維持性血液透析患者與AIDS患者的免疫功能比較

陳鳳瑩 劉克芳 袁珍朝

作者單位：615100 四川會理，會理縣人民醫(yī)院檢驗科

尿毒癥患者由于體內(nèi)各種毒素的存在常表現(xiàn)為明顯的免疫功能異常［1］。維持性血液透析（血透）治療雖然可清除患者體內(nèi)的毒素，但其免疫缺陷狀況有時并未得到明顯改善，常表現(xiàn)為細(xì)胞免疫功能低下［2］，其感染和腫瘤的發(fā)生率均明顯高于正常人。因此，實時了解尿毒癥患者的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，對評估療效、判斷病情以及預(yù)防性治療等至關(guān)重要。獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodefocoency syndrome，AIDS）是一種由人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）引起的臨床綜合征（也稱艾滋病）。目前AIDS的致病機(jī)制還不太明確，主要的觀點(diǎn)傾向于HIV直接或間接損傷CD4+T淋巴細(xì)胞（T細(xì)胞），導(dǎo)致AIDS患者的免疫功能紊亂，最終因嚴(yán)重、持久的反復(fù)感染死亡。本研究比較分析尿毒癥和AIDS患者免疫功能的檢測結(jié)果，為提高臨床對維持性透析患者的免疫功能治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象及分組 選取2017年5月—8月在本院進(jìn)行長期維持性血透的60例尿毒癥患者（維持性血透組）和在本院抗病毒中心接受治療已確診為AIDS的60例患者（AIDS組），另選60例常規(guī)體檢健康人群（健康對照組）作為對照。所有研究對象均排除腫瘤性疾病、全身免疫性疾病及嚴(yán)重心肺功能異常等。

1.2 儀器與試劑 儀器采用SYSMEX XT-2000 I血球分析儀（日本希森美康公司），BD FACSCOUNT流式細(xì)胞儀（美國BD公司），低速離心機(jī)；試劑采用血球儀試劑（山東蘭橋公司）和BD公司配套試劑對。所有儀器性能均校準(zhǔn)合格，試劑均在有效期內(nèi)。

1.3 檢測方法

1.3.1 血樣送檢 采集尿毒癥組患者每次透析前的外周靜脈血2 mL，以及各AIDS組和健康對照組人群體檢時的清晨空腹外周靜脈血2 mL，置于EDTA-K2抗凝紫頭管中，立即顛倒混勻8次送檢，標(biāo)本常溫放置時間不超過48 h。

1.3.2 血樣檢測 檢驗科收到標(biāo)本后立即使用SYSMEX XT-2000 I血球分析儀檢測血常規(guī)；將全血顛倒混勻5次以上，分別準(zhǔn)確吸取50 μL于BD公司配套試劑對中，于震蕩器混勻5 s，室溫避光放置1～2 h，分別加入50 μL終止液，然后使用BD FACSCOUNT流式細(xì)胞儀檢測。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 24.0統(tǒng)計分析軟件處理數(shù)據(jù)，先采用Shapiro-Wilk進(jìn)行正態(tài)性分布檢驗，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)以中位數(shù)（四分位數(shù)）〔M（QL，QU）〕及 95% 可信區(qū)間（95% confidence interval，95%CI）表示，組間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗，組內(nèi)比較采用Dunn-Bonferroni進(jìn)行多樣本比較的秩和檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 維持性血透組中男性35例，女性25例；年齡35～68歲，平均（41.6±5.0）歲。AIDS組中男性35例，女性25例；年齡32～70歲，平均（40.0±5.0）歲。健康對照組中男性35例，女性25例；年齡33～69歲，平均（41.0±4.0）歲。3組人群的一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。

2.2 3組間免疫功能各指標(biāo)檢測結(jié)果比較 與健康對照組比較，維持性血透組的淋巴細(xì)胞計數(shù)（lymphocyte，Lym）和CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+T細(xì)胞均明顯降低（均P＜0.05），CD4/CD8比值無明顯變化（P＞0.05）；AIDS組的CD3+CD4+T細(xì)胞、CD4/CD8比值均明顯降低，CD3+CD8+T細(xì)胞明顯升高（均P＜0.05）。與維持性血透組比較，AIDS組的Lym和CD3+CD8+、CD3+T細(xì)胞均明顯升高，CD4/CD8比值明顯降低（均P＜0.05），CD3+CD4+T細(xì)胞無明顯變化（P＞0.05）。3組間白細(xì)胞計數(shù)（white blood cell，WBC）比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。見表1～2。

3 討論

據(jù)相關(guān)研究顯示，尿毒癥患者的外周血Lym普遍降低，其中T細(xì)胞的數(shù)量降低較明顯［3］。本研究中，維持性血透患者的Lym明顯低于健康體檢者，與既往研究相符。本研究結(jié)果顯示，維持性血透患者的CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+T細(xì)胞均明顯低于健康體檢人群，提示維持性血透不僅可以導(dǎo)致CD3+CD4+T 細(xì)胞數(shù)目減少［4］，還可引起 CD3+CD8+、CD3+T細(xì)胞數(shù)目減少，且CD3+CD8+T細(xì)胞降低程度高于CD3+CD4+T細(xì)胞，說明維持性血透患者體內(nèi)確實存在免疫系統(tǒng)的紊亂。目前有關(guān)維持性血透患者存在免疫功能紊亂的原因有以下幾個觀點(diǎn)：① 透析膜對免疫功能的影響：血透患者長期接觸的非生理性透析膜通過調(diào)節(jié)Bal-2、Fas表達(dá)影響患者T細(xì)胞凋亡，血液與透析膜接觸可導(dǎo)致患者外周血單個核細(xì)胞激活，使基因穩(wěn)定性降低，易于凋亡［5］；膜生物相容性影響補(bǔ)體激活，相關(guān)研究表明，尿毒癥患者在透析治療開始前存在T淋巴細(xì)胞數(shù)量減少及功能紊亂，但維持性血透并未改善其免疫功能［6］。② 甲狀旁腺激素（parathyroid hormone，PTH）對免疫功能的影響：PTH可抑制T淋巴細(xì)胞增殖，其抑制作用隨體內(nèi)PTH水平的升高而增強(qiáng)，尿毒癥患者體內(nèi)PTH分泌過多［7］，抑制正常淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)。

表1 3組間免疫功能各指標(biāo)檢測結(jié)果比較〔M（QL，QU），95%CI〕

表2 Dunn-Bonferroni檢驗組內(nèi)比較結(jié)果

HIV病毒主要侵犯人體CD4+T細(xì)胞，導(dǎo)致其數(shù)量減少和功能缺陷，使機(jī)體免疫平衡被打破，免疫功能低下，最終導(dǎo)致各種機(jī)會性感染和腫瘤［8-10］，HIV可在CD4+T細(xì)胞中大量復(fù)制破壞細(xì)胞，通過病毒出芽或env糖蛋白的插入、抑制細(xì)胞膜磷脂的合成以影響細(xì)胞膜功能等方式損傷CD4+T細(xì)胞。本研究顯示，AIDS患者的CD4+T細(xì)胞明顯低于健康體檢人群，而與維持性血透患者比較無明顯差異；AIDS患者的CD8+T細(xì)胞明顯高于健康體檢人群，而維持性血透患者的CD8+T細(xì)胞明顯低于健康體檢人群。對于AIDS患者而言，HIV病毒的復(fù)制針對殺傷的是CD4+T細(xì)胞，對CD8+T細(xì)胞無殺傷作用，可見機(jī)體感染HIV后，CD4+T細(xì)胞進(jìn)行性減少，CD8+T細(xì)胞反應(yīng)性升高，CD4/CD8比值出現(xiàn)倒置現(xiàn)象［11-13］。

綜上所述，本研究提示維持性血透患者體內(nèi)的Lym及各亞群均明顯低于健康體檢人群，AIDS患者除CD4+T細(xì)胞低于健康體檢人群外，其余并無降低，故在一定程度上可認(rèn)為，維持性血透患者的免疫功能紊亂較AIDS患者更嚴(yán)重。對于維持性血透的患者，不應(yīng)僅關(guān)注其體內(nèi)尿素氮和肌酐的含量，還應(yīng)關(guān)注其免疫功能的降低情況，加強(qiáng)護(hù)理及健康教育。