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    巖鹿乳康膠囊對乳腺增生大鼠血清雌孕激素的影響

    2018-10-21 14:28:33郭宇飛王書勤趙素貞周海軍
    世界中醫(yī)藥 2018年6期
    關(guān)鍵詞:乳腺增生雌激素孕激素

    郭宇飛 王書勤 趙素貞 周海軍

    摘要 目的:探討巖鹿乳康膠囊對成年雌性乳腺增生大鼠血清雌激素、孕激素水平的影響。方法:選取Wister大鼠60只,將其隨機(jī)分為6組:空白組、疾病模型組、去卵巢組、三苯氧胺組、乳癖消組、巖鹿乳康膠囊組。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測大鼠血清中雌二醇(E2)和孕酮(P)水平。結(jié)果:與乳癖消組以及疾病模型組比較,巖鹿乳康組血液中E2的水平均顯著降低(P<0.05),P水平明顯升高(P<0.05);與三苯氧胺組比較,巖鹿乳康組血液中E2和P水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:巖鹿乳康膠囊能顯著降低血中雌激素以及升高孕激素水平。

    關(guān)鍵詞 巖鹿乳康膠囊;大鼠;乳腺增生;雌激素;孕激素

    AbstractObjective:TostudytheeffectsofYanluRukangCapsuleonestrogenandprogesteroneinserumofratswithhyperplasiaofmammaryglands.Methods:All60Wisterratswererandomlydividedintosixgroups:blankcontrolgroup,tamoxifengroup,YanluRukanggroup,Rupixiaogroup,diseasemodelgroup,ovariectomizedgroup.Then,thecontentofestradiol(E2)andprogesterone(P)inserumofratsweredetectedbyELISAmethods.Results:ComparedwithRupixiaogroupandmodelgroup,thecontentofE2inbloodintheYanluRukanggroupwassignificantlydecreased,andthecontentofPwassignificantlyhigher(P<0.01);Comparedwithtamoxifengroup,thecontentofE2andPinthebloodintheYanluRukanggroupdidnotsignificantlychanged,andtherewasnostatisticalsignificance(P>0.05).Conclusion:YanluRukangcapsulecansignificantlyreduceestrogenandelevatedprogesteronelevelsinblood.

    KeyWordsYanluRukangCapsule;Ratswithhyperplasiaofmammaryglands;Progesterone

    中圖分類號(hào):R289.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:Adoi:10.3969/j.issn.1673-7202.2018.06.051

    乳腺增生中醫(yī)稱為“乳癖”,又稱乳腺結(jié)構(gòu)不良,是既非炎性反應(yīng),亦非腫瘤,以乳腺腫塊及疼痛為臨床特點(diǎn)的一種疾病。隨著生存環(huán)境的改變及生活節(jié)奏的加快,乳腺病的發(fā)病呈上升趨勢。乳腺增生成為女性特別是育齡婦女最常見的乳腺病,發(fā)病率為80%~90%,居乳腺病發(fā)病的首位[1]。目前用于乳腺增生病治療的中成藥,品種繁多,治法不一,用藥方法不一。中西藥并用以暫時(shí)緩解癥狀為目的,導(dǎo)致病情易反復(fù),不良反應(yīng)明顯。近年來,研究發(fā)現(xiàn),乳腺增生是一種由于內(nèi)分泌失調(diào)導(dǎo)致的疾病[2]。雌激素的過度刺激可使乳腺組織從正常生長到增生乃至腫瘤形成[3]。乳腺增生患者體內(nèi)雌激素分泌增多,孕激素分泌不足;患者體內(nèi)泌乳素水平升高,對乳腺組織有直接刺激作用,還可抑制黃體期孕酮的分泌,促進(jìn)雌二醇的合成,從而導(dǎo)致雌孕激素比例失調(diào),在雌激素持續(xù)刺激下,使乳腺組織增生過度,導(dǎo)致乳腺增生[4]。因此,關(guān)于本病的治療,西醫(yī)多以對抗雌激素為主,代表藥物有甲基睪丸素、三苯氧胺等。本類藥物針對其癥狀的改善有一定的作用,并且起效快、服用方便,但是對內(nèi)分泌影響較大,不良反應(yīng)明顯,例如三苯氧胺長期使用可致子宮內(nèi)膜癌等,不適宜在臨床長期及廣泛的應(yīng)用[5]。我們在前期巖鹿乳康膠囊治療脾腎陽虛型乳癖中發(fā)現(xiàn),其臨床療效獨(dú)特、不良反應(yīng)少[6]。巖鹿乳康膠囊的作用機(jī)制與乳腺雌激素水平調(diào)節(jié)相關(guān)。我們就巖鹿乳康膠囊對乳腺增生大鼠雌孕激素方面的影響進(jìn)行探討。現(xiàn)報(bào)道如下。

    1材料與方法

    1.1材料

    1.1.1動(dòng)物清潔級(jí)成年未孕Wistar雌性大鼠80只(北京維通利華有限公司提供),鼠齡7~8周,體重180~200g,在SPF條件下飼養(yǎng)。

    1.1.2藥物巖鹿乳康膠囊(云南海灃藥業(yè)有限公司,國藥準(zhǔn)字Z20025379);枸櫞酸他莫昔芬片(三苯氧胺)(揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)有限公司,國藥準(zhǔn)字H32021472);乳癖消顆粒(哈爾濱太華藥業(yè)有限公司,國藥準(zhǔn)字Z19990028);以上各藥以60kg人為標(biāo)準(zhǔn),成人6倍給藥。苯甲酸雌二醇注射液(蘇州市蘇牧動(dòng)物藥業(yè)有限公司,批號(hào):100862511);黃體酮注射液(天津金耀藥業(yè)有限公司,國藥準(zhǔn)字H12020533)。

    1.1.3試劑與儀器美國Labnet生產(chǎn)微型高速離心機(jī)(型號(hào)為C2500-R-230V);日本ASONE生產(chǎn)的電熱恒溫培養(yǎng)箱(型號(hào)為ICV-450);Thermoscientific生產(chǎn)的全自動(dòng)酶標(biāo)儀(型號(hào)為MultiskanMK3);伊萊瑞特生物科技有限公司的大鼠雌二醇(E2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(貨號(hào)為E-EL-R0348c),大鼠孕激素/孕酮酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定試劑盒(貨號(hào)為E-EL-R0775c)。

    1.2方法

    1.2.1分組與模型制備飼養(yǎng)1周結(jié)束后,選取60只適應(yīng)性良好的大鼠,按照完全隨機(jī)分組的原則分為空白組、疾病模型組、去卵巢組、三苯氧胺組、乳癖消組、巖鹿乳康膠囊組,每組10只。除空白組外,其余各組大鼠后腿內(nèi)側(cè)交替肌內(nèi)注射苯甲酸雌二醇注射液0.5mg/(kg·d),連續(xù)25d,隨后改為黃體酮注射液4mg/(kg·d)交替肌內(nèi)注射,連續(xù)5d。

    1.2.2給藥方法造模結(jié)束次日開始給藥。1)空白對照組:給予生理鹽水0.2mL/d,共30d。2)疾病模型組:給予生理鹽水0.2mL/d,共30d。3)去卵巢組:用戊巴比妥鈉按40mg/kg腹腔注射麻醉,無菌條件下摘除雙側(cè)卵巢,關(guān)閉腹腔。術(shù)后應(yīng)用青霉素(4萬U/kg)。給予生理鹽水0.2mL/d,至試驗(yàn)結(jié)束。4)三苯氧胺組:于100mL含有0.5%CMC-Na的溶液中加入60mg三苯氧胺,攪拌使其充分溶解,每只大鼠灌胃量約0.01mL/(g·d)的三苯氧胺藥物溶液,為成人劑量的6倍(成人劑量10mg/60kg),共30d。5)乳癖消組:于100mL的0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液中加入12g乳癖消片,攪拌使其充分溶解,每只大鼠灌胃量約0.01mL/(g·d)乳癖消溶液,為成人劑量的6倍(成人劑量6g/60kg),共30d。6)巖鹿乳康膠囊組:于100mL的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液中加入36g巖鹿乳康膠囊,攪拌使其充分溶解,每只大鼠灌胃量約0.01mL/(g·d)巖鹿乳康溶液,為成人劑量的6倍(成人劑量6g/60kg),共30d。

    1.2.3檢測指標(biāo)與方法1)觀察并記錄記錄大鼠乳頭直徑及乳頭高度,測量采用電子游標(biāo)卡尺進(jìn)行。2)于末次給藥后第1天各組大鼠用10%水合氯醛(0.35mL/100mL)麻醉,腹部備皮約2.5cm,絡(luò)合碘消毒皮膚,縱向切口,分離皮膚和肌肉層,縱向剪開肌肉層,游離腸胃,充分暴露腹主動(dòng)脈,右手持采血管平針進(jìn)腹主動(dòng)脈,左手用眼科鑷輕輕輔佐,約抽取動(dòng)脈血5mL,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測定血清E2和P的水平。

    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    數(shù)據(jù)整理統(tǒng)計(jì)和分析采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理,計(jì)量資料采用(±s)表示,比較采用t檢驗(yàn);P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2結(jié)果

    2.16組治療后的大鼠乳頭直徑及高度比較與空白對照組比較,疾病模型組乳頭直徑及高度明顯增大(P<0.05)。與疾病模型組比較,去卵巢組乳頭直徑及乳頭高度均明顯減?。≒<0.05)。與疾病模型組比較,三苯氧胺組、乳癖消組、巖鹿乳康膠囊組乳頭直徑、乳頭高度均明顯減小(P<0.05);與三苯氧胺組比較,巖鹿乳康膠囊組乳頭直徑差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但乳頭高度明顯增高(P<0.05);與乳癖消組比較,巖鹿乳康膠囊組乳頭直徑明顯減小(P<0.05)。見表1。

    2.26組血清中E2和P比較

    與空白對照組比較,疾病模型組血清E2水平明顯增高(P<0.05),P水平明顯降低。與疾病模型組比較,去卵巢組E2水平明顯降低(P<0.05)。與疾病模型組比較,三苯氧胺組、乳癖消組、巖鹿乳康膠囊組血清血清E2水平明顯降低(P<0.05),P水平明顯升高(P<0.05)。與三苯氧胺組比較,巖鹿乳康膠囊組血清E2、P水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與乳癖消組比較,巖鹿乳康膠囊組血清E2水平明顯降低(P<0.05),P水平明顯升高(P<0.05)。見表2。

    3討論

    現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為,乳房為性激素的靶器宮,其功能受下丘腦-垂體-卵巢分泌的激素調(diào)控。乳腺增生的發(fā)病因素諸多,性腺軸失調(diào)為其主要原因[7]?,F(xiàn)代藥理研究指出,巖陀主要化學(xué)成分為巖白菜素,具有抗炎、抗HIV、抑制微生物、鎮(zhèn)咳、抗氧化、鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)免疫等作用[8]。有研究指出,巖陀在其他增生性疾病中如乳腺,具有抑制纖維組織增生、增加局部血流量,減輕炎性反應(yīng)的作用[9]。鹿角霜其含磷酸鈣、碳酸鈣、氛化物等,并含有睪酮、孕酮、垂體泌乳素、雌二醇4種甾體生物激素,其中某些成分有可能是鹿角治乳腺病的物質(zhì)基礎(chǔ)[10-11]。研究證明,鹿角霜等有類雌激素樣作用,能提高雌激素水平[12-13]。亦有指出鹿角霜有類似雄激素作用調(diào)節(jié)雌孕激素比例[14],亦能拮抗雌激素或泌乳素[15]。李增戰(zhàn)等[16]認(rèn)為,鹿角霜能地對抗戊酸雌二醇性小鼠乳腺增生,促進(jìn)正常小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬功能,并能刺激血液中T淋巴細(xì)胞的增殖。大劑量能明顯抑制MA2737小鼠乳腺癌的生長??傊?,鹿角霜改善內(nèi)源激素的分泌,進(jìn)而調(diào)整內(nèi)分泌水平[17]。鹿銜草藥理作用包括降壓、擴(kuò)血管、強(qiáng)心保護(hù)心肌作用。研究證明鹿銜草通過植物雌激素樣作用,提升血清雌激素水平[18]。

    從本研究各組的大鼠乳頭直徑及高度以及血清中E2和P的結(jié)果比較分析得出,巖鹿乳康膠囊不僅治療乳腺增生效果顯著,且可以從根本上調(diào)控雌孕激素,糾正內(nèi)分泌紊亂。疾病模型組與空白對照組比較顯示造模成功。乳癖消組治療有效,對雌孕激素有影響;即降低雌激素升高孕激素。韓蓉等[19]在乳腺寧片對乳腺增生大鼠及激素水平的影響中也有所證實(shí),但效果弱于巖鹿乳康組與三苯氧胺組。三苯氧胺治療效果顯著,但糾正內(nèi)分泌紊亂不如巖鹿乳康膠囊;這或許是臨床應(yīng)用三苯氧胺產(chǎn)生不良反應(yīng)的原因之一[20]。而郁琳等[21]在三苯氧胺、丹那哇治療子宮內(nèi)膜異位癥血清雌、孕激素及子宮內(nèi)膜雌孕激素受體的變化一文中指出,經(jīng)三苯氧胺治療3個(gè)月后,血清雌二醇值升高;而治療6個(gè)月后,血清雌二醇值下降[21]。去勢組治療效果佳,對于一般育齡期女性而言選擇這種治療方法不現(xiàn)實(shí)。

    中醫(yī)學(xué)稱乳腺增生病為乳癖,多因情志內(nèi)傷,肝氣郁結(jié),乳絡(luò)阻滯或腎陽不足以致沖任不調(diào),氣滯痰凝所致;治法則以疏肝理氣,溫補(bǔ)腎陽,活血化瘀,軟堅(jiān)散結(jié),消腫止痛等為主。巖鹿乳康膠囊是由巖陀,鹿角霜,鹿銜草3種藥物組成。巖陀,苦、澀,涼;具有清熱涼血,調(diào)經(jīng)止痛。取其行氣、活血、化瘀,散結(jié)止痛之功治療乳腺增生病。鹿角霜為引藥歸肝、腎之經(jīng),其味咸,故能溫陽寒,軟堅(jiān)散結(jié)。且為血肉有情之品溫補(bǔ)腎陽之要藥,更是治療乳腺增生的常用藥物,并且療效顯著[22-23]。鹿銜草味甘苦,性溫,歸肺、胃、肝、腎經(jīng),能補(bǔ)虛,益腎,活血調(diào)經(jīng),且可以引藥歸經(jīng)入卵巢以調(diào)攝沖任[24]。僅從名字由來便可知補(bǔ)腎之佳品,亦是治療乳腺增生病之良藥[25]。3藥合用清熱涼血,調(diào)經(jīng)止痛,以治療乳癖。臨床研究亦證實(shí),此方對此病有效[6,26]。

    總之,巖陀,鹿角霜,鹿銜草均入腎經(jīng),有補(bǔ)腎之功;補(bǔ)腎的藥物均對性激素有調(diào)節(jié)作用。由于中藥是從多方面,多角度調(diào)整內(nèi)分泌,具體降低或是升高激素水平或許與用量與配伍有關(guān)。

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    (2017-05-04收稿責(zé)任編輯:楊覺雄)

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