于EM組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 3。

表2 3組藥物使用情況對比[n（%）]

表3 3組MACE發(fā)生情況對比[n（%）]

2.5 MACE相關(guān)因素分析

糖尿病及CYP2C19基因型別與MACE發(fā)生有相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 MACE的Logistic回歸分析

3 討論

氯吡格雷屬噻吩吡啶類藥物，其抗血小板作用的發(fā)揮依賴于經(jīng)腸道吸收入肝臟后經(jīng)由P450系列酶代謝所產(chǎn)生的活性物質(zhì)，在酶代謝過程中有2個(gè)氧化反應(yīng)步驟極為關(guān)鍵，而CYP2C19基因酶即為此氧化反應(yīng)步驟中最為關(guān)鍵的酶，因此CYP2C19基因多態(tài)性對關(guān)冠心病患者從服用氯吡格雷中的獲益具有一定影響[7]。

目前已被發(fā)現(xiàn)的CYP2C19等位基因共28種，除野生型外的27種中的11種等位基因編碼的酶活性均以得到證實(shí)，除在漢族人群中較為少見的CYP2C19*17編碼的酶活性增高外，其余10種基因酶的活性均減弱或缺失。研究表明[8-9]，CYP2C19*2和CYP2C19*3是漢族人群中最為常見的變異，其代謝活性完全喪失，該研究中CYP2C19*1的頻率為65.20%；CYP2C19*2頻率為26.6%、CYP2C19*3頻率為6.60%，與上海交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)基本一致。該研究隨訪發(fā)現(xiàn)，攜帶功能缺失型等位基因的冠心病患者M(jìn)ACE發(fā)生率顯著高于野生型基因患者；而Logistic回歸分析進(jìn)一步表明，冠心病患者M(jìn)ACE的發(fā)生與CYP2C19基因多態(tài)性有相關(guān)性；且多數(shù)國內(nèi)外的多中心研究均支持CYP2C19基因多態(tài)性可影響冠心病患者血小板活性，從而改變其預(yù)后[10]。雖然該研究數(shù)據(jù)支持至少攜帶一種功能缺失型基因的患者再發(fā)支架內(nèi)血栓、心肌梗死、心源性死亡的總發(fā)生率顯著高于野生型基因患者，且各等位基因頻率與數(shù)據(jù)庫中數(shù)據(jù)基本相符，但該研究不足之處在于樣本量偏少、僅進(jìn)行為期6個(gè)月的短期隨訪，需大樣本、多中心、長時(shí)間隨訪的研究進(jìn)一步分析CYP2C19基因多態(tài)性對冠心病患者預(yù)后的影響。

綜上所述，CYP2C19基因多態(tài)性檢測對于冠心病PCI術(shù)后患者具有一定臨床指導(dǎo)價(jià)值，但該基因檢測費(fèi)用較高，需要找到更為低成本且簡便的檢測方法；而氯吡格雷抵抗問題的解決，要從不增加出血風(fēng)險(xiǎn)及不受CYP2C19基因多態(tài)性影響兩方面進(jìn)行綜合考量。