松蘿酸自微乳的處方優(yōu)化及質量評價

趙穎　宋婷　屈夢華　宋丹　胥秀英

中圖分類號 R943 文獻標志碼 A 文章編號 1001-0408（2018）03-0312-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.03.06

摘 要 目的：制備松蘿酸自微乳，優(yōu)化其處方，評價其質量。方法：采用乳化法，以中鏈甘油三酯-單亞油酸甘油酯（1 ∶ 1，m/m）為油相，聚氧乙烯氫化蓖麻油為乳化劑，二乙二醇單乙基醚為助乳化劑，制備松蘿酸自微乳。在溶解度試驗和偽三元相圖的基礎上，以自乳化時間（t）、透光率（T）、藥物平衡溶解度（S）、5 min和60 min時藥物的累積溶出度（Q5 min、Q60 min）作為評價指標，采用星點設計-響應面法優(yōu)化微乳處方中油相占比和乳化劑-助乳化劑質量比（Km）。同時對最優(yōu)處方進行驗證試驗，并對其形態(tài)、粒徑、載藥量、溶出度等進行考察。結果：最優(yōu)處方中油相占比為25%、Km為2.0，即處方中混合油相、乳化劑、助乳化劑的質量比分別為25%、50%、25%；最優(yōu)處方所制松蘿酸自微乳的t、T、S、Q5 min、Q60 min分別為1.96 min、87.67%、5.67 mg/g、66.58%、76.73%（RSD均小于3%，n=3），與預測值的相對誤差均小于4%（n=3）。松蘿酸自微乳經水稀釋后為球形乳滴，乳化后平均粒徑為39.4 nm，平均載藥量為4.55 mg/g，在pH 6.8磷酸鹽緩沖液中Q90 min為99.58%（n=3）。結論：所制松蘿酸自微乳的質量符合相關要求。

關鍵詞 松蘿酸；自微乳；偽三元相圖；星點設計-響應面法；質量評價

ABSTRACT OBJECTIVE： To prepare Usnic acid self-microemulsion， prescription optimization and evaluate its quality. METHODS： Usnic acid self-microemulsion was prepared by emulsification method using medium chain triglycerides-single linoleic acid glyceride （1 ∶ 1， m/m） as oil phase， polyoxyethylene hydrogenated castor oil as emulsifier， diethylene glycol monoethyl ether as co-emulsifier. Based on the solubility test and pseudotemary phase diagram， using self-emulsifying time （t）， light transmittance （T）， drug equilibrium solubility （S）， accumulative dissolution rate at 5 min and 60 min （Q5 min， Q60 min） as evaluation indexes， central composite design-response surface methodology was utilized to optimize oil phase ratio and ratio of emulsifier to co-emulsifier （Km） in microemulsion formulation. At the same time， the optimal formulation was verified， the morphology， particle size， drug-loading amount and dissolution of Usnic acid self-microemulsion were investigated. RESULTS： The optimal formulation was as follows as oil phase ratio of 25%， Km of 2.0； ratio of mixed oil phase， emulsifier， co-emulsifier in the formulation was 25%， 50%， 25%. t， T， S， Q5 min and Q60 min of Usnic acid self-microemulsion prepared by optimal formulation were 1.96 min， 87.67%， 5.67 mg/g， 66.58%， 76.73% （all RSD<3%， n=3）， respectively. The relative errors of them to predicted values were all less than 4% （n=3）. Usnic acid self-microemulsion was spherical droplet in shape after diluted with water. The average particle size was 39.4 nm， average drug-loading amount was 4.55 mg/g. Q90 min of Usnic acid self-microemulsion reached 99.58% in pH 6.8 phosphate buffer （n=3）. CONCLUSIONS： Prepared Usnic acid self-microemulsion is in line with quality requirements.

KEYWORDS Usnic acid；Self-microemulsion； Pseudotemary phase diagram； Central composite design-response surface methodology； Quality evaluation

松蘿酸（Usnic acid，UA）來源于地衣植物，具有抗菌[1]、抗腫瘤[2-3]、新生血管抑制[4]、促進皮膚創(chuàng)傷愈合等[5]藥理活性，尤其在抗菌和抗腫瘤方面具有較好的應用前景。UA對臨床分離的萬古霉素抗性腸球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌等耐藥菌株顯示出較強的抗耐藥菌株活性[6]；在抗腫瘤方面，UA為一種非基因毒抗癌藥，在殺滅癌細胞的同時兼具新生血管抑制作用[7]，有望成為新的癌癥化療候選先導化合物。UA為難溶性藥物[8]，本課題組前期對UA理化性質的研究表明其溶解度和溶出度較低，限制了UA的進一步開發(fā)，近年來國內外也尚未見UA相關制劑上市。

自微乳釋藥系統(tǒng)的處方組成包含藥物、油相、乳化劑和助乳化劑，能被水無限稀釋形成粒徑介于10～100 nm之間的微乳，由于其處方組成特殊，可作為難溶性、難吸收性藥物的理想載體[9]。藥物制成自微乳后既可增加藥物的溶解度[10]和溶出度[11]，又可進一步與親水性骨架型儲庫制備成微乳經皮給藥系統(tǒng)[12]，提高藥物穩(wěn)定性，增加藥物經皮滲透量[13]等。本研究通過乳化法制備UA自微乳，并采用星點設計-響應面法[14]優(yōu)化其處方，以期改善UA的溶解度和溶出度。

1 材料

1.1 儀器

Waters 2695-2996高效液相色譜（HPLC）儀（美國 Waters公司）；AUW-220D電子天平（日本島津公司）；XW-80A漩渦混合器（上海醫(yī)科大學儀器廠）；SB2200超聲清洗機[必能信超聲（上海）有限公司]；RC-6溶出試驗儀（天津大學無線電廠）；RISE-2008激光粒度分析儀（濟南潤之科技有限公司）；H-7000透射電鏡（日本日立公司）。

1.2 藥品與試劑

UA對照品（陜西森弗生物技術有限公司，批號：150607，純度：≥98%）；UA原料藥（由重慶理工大學藥學與生物工程學院實驗室從藥用地衣植物雪地茶中分離純化得到，批號：141220，經HPLC法測定純度：98%）；肉豆蔻酸異丙酯（IPM）、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油（德國巴斯夫公司）；單亞油酸甘油酯、單油酸甘油酯、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、二乙二醇單乙基醚、中鏈甘油三酯、聚甘油-3雙異硬脂酸酯（法國嘉法獅公司）；大豆卵磷脂、油酸、油酸丁酯、蓖麻油、聚山梨酯80、烷基酚聚氧乙烯醚OP乳化劑、丙二醇、丙三醇、乙二醇、聚乙二醇400等均為藥用級，甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 UA的含量測定

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Sepax Sapphire C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-[50 mmol KH2PO4-三乙胺（500 ∶ 1）]（70 ∶ 30，V/V）；流速：1 mL/min；紫外檢測波長：285 nm；柱溫：40 ℃；進樣量：10 μL。

2.1.2 溶液的制備 對照品溶液：精密稱取UA對照品適量，加少量氯仿溶解后用甲醇稀釋制成質量濃度為126.00 μg/mL的溶液，即得。供試品溶液：精密稱取UA自微乳50 mg，置于10 mL量瓶中，加流動相超聲（功率：500 W，頻率：40 kHz，下同）10 min，溶解后稀釋至刻度，搖勻，經0.22 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得?？瞻纵o料樣品溶液：精密稱取不含UA的空白自微乳，按供試品溶液制備方法制備成空白輔料樣品溶液。

2.1.3 專屬性試驗 將對照品溶液、供試品溶液和空白輔料樣品溶液經0.22 μm微孔濾膜濾過后，按“2.1.1”項下色譜條件進樣測定，記錄色譜。結果顯示，供試品溶液和對照品溶液在285 nm波長處均有較好吸收，吸光度穩(wěn)定，而空白輔料樣品溶液在285 nm波長處無明顯吸收，表明輔料對UA的測定無干擾。理論板數按UA計不低于3 000。

2.1.4 線性關系考察 精密吸取UA對照品溶液適量，分別制成質量濃度為1.97、3.94、7.88、15.75、31.50、63.00、126.00 μg/mL的系列標準溶液，按“2.1.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。以對照品的質量濃度為橫坐標（x）、峰面積為縱坐標（y）進行線性回歸，得回歸方程y=6.50×107x-11 667（r=0.999 9），結果表明，UA在1.97～126.00 μg/mL質量濃度范圍內與峰面積呈良好的線性關系。

2.1.5 精密度試驗 分別取“2.1.4”項下低、中、高質量濃度（1.97、31.50、126.00 μg/mL）的UA對照品溶液，于同日內重復進樣5次，考察日內精密度；連續(xù)進樣5 d，考察日間精密度。結果，低、中、高質量濃度的UA對照品溶液的日內RSD分別為1.25%、0.93%、0.65%（n=5），日間RSD分別為0.86%、0.34%、0.78%（n=5），表明本方法精密度良好。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一供試品溶液，分別于室溫放置1、2、4、8、16、24 h進樣測定，記錄峰面積。結果，峰面積的RSD為0.90%（n=6），表明供試品溶液在24 h穩(wěn)定。

2.1.7 重復性試驗 稱取UA自微乳6份，每份50 mg，精密稱定，分別置于10 mL 量瓶中，加流動相超聲10 min，溶解后稀釋至刻度，搖勻，經0.22 μm微孔濾膜濾過，進樣測定，記錄峰面積。按外標法以峰面積計算UA的含量。結果，UA含量的RSD為0.54%（n=6），表明本方法重復性良好。

2.1.8 準確度試驗 精密稱取UA對照品及相應處方量的輔料9份，每份25 mg，置于10 mL量瓶中，分別按照80%、100%、120%的目標濃度精密加入相應量的UA對照品溶液，用流動相稀釋定容，搖勻，經0.22 μm微孔濾膜濾過，進樣測定，記錄峰面積，計算回收率。結果，80%、100%、120%目標濃度溶液的回收率分別為100.34%、100.37%、99.77%，RSD分別為0.97%、0.60%、0.19%（n=3），表明本方法準確度符合方法學相關要求。

2.2 UA在各輔料中的溶解度測定

將過量UA原料藥分別加入到裝有1 mL油相（分別為中鏈甘油三酯、蓖麻油、單油酸甘油酯、油酸丁酯、單亞油酸甘油酯、肉豆蔻酸異丙酯、油酸）、不同乳化劑（分別為OP乳化劑、聚山梨酯80、聚氧乙烯氫化蓖麻油、大豆卵磷脂、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯蓖麻油、聚甘油-3雙異硬脂酸酯）、不同助乳化劑（分別為丙三醇、二乙二醇單乙基醚、聚乙二醇400、丙二醇、乙二醇）的EP管中，渦旋分散后，在37 ℃水浴中振蕩平衡72 h，10 000 r/min（離心半徑為6 cm）離心15 min，取上清液用甲醇稀釋至適當質量濃度，經0.45 μm微孔濾膜濾過，取濾液按“2.1.1”項下色譜條件進樣測定，計算UA在各輔料中的溶解度，結果見圖1。

由圖1結果顯示，油相中UA的溶解度大小依次為：中鏈甘油三酯>蓖麻油>單油酸甘油酯>油酸丁酯>單亞油酸甘油酯>肉豆蔻酸異丙酯>油酸；乳化劑中UA的溶解度大小依次為：OP乳化劑>聚山梨酯80>聚氧乙烯氫化蓖麻油>大豆卵磷脂>辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯>聚氧乙烯蓖麻油>聚甘油-3雙異硬脂酸酯；助乳化劑中UA的溶解度大小依次為：丙三醇>二乙二醇單乙基醚>聚乙二醇400>丙二醇>乙二醇。

2.3 油相、乳化劑和助乳化劑的初步篩選

根據“2.2”項下溶解度結果，以蓖麻油、中鏈甘油三酯、單亞油酸甘油酯、單油酸甘油酯等油相，分別與“2.2”項下乳化劑以2 ∶ 3的質量比進行配伍，繪制偽三元相圖，以透光率大于90%、外觀澄清透明以及自乳化時間越短為評價標準。結果，以中鏈甘油三酯、單亞油酸甘油酯、單油酸甘油酯為油相時，分別與聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油為乳化劑時配伍形成微乳的能力較強。

2.4 乳化劑和助乳化劑的篩選

固定中鏈甘油三酯為油相，將OP乳化劑、聚山梨酯80、聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯分別與助乳化劑丙三醇、二乙二醇單乙基醚以2 ∶ 1的質量比混合形成混合乳化劑，再向上述混合乳化劑中分別加入20%的中鏈甘油三酯，混勻后加超純水渦旋混勻直到形成水包油（O/W）型微乳。以“2.3”項下評價標準考察各體系形成微乳的能力，初步篩選乳化劑和助乳化劑的種類。結果表明，聚氧乙烯氫化蓖麻油與二乙二醇單乙基醚配伍能形成較理想的微乳，因此確定聚氧乙烯氫化蓖麻油為乳化劑，二乙二醇單乙基醚為助乳化劑。

2.5 偽三元相圖篩選油相

固定乳化劑為聚氧乙烯氫化蓖麻油，助乳化劑為二乙二醇單乙基醚，乳化劑-助乳化劑質量比（Km）為2，選擇油相對UA溶解能力較大的中鏈甘油三酯、單油酸甘油酯、蓖麻油、單亞油酸甘油酯為油相。采用滴定法，精密稱取不同量的油相、乳化劑和助乳化劑混合配制成一定比例的混合溶液，在攪拌狀態(tài)下逐漸滴加超純水，以外觀“澄清透明”為指標，記錄臨界加水量，按油相、水相、混合乳化劑在臨界點的各自質量百分數繪制偽三元相圖。以微乳區(qū)（偽三元相圖中曲線的右邊為微乳液區(qū)域）面積最大為標準篩選油相。結果顯示，分別單獨以蓖麻油、中鏈甘油三酯、蓖麻油、單亞油酸甘油酯為油相時，形成的微乳區(qū)較小，當油相比例小于10%時，才能被無限稀釋，保持微乳狀態(tài)。但將中鏈甘油三酯和單亞油酸甘油酯兩種油相以1 ∶ 1的質量比混合使用時，能顯著增加無限稀釋的微乳區(qū)，油相比例可達到50 %。根據相圖結果確定油相為中鏈甘油三酯-單亞油酸甘油酯 （1 ∶ 1，m/m），油相比例為10%～50%。

2.6 偽三元相圖結合溶解量篩選Km

以中鏈甘油三酯-單亞油酸甘油酯（1 ∶ 1，m/m）為混合油相，聚氧乙烯氫化蓖麻油為乳化劑，二乙二醇單乙基醚為助乳化劑，按“2.5”項下方法繪制偽三元相圖，考察不同Km（0.5、1、2、2.5、3、3.5、4）對微乳形成的影響。結果，當Km為0.5和1時，能形成微乳區(qū)，但微乳面積較?。划擪m為2～4時，隨著Km值的增加，形成微乳區(qū)面積相應增加，但增加到一定程度后，微乳區(qū)內會出現高黏度的液晶凝膠相，再結合溶解量的結果，最終選擇Km為1～2.5。

2.7 星點設計-響應面法優(yōu)化載油量和Km

2.7.1 星點設計 選擇對微乳形成有顯著影響的油相比例[混合油相中鏈甘油三酯-單亞油酸甘油酯（1 ∶ 1， m/m）的質量百分數]（X1）與Km（X2）為考察因素，以自乳化時間（t）、透光率（T）、藥物平衡溶解度（S）、5 min和60 min時藥物的累積溶出度（Q5 min、Q60 min）為評價指標，采用星點設計篩選處方。因素與水平見表1。

各因素的極大和極小水平根據有效自微乳化區(qū)域確定，星點設計與結果見表2。

2.7.2 模型擬合 以t、T、S、Q5 min、Q60 min為因變量（Y），X1和X2為自變量，使用Statistic 7.0軟件，分別對各因素的各水平進行多元線性回歸和二項式方程擬合。結果表明，t、T、S、Q5 min、Q60 min的多元線性方程中相關系數（R）分別為0.424、0.845、0.975、0.346、0.585，普遍水平偏低，而各因變量與各自變量的各水平進行非線性擬合效果較好，其中二項式方程為：Y=b0+b1X1+b2X2+b3X1X2+b4X12+b5X22，二項式方程中各參數的數值和方程的相關系數見表3。

2.7.3 響應面優(yōu)化 采用Origin 8.0軟件，描繪不同自變量與因變量的響應面圖，結果見圖2。

由圖2顯示，固定X2時，隨著X1的增加，自乳化速度呈現變慢的趨勢，所需t延長。固定X2時，隨著X1的增加，乳劑的T先增加后下降，當X1超過45%時，乳劑T小于60%，此時乳劑不再呈現透明或半透明，粒徑也超出了微乳所限定范圍；X1在10%～45%范圍時，隨著X2的增加T呈上升趨勢。在X1固定時，隨著X2的增加S呈增加趨勢，但是當X1大于30%時，S的增加幅度大大下降；固定X2時，增加X1則會導致體系載藥量下降。由“2.2”項下結果表明，UA在聚氧乙烯氫化蓖麻油中的溶解度最大，所以微乳對UA的增溶能力主要依賴于體系中乳化劑用量。當X1固定時，UA自微乳的Q5 min隨X2的增加先增加后減小，Q60 min隨X2的增加而增加；當X2固定時，UA自微乳的Q5 min隨X1的增加先增加后減小，Q60 min隨X1的增加先增加后減小。在X2較小而X1較大時，表面活性劑促進微乳形成的能力降低，粒徑偏大，并且對藥物增溶能力也隨之降低，藥物可能會在稀釋過程中析出，因此降低了藥物的累積溶出度。根據上述結果，綜合考察指標，確定空白自微乳處方中X1為25%、X2為2，即處方中油相、乳化劑、助乳化劑的占比分別為25%、50%、25%。

2.7.4 驗證試驗 按“2.7.3”項下確定的處方量制備UA自微乳，考察其t、T、S、Q5 min、Q60 min，并以實測值與預測值的相對誤差[%，（預測值-真實值）/預測值×100%]大小來考察所建數學模型的預測性。結果顯示，t、T、S、 Q5 min、Q60 min實測值與預測值的相對誤差均小于4%（RSD均小于3%，n=3），表明所建立的數學模型預測性良好，詳見表4。

2.8 自微乳中UA加入量的確定

向優(yōu)化的1 g空白自微乳中分別加入4、5、6 mg的UA原料藥，考察其溶解時間和乳化后的粒徑。結果表明，UA加入量分別為4、5 mg時，UA在空白自微乳中的溶解時間分別為37、45 min，乳化后粒徑分別約為39.2、40.7 nm。UA加入量為6 mg時，3 h內UA無法完全溶解，乳化后粒徑跨距較大，不利于載藥自微乳的制備，藥物在空白自微乳處方中溶解達到過飽和，易析出。在溶解時間和乳化后粒徑差異不大的情況下，以最大的載藥量為宜，因此確定自微乳的投藥量為5 mg/g。

2.9 UA自微乳的制備

稱取處方量的混合油相中鏈甘油三酯和單亞油酸甘油酯（1 ∶ 1，m/m）、聚氧乙烯氫化蓖麻油、二乙二醇單乙基醚置于具塞三角錐瓶中，在50 ℃水浴中混合均勻后，加入UA，置于37 ℃水浴中緩慢振蕩直至形成透明、均一溶液，即得UA自微乳。

2.10 UA自微乳的含量測定

精密稱取UA自微乳50 mg，平行3份，分別置于10 mL量瓶中，加甲醇超聲10 min溶解后稀釋至刻度，搖勻，經0.22 μm微孔濾膜濾過，按“2.1.1”項下方法測定UA峰面積，按外標法計算UA含量。結果顯示，UA自微乳中UA含量分別為4.58、4.52、4.55 mg/g，平均含量為4.55 mg/g（RSD=0.66%，n=3）。

2.11 UA自微乳的形態(tài)觀察

將UA自微乳用水稀釋100倍后，經0.22 μm微孔濾膜濾過，點樣于銅網，1%磷鎢酸負染，濾紙吸干染液，采用透射電鏡觀察其形態(tài)。結果顯示，UA自微乳經水稀釋后形成較為均一的球形乳滴。透射電鏡圖見圖3。

2.12 UA自微乳的粒徑測定

將3批次的UA自微乳分別用超純水稀釋100倍形成微乳，使用激光粒度分析儀測定其粒徑。結果顯示，3批次的UA自微乳的粒徑分別為38.0、40.0、40.2 nm（n=3），平均粒徑為39.4 nm（RSD=3.09%，n=3）。粒徑分布圖見圖4。

2.13 UA自微乳的體外溶出度測定

采用智能溶出儀，將UA自微乳（相當于4.55 mg/g UA）填裝到膠囊中，每份0.5 g。分別以250 mL超純水、0.1 mol/L的鹽酸和pH 6.8磷酸鹽緩沖液（PBS）為溶出介質，轉速50 r/min，溫度（37±0.5） ℃，分別于5、10、20、30、45、60、90、120、180 min時取樣5 mL，并同時補足等溫等量的溶出介質，取樣液經0.45μm微孔濾膜濾過，進樣測定UA含量，繪制體外溶出曲線。不同介質中UA自微乳的體外溶出曲線見圖5。

由圖5顯示，在pH 6.8 PBS中90 min時，UA的溶出度Q90 min達到99.58%（n=3），在180 min內UA釋放完全。UA自微乳的體外溶出研究應選擇pH 6.8 PBS為溶出介質較為適宜。

3 討論

UA自微乳的體外釋放研究，測定的UA含量是體系中各種存在形式的藥物含量的總和，包括游離藥物、膠束中的藥物和微乳乳滴中的藥物，而不是單純的游離藥物[15]。因此，藥物的自微乳化給藥系統(tǒng)的溶出度試驗不是傳統(tǒng)意義上的藥物分子從制劑體系中的溶出。從UA自微乳在不同溶出介質的體外溶出度數據可知，以水和0.1 mol/L的鹽酸為溶出介質時，45 min后UA的含量明顯下降，表明該系統(tǒng)經溶出介質稀釋后，膠束和微乳乳滴在水和0.1 mol/L鹽酸中不穩(wěn)定，藥物不斷從膠束中和微乳乳滴中釋放累積，而體系不具有較高的增溶能力，導致藥物最終析出；而以pH 6.8 PBS為溶出介質時，自微乳中各種藥物存在形式均較穩(wěn)定，不易受到破壞而導致藥物析出，因此UA自微乳的體外溶出度研究應選擇pH 6.8 PBS為溶出介質較為適宜。

優(yōu)良的自微乳不僅要求有很強的自乳化能力，同時也需要系統(tǒng)有較高的載藥量，UA為典型的難溶性藥物，在水中的溶解度小于0.01 g/100 mL，在前期試驗研究中測得UA的油水分配系數為2.936，符合制備自微乳的條件。本文成功制得符合質量相關要求的UA自微乳，可為后續(xù)UA新型經皮給藥系統(tǒng)的進一步研究開發(fā)提供一定參考。

參考文獻

[ 1 ] MACIAG-DORSZYNSKA M，WEGRZYN G，GUZOW- KRZEMINSKA B. Antibacterial activity of lichen secondary metabolite usnic acid is primarily caused by inhibition of RNA and DNA synthesis[J]. FEMS Microbiol Lett，2014，353（1）：57-62.

[ 2 ] 郝凱華，韓濤，胡鵬斌.松蘿酸抑制小鼠H22腫瘤生長及作用機制研究[J].中國藥師，2016，19（1）：29-32.

[ 3 ] 唐燕霞，包海鷹，王新斌，等.硬枝樹花中抑制 H22荷瘤小鼠腫瘤的活性成分研究[J].菌物學報，2015，34（2）：278-286.

[ 4 ] SONG Y，DAI F，ZHAI D，et al. Usnic acid inhibits breast tumor angiogenesis and growth by suppressing VEGFR2- mediated AKT and ERK1/2 signaling pathways[J]. Angiogenesis，2012，15（3）：421-432.

[ 5 ] 鄒慧蛟，高利.松蘿酸合成物對大鼠傷口愈合的影響[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2017（5）：20-21.

[ 6 ] ELO H，MATIKAINEN J，PELTTARI E. Potent activity of the lichen antibiotic （+） -usnic acid against clinical isolates of vancomycin-resistan tentarococci and methicillin- resistant Staphylococcus aureus[J]. Naturwissenschaften，2007，94（6）：465-468.

[ 7 ] 郝凱華，韓濤，胡鵬斌.松蘿酸抗腫瘤作用的研究進展[J].現代腫瘤醫(yī)學，2015，23（23）：3535-3537.

[ 8 ] 趙穎，陶建生，張彤.松蘿酸的研究進展[J].中成藥，2010，32（2）：270-272.

[ 9 ] KYATANWAR A，JADHAV K，KADAM VJ. Self micro- emulsifying drug delivery system （SMEDDS）：review[J]. J Pharm Res，2010，3（1）：75-83.

[10] 楊文蓮，牛濤，傅春升，等.葛根素自微乳制劑的制備工藝研究[J].中國藥房，2012，23（15）：1375-1377.

[11] 何琳，廖巍，盧秀霞，等.吲哚美辛自微乳腸溶膠囊的處方設計及體外溶出度評價[J].廣東藥學院學報，2013，29（4）：351-356.

[12] 劉彩云，王卓婭，羅欣茹，等.防脫復合中藥單體自微乳及微乳凝膠劑的研究[J].中國美容醫(yī)學，2016，25（12）：49-53.

[13] 馮艾靈，王英姿，張勝海，等.苦參總堿納米乳的理化性質及其體外透皮實驗研究[J].中國中藥雜志，2013，38（16）：2628-2632.

[14] 陳笑，富志軍.星點設計-效應面法優(yōu)化蓮心總堿自微乳處方[J].中成藥，2016，38（7）：1490-1495.

[15] 鄭曉清，王晶翼，楊清敏，等.星點設計-效應面法優(yōu)化依西美坦自微乳給藥系統(tǒng)[J].中國藥學雜志，2011，46（7）：532-536.

（收稿日期：2017-05-17 修回日期：2017-08-28）

（編輯：鄒麗娟）