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    抗M抗體對(duì)新生兒溶血病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的影響:附1例病例分析

    2018-10-22 08:16:14王麗娜張勤閆燁呂毅
    關(guān)鍵詞:血型游離抗原

    王麗娜 張勤 閆燁 呂毅

    作者單位:450047 河南鄭州,河南大學(xué)附屬鄭州頤和醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心

    MNS血型系統(tǒng)是一個(gè)復(fù)雜的血型系統(tǒng),目前已確定的抗原有46個(gè)。人體血清中抗M抗體較為常見(jiàn),屬于天然不規(guī)則抗體,此類(lèi)抗體的最適反應(yīng)溫度為4 ℃,有時(shí)也可在37 ℃的溫度下凝集紅細(xì)胞。抗M抗體??梢餉BO血型正反定型不符或交叉配血困難。我院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心發(fā)現(xiàn)1例抗M抗體影響新生兒溶血?。╤emolytic disease of newborn,HDN)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)(游離抗體試驗(yàn))結(jié)果的病例,現(xiàn)報(bào)告如下。

    1 病例介紹

    患兒女性,系第1胎第1產(chǎn),于河南大學(xué)附屬鄭州頤和醫(yī)院經(jīng)自然分娩娩出。出生時(shí)嬰兒哭聲弱,羊水清,無(wú)臍帶繞頸,無(wú)出生窒息史,胎盤(pán)正常;Apgar評(píng)分1 min評(píng)9分,5 min評(píng)10分;出生體質(zhì)量2 600 g,母女平安出院。15 d后嬰兒因全身皮膚黃染不消退而收入我院兒科。入院時(shí)嬰兒紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(red blood cell count,RBC)3.57×1012/L,經(jīng)皮測(cè)膽紅素值 280.4 μmol/L,總膽紅素(total bilirubin,TBil)109.8 μmol/L,間接膽紅素(indirect bilirubin,IBil)97.1 μmol/L,直接膽紅素(direct bilirubin,DBil)12.7 μmol/L?;純耗赣H血型為 O 型 Rh(D)陽(yáng)性;患兒父親血型為AB型Rh(D)陽(yáng)性。患兒血型為B型Rh(D)陽(yáng)性,不規(guī)則抗體陽(yáng)性,無(wú)輸血史。

    表1 1例HDN患兒不規(guī)則抗體鑒定試驗(yàn)結(jié)果

    2 血型血清學(xué)檢查

    2.1 試劑及檢測(cè)方法 單克隆抗A血清、抗B血清、抗D 〔免疫球蛋白M(IgM)〕血清、抗球蛋白試劑、抗M細(xì)胞、抗N細(xì)胞、ABO細(xì)胞、酶處理ABO細(xì)胞均由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供;抗人球蛋白卡由瑞士DiaMed公司提供;進(jìn)口譜細(xì)胞由荷蘭Sanquin試劑公司提供。血型鑒定、抗球蛋白試驗(yàn)、游離試驗(yàn)和放散試驗(yàn)均按文獻(xiàn)[1-2]方法操作。

    2.2 紅細(xì)胞血型鑒定 患兒為B型Rh(D)陽(yáng)性,NN型。

    2.3 新生兒溶血3項(xiàng)試驗(yàn)

    2.3.1 直接抗人球蛋白試驗(yàn) 直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果呈陰性。

    2.3.2 游離試驗(yàn)反應(yīng)結(jié)果 游離試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性,并提示有ABO血型系統(tǒng)以外的抗體。A細(xì)胞為2+S,B細(xì)胞為2+S,O細(xì)胞為±。

    2.3.3 放散試驗(yàn)反應(yīng)結(jié)果 放散試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性。A細(xì)胞為陰性,B細(xì)胞為2+,O細(xì)胞為陰性。

    2.4 不規(guī)則抗體鑒定 患兒血清與譜細(xì)胞反應(yīng)符合抗M抗體情況,見(jiàn)表1。

    2.5 抗M抗體效價(jià)測(cè)定 標(biāo)本鹽水介質(zhì)IgM抗體效價(jià)2,IgG抗體效價(jià)小于1。

    2.6 制備反定細(xì)胞重新進(jìn)行游離試驗(yàn) 從獻(xiàn)血者標(biāo)本中篩選MN分型為NN型的多人份A1細(xì)胞和B細(xì)胞,制備成2%~5%的反定紅細(xì)胞重新進(jìn)行游離試驗(yàn)。結(jié)果A1細(xì)胞為2+,B細(xì)胞為2+。

    3 討論

    HDN是由于母嬰血型不合導(dǎo)致的胎兒或新生兒免疫性溶血性疾病。臨床主要分為ABO血型不合和Rh血型不合,造成ABO血型不合HDN的抗體主要是免疫球蛋白G(IgG)抗A抗體、IgG抗B抗體和IgG抗AB抗體。由于A/B物質(zhì)廣泛存在于自然界中,多數(shù)母親在妊娠前體內(nèi)就已經(jīng)存在IgG性質(zhì)的抗A、抗B抗體,因此ABO血型系統(tǒng)的HDN可以發(fā)生在第一胎。

    MNS血型系統(tǒng)是繼ABO血型之后第2個(gè)被發(fā)現(xiàn)的血型系統(tǒng),其復(fù)雜性僅次于Rh系統(tǒng)[3]。MNS血型系統(tǒng)的大多數(shù)抗原在出生時(shí)就已發(fā)育完全,目前已經(jīng)確定的抗原有46個(gè)??筂抗體是一種與人類(lèi)MNS血型系統(tǒng)相關(guān)的不規(guī)則抗體,4 ℃為其最適反應(yīng)溫度[4],低溫麻醉狀態(tài)下手術(shù)患者需注意此類(lèi)抗體可激活補(bǔ)體,在冷抗體最適反應(yīng)溫度范圍內(nèi)(4~20 ℃),可發(fā)生溶血反應(yīng)[5]。有研究顯示,抗 M抗體常常會(huì)引起血型鑒定困難[6-7]。很多抗M抗體都有劑量效應(yīng),與純合子M+N-細(xì)胞的反應(yīng)比雜合子M+N+細(xì)胞強(qiáng),因此用雜合子M+N+細(xì)胞往往不能檢測(cè)出弱的抗M抗體[8]。在鹽水介質(zhì)的凝集試驗(yàn)中,凝集M+紅細(xì)胞的抗M抗體不一定是IgM型,IgG的抗M抗體也可造成凝血反應(yīng)[9],這可能與抗原的數(shù)量、空間結(jié)構(gòu)等因素有關(guān),通常通過(guò)比較不同溫度下的強(qiáng)弱變化可間接區(qū)分抗體類(lèi)型。MNS血型系統(tǒng)同種異體抗體一般很少引起輸血反應(yīng)或HDN,國(guó)內(nèi)時(shí)有抗M抗體、抗N抗體引起交叉配血困難和母嬰血型不合引起HDN的報(bào)道[10]。

    本案例游離試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體,用微柱凝膠抗人球蛋白法抗體鑒定,結(jié)果進(jìn)一步證明患兒血清中含有不規(guī)則抗M抗體,抗體性質(zhì)為IgM型或含有IgM型,因此游離試驗(yàn)檢測(cè)出抗A、抗B抗體的可靠性值得分析?;純簽镹N型時(shí),將NN型獻(xiàn)血人員細(xì)胞制備成反定細(xì)胞A1細(xì)胞、B細(xì)胞重新檢測(cè)游離試驗(yàn),凝集強(qiáng)度結(jié)果比第1次游離試驗(yàn)減弱,從而確定游離試驗(yàn)受抗M抗體干擾。另外,通過(guò)不同介質(zhì)對(duì)抗M抗體的效價(jià)進(jìn)行區(qū)分,患兒MN分型為NN型,表明該患兒抗M抗體未引起HDN,而是ABO系統(tǒng)引起了HDN。

    綜上所述,在臨床工作中發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體時(shí),應(yīng)增加抗體篩查或抗體鑒定試驗(yàn),若懷疑不規(guī)則抗體干擾了游離抗體試驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)該對(duì)反定細(xì)胞進(jìn)行相應(yīng)抗原鑒定或篩選相應(yīng)抗原缺乏的反定細(xì)胞重新進(jìn)行游離抗體試驗(yàn),以獲得更為可靠的結(jié)果。本案例中,因患兒體內(nèi)存在抗A抗體、抗B抗體和抗M抗體,如需輸血應(yīng)選擇O型、M抗原陰性洗滌紅細(xì)胞,以提高輸血的安全性。

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