響應(yīng)面法優(yōu)化卡布里鷹嘴豆蛋白提取工藝

張俊杰,郭 晨,劉毅飛,方 彩,王志偉,王義虬,縱 偉,2,*

(1.鄭州輕工業(yè)學(xué)院食品與生物工程學(xué)院,河南鄭州 450002; 2.食品生產(chǎn)與安全河南省協(xié)同創(chuàng)新中心,河南鄭州 450002; 3.河南省冷鏈?zhǔn)称焚|(zhì)量安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,河南鄭州 450002)

鷹嘴豆(CiceraritienumL.)是豆科(Leguminosae)鷹嘴豆屬(Cicer)唯一栽培種[1],世界第二大種植豆類,僅次于大豆[2],也是世界第三大作為膳食蛋白質(zhì)來源的豆類作物[3],已經(jīng)有幾千年的栽培歷史[4]。鷹嘴豆是一種天然植物蛋白資源,蛋白質(zhì)含量占籽粒干基總量的13%～33%[5],貯藏蛋白主要由清蛋白、球蛋白和谷蛋白組成[6]。鷹嘴豆含有18種氨基酸,包括人體必需的8種氨基酸[7]。鷹嘴豆蛋白因其氨基酸組成均衡、生物利用率高和抗?fàn)I養(yǎng)因子低而被作為植物蛋白的重要來源[8],且鷹嘴豆蛋白本身就具有一定的抗氧化活性[9],是一種非常好的全價(jià)蛋白[10]。

卡布里鷹嘴豆的傳統(tǒng)種植區(qū)是在地中海沿岸和中亞地區(qū)[11]。我國鷹嘴豆主要分布于新疆、青海、甘肅和云南等省[12],其中,新疆的木壘縣和奇臺(tái)縣是我國鷹嘴豆的主產(chǎn)區(qū)[13]。該地區(qū)根瘤菌的遺傳多樣性已被充分研究。根瘤菌可以與鷹嘴豆共生固氮,進(jìn)一步影響鷹嘴豆籽粒品質(zhì),如蛋白質(zhì)含量等。而云南文山地區(qū)是首次引種卡布里鷹嘴豆,對(duì)其籽粒中蛋白尚未見相關(guān)研究報(bào)道。

綜合國內(nèi)外對(duì)于蛋白質(zhì)提取的研究,普遍采用的方法有溶液提取法、酶提取法、超聲波提取法和雙水相萃取法[14]。堿溶酸沉法是溶液提取法的一種,主要是利用蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)(Isoelectric point,pI)溶解度最小的原理,在pH較高時(shí)溶解蛋白,然后調(diào)節(jié)pH至pI使之凝聚沉淀[15]。該法具有操作簡(jiǎn)單、易于控制、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)[16]。之前周麗卿等[17]以新疆鷹嘴豆為原料探究了其蛋白質(zhì)的最佳提取工藝參數(shù),但尚未對(duì)其蛋白純度進(jìn)行研究。

本文以云南文山卡布里鷹嘴豆為原料,采用堿溶酸沉法提取鷹嘴豆蛋白,并進(jìn)一步優(yōu)化了蛋白提取工藝,同時(shí)保證了高蛋白得率與高蛋白純度,旨在為云南地區(qū)鷹嘴豆的推廣種植與綜合利用提供科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

卡布里鷹嘴豆 云南文山自治州丘北縣;氫氧化鈉、鹽酸、濃硫酸、硼酸、溴甲酚綠、甲基紅、石油醚(沸程60～90 ℃) 分析純,天津市永大化學(xué)試劑有限公司。

400Y粉碎機(jī) 浙江金華鉑歐五金廠;TGL-20M臺(tái)式高速冷凍離心機(jī) 上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司;AE224電子分析天平 上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司;250 mL索氏抽提器 鄭州中天實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;101-2電熱鼓風(fēng)干燥箱 北京中興偉業(yè)儀器有限公司;T6新世紀(jì)紫外可見光分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;HYP-3智能消化爐、KDN-103F型自動(dòng)定氮儀 上海纖檢儀器有限公司等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 粉碎 選擇成熟且顆粒飽滿的鷹嘴豆籽粒,用粉碎機(jī)以30000 r/min的轉(zhuǎn)速粉碎,過100目篩。將過篩的豆粉放入烘箱中，40 ℃烘干至恒重,裝入自封袋4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 脫脂 索氏抽提參照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.6-2003[18]。將干燥至恒重的豆粉用濾紙包好放入索氏抽提器中,以沸程為60～90 ℃的石油醚為提取劑進(jìn)行脫脂。抽提溫度80 ℃,抽提時(shí)間8 h,至抽提器中石油醚由黃色變?yōu)橥该鳠o色,以保證脫脂完全。脫脂后的豆粉放于烘箱中，40 ℃進(jìn)行干燥至恒重,裝入自封袋4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 等電點(diǎn)的測(cè)定 Sanchez-Vioque等[19]測(cè)定了鷹嘴豆總蛋白的等電點(diǎn)為4.3,初步判斷云南卡布里鷹嘴豆的等電點(diǎn)主要在4～5之間。采用紫外分光光度法測(cè)定。稱取0.5 g脫脂豆粉9份,制備堿溶上清液10 mL,用5 mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)pH分別為3.5、4.0、4.1、4.3、4.5、4.7、4.9、5.0、5.5,6000 r/min 離心15 min,分別吸取1 mL上清液,在595 nm處比色測(cè)定吸光值[20]。上清液吸光度最低,即殘留蛋白最少,所對(duì)應(yīng)的pH為蛋白的等電點(diǎn)。

1.2.4 卡布里鷹嘴豆蛋白的提取 用文獻(xiàn)[21]中報(bào)道的方法并做適當(dāng)修改,從云南卡布里鷹嘴豆中提取蛋白。稱取脫脂后的豆粉3 g置于錐形瓶中,分別編號(hào),按照一定比例加入蒸餾水,搖勻后滴加0.5 mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH,攪拌溶解一定時(shí)間后,將溶液轉(zhuǎn)移到離心管中進(jìn)行離心,在6000 r/min的轉(zhuǎn)速下離心15 min。離心完畢,取上清液傾倒于前一步的錐形瓶中。然后用0.5 mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)上清液pH至鷹嘴豆蛋白等電點(diǎn)4.9,繼續(xù)在6000 r/min的轉(zhuǎn)速下離心15 min。之后將上清液傾倒干凈,所得沉淀物即為云南卡布里鷹嘴豆蛋白粗提物。

1.2.5 單因素實(shí)驗(yàn) 按照上述步驟,以提取鷹嘴豆蛋白的液料比、堿溶pH、堿溶溫度、堿溶時(shí)間為試驗(yàn)因素,以鷹嘴豆粗蛋白得率作為試驗(yàn)指標(biāo),分別做單因素實(shí)驗(yàn),以分析各因素對(duì)鷹嘴豆蛋白得率的影響。

以液料比為單因素時(shí),在堿溶溫度40 ℃,堿溶時(shí)間30 min,堿溶pH9.5,酸沉pH4.9的條件下,將液料比梯度分別設(shè)置為8∶1、10∶1、12∶1、14∶1和16∶1 mL/g提取蛋白質(zhì)。

以堿溶pH為單因素時(shí),在液料比12∶1 mL/g,堿溶溫度40 ℃,堿溶時(shí)間30 min,酸沉pH4.9的條件下,將堿溶pH梯度設(shè)置為8.0、8.5、9.0、9.5、10.0、10.5和11.0提取蛋白質(zhì)。

以堿溶溫度為單因素時(shí),在液料比12∶1 mL/g,堿溶pH9.5,堿溶時(shí)間30 min,酸沉pH4.9的條件下,將堿溶溫度梯度設(shè)置為20、30、40、50、60 ℃提取蛋白質(zhì)。

以堿溶時(shí)間為單因素時(shí),在液料比12∶1 mL/g,堿溶pH9.5,堿溶溫度40 ℃,酸沉pH4.9的條件下,將堿溶時(shí)間梯度設(shè)置為30、60、90、120、150 min提取蛋白質(zhì)。

1.2.6 響應(yīng)面試驗(yàn) 在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取堿溶pH、液料比和堿溶時(shí)間三個(gè)因素,每個(gè)因素中選取三個(gè)對(duì)蛋白質(zhì)得率影響較大的水平,建立三因素三水平的Box-Behnken中心組合試驗(yàn),以蛋白質(zhì)得率為響應(yīng)值,各因素的三個(gè)水平采用-1、0、1進(jìn)行編碼,如表1。每個(gè)試驗(yàn)組合重復(fù)測(cè)定2次,取其平均值作為得率結(jié)果,試驗(yàn)結(jié)果采用Design-Expert 8.0.6.1軟件分析。

表1 Box-Behnken 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)因素及水平表Table 1 Variables and levels for Box-Behnken design

1.2.7 計(jì)算公式 對(duì)采用堿溶酸沉法最終產(chǎn)物蛋白質(zhì)得率按照以下公式計(jì)算。

蛋白質(zhì)得率(%)=提取出粗蛋白質(zhì)的質(zhì)量/脫脂豆粉的質(zhì)量×100

鷹嘴豆粉純度測(cè)定按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB5009.5-2016[22]計(jì)算,采用凱氏定氮法進(jìn)行,氮含量換算蛋白質(zhì)含量的換算系數(shù):6.25。計(jì)算公式如下:

純度(%)(干基)=[(V2-V1)×(N×0.0140×K×100)]/[W×(100-X)×100]

式中:V2-滴定試樣時(shí)消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(mL);V1-滴定試樣時(shí)消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(mL);N-酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度,N;K-氮換算成粗蛋白質(zhì)的系數(shù);W-試樣質(zhì)量(g);X-試樣水分含量;0.0140-每毫克當(dāng)量氮的克數(shù)。

1.2.8 數(shù)據(jù)處理 利用OriginPro 9.0、Design-Expert 8.0.6 Trial和SPSS Statistics 17.0.0.236進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 鷹嘴豆脫脂蛋白等電點(diǎn)測(cè)定結(jié)果

從圖1可以看出,在所測(cè)的pH范圍內(nèi),隨著pH的增大,上清液的吸光度呈現(xiàn)出先減小后增大的趨勢(shì)。在pH為4.9處,上清液的吸光度最小,表明了上清液中所殘留的蛋白質(zhì)濃度最低,該pH即為鷹嘴豆蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。與張濤等[23]報(bào)道的鷹嘴豆分離蛋白等電點(diǎn)pI=5相似。

圖1 吸光度隨pH變化曲線Fig.1 Absorbency with pH change curves

2.2 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 液料比對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響 由圖2可得,蛋白質(zhì)得率基本在10.50%左右,并隨著加水量的增加先增大,在液料比為12∶1 mL/g時(shí)得率為最大,達(dá)到10.69%,之后得率逐漸減小。這是由于適當(dāng)增加液料比有助于增加蛋白質(zhì)的溶出量,提高得率;但液料比過大,蛋白質(zhì)分子與水分子之間相互作用增加,使蛋白質(zhì)分子之間不容易發(fā)生聚沉,在酸沉?xí)r會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)流失到上清液中,反而造成蛋白質(zhì)損失[20],從而降低得率。綜合考慮,提取鷹嘴豆蛋白質(zhì)的最佳液料比為12∶1 mL/g。

圖2 液料比對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響Fig.2 Effect of ratio of water to material on the yield of Chickpea protein

2.2.2 堿溶pH對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響 由圖3可見,隨著pH的升高,蛋白質(zhì)得率逐漸提高,由10.34%一直上升到了12.48%,在堿溶pH為10時(shí)達(dá)到峰值。但堿溶pH大于10時(shí),蛋白質(zhì)得率急劇下降,這符合一般植物蛋白在不同pH下的溶解規(guī)律。隨著堿溶pH的升高,有利于蛋白質(zhì)在堿性條件下溶解,從而得率升高;但是過高的pH會(huì)使蛋白質(zhì)對(duì)水的親和性增加,從而一部分非水溶性蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)樗苄缘鞍?同時(shí),過高的pH改變了蛋白質(zhì)分子表面的帶電荷狀況,引起脫羧、脫氨、胱賴反應(yīng)、肽鍵斷裂等[24],在兩個(gè)因素的綜合作用下導(dǎo)致了高pH下蛋白質(zhì)得率急劇降低。所以最佳堿溶pH為10.0。

圖3 堿溶pH對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響Fig.3 Alkali soluble pH value on yield of Chickpea protein

2.2.3 堿溶溫度對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響 由圖4可知,鷹嘴豆蛋白的得率在堿溶溫度較低時(shí)隨溫度的升高而增大,20～30 ℃得率升高明顯,由10.22%上升到了11.89%,在40 ℃時(shí)得率達(dá)到最高,為12.04%。繼續(xù)升高溫度時(shí),蛋白得率反而下降,在60 ℃時(shí)降到了9.04%。得率升高是由于溫度增加,蛋白質(zhì)的分子構(gòu)象輕微改變,分子的立體結(jié)構(gòu)伸展,有利于蛋白質(zhì)分子和水分子的運(yùn)動(dòng)及其相互作用,溫度起到增溶作用[25]。蛋白質(zhì)得率從40 ℃后開始下降,這是因?yàn)樗肿拥臒徇\(yùn)動(dòng)加劇使得蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)展開,維持蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的次級(jí)鍵被破壞,非極性基團(tuán)的暴露,導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子間發(fā)生聚集和沉淀,造成了得率降低[26]。因此確定最佳堿溶溫度為40 ℃。

圖4 堿溶溫度對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響Fig.4 Alkali soluble temperature on yield of Chickpea protein

2.2.4 堿溶時(shí)間對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響 由圖5可知,在其它條件相同的情況下,蛋白質(zhì)溶解度會(huì)隨著時(shí)間延長略有增加,堿溶時(shí)間從30 min增加到90 min,得率也由9.04%增加到了9.77%。但溶液達(dá)到飽和后,增加堿溶時(shí)間對(duì)蛋白質(zhì)得率的提高并不是很明顯,甚至還略微有所下降,當(dāng)堿溶時(shí)間達(dá)150 min時(shí),得率又降低至9.16%。這是由于溶解一定時(shí)間后,蛋白的溶出達(dá)到飽和,溶出率趨于平衡,若再進(jìn)一步延長堿溶時(shí)間,可能因?yàn)殚L時(shí)間的攪拌導(dǎo)致部分蛋白質(zhì)變性,從而使得率降低，或者是鷹嘴豆淀粉與蛋白質(zhì)發(fā)生結(jié)合,導(dǎo)致蛋白質(zhì)難以溶出[20]。因此,最佳堿溶時(shí)間為得率最高的90 min。

圖5 堿溶時(shí)間對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響Fig.5 Alkali soluble time on yield of Chickpea protein

2.3 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3.1 回歸模型的建立及顯著性檢驗(yàn) 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,由Design-Expert 8.0.6 Trial統(tǒng)計(jì)分析軟件設(shè)計(jì)出的試驗(yàn)方案及結(jié)果見表2。以鷹嘴豆蛋白得率為響應(yīng)值,以堿溶pH(A)、液料比(B)、堿溶時(shí)間(C)為自變量,建立三因素三水平中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì),共包括17個(gè)試驗(yàn)方案。

對(duì)表2試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多元回歸擬合,得鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率對(duì)pH(A)、液料比(B)和提取時(shí)間(C)的二次多項(xiàng)式回歸模型為:

表2 響應(yīng)面試驗(yàn)方案及結(jié)果Table 2 Experimental design and results for response surface experiment

Y=-49.32175+12.57250A+1.08912B-0.14126C+0.24875AB+9.91667×10-3AC+3.33333×10-4BC-0.83600A2-0.15087B2+2.46111×10-4C2

從表3可知,以蛋白質(zhì)得率為響應(yīng)值時(shí),模型p<0.0001,表明該二次方程模型極顯著。同時(shí)失擬項(xiàng)p=0.0611>0.05,失擬項(xiàng)不顯著,說明所得方程與實(shí)際擬合中非正常誤差所占比例小,可用該回歸方程代替實(shí)驗(yàn)真實(shí)點(diǎn)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析[27]。其方程的決定系數(shù)R2=0.9927,表明有99.27%的數(shù)據(jù)可用此方程解釋。本實(shí)驗(yàn)的CV值為0.72%,說明其置信度較高,模型方程能夠較好地反映真實(shí)的試驗(yàn)值,可用此模型分析響應(yīng)值的變化[28-29]。由表4還可以看出,A、C、AB、AC、A2、B2、C2對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響極顯著(p<0.01),B、BC對(duì)鷹嘴豆蛋白質(zhì)得率的影響不顯著(p>0.05)。影響蛋白質(zhì)得率的主次因素依次為A>C>B,即堿溶pH>堿溶時(shí)間>液料比。

表3 回歸模型及方差分析Table 3 Analysis of variance of regression model

2.3.2 響應(yīng)曲面分析 由圖6a可知,堿溶時(shí)間為90 min時(shí),隨著堿溶pH的升高,在低液料比下,蛋白質(zhì)得率呈增大趨勢(shì),但在高液料比下,蛋白質(zhì)得率卻呈現(xiàn)出下降趨勢(shì),這與液料比與pH之間負(fù)交互作用高度顯著有關(guān)。由圖6b可以看出,液料比為12∶1 mL/g,在堿溶時(shí)間為較低水平時(shí),蛋白質(zhì)得率隨著pH升高呈先升高后降低趨勢(shì)。

圖6 兩因素及其交互作用響應(yīng)面圖和等高線圖Fig.6 Response surface and contour plots showing the effects of threeprocess parameters on the extraction rate of chickpea protein注：固定水平:堿溶pH10,液料比12∶1 mL/g,堿溶時(shí)間90 min。

2.3.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 通過軟件分析計(jì)算得出理論最佳提取工藝:堿溶pH10.02,液料比12.00∶1 mL/g和堿溶時(shí)間120.00 min,鷹嘴豆蛋白理論得率可達(dá)12.97%。進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)時(shí)，為方便實(shí)際操作將堿溶pH定為10,其余條件不變,對(duì)優(yōu)化參數(shù)進(jìn)行3次平行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),得鷹嘴豆蛋白平均得率為12.66±0.14%,與理論值相差2.39%，誤差較小說明實(shí)驗(yàn)可行。

2.4 與已知優(yōu)化方法的比較

周麗卿等[20]對(duì)新疆鷹嘴豆進(jìn)行過蛋白質(zhì)提取條件的優(yōu)化,與本優(yōu)化條件差異明顯。本優(yōu)化條件中的液料比和堿溶pH分別為12.00∶1 mL/g與10.00,相較于參考方法中的17.70∶1 mL/g與11.00明顯降低;而本優(yōu)化條件中的堿溶溫度和堿溶時(shí)間分別為40 ℃與120.00 min,則顯著高于參考方法中的20 ℃與88.40 min。所以,本研究參考周麗卿等的最佳優(yōu)化參數(shù)對(duì)云南卡布里鷹嘴豆進(jìn)行了三次蛋白質(zhì)提取的重復(fù)實(shí)驗(yàn),同時(shí)將冷凍干燥得到的蛋白晶體研磨成粉后，測(cè)定了蛋白粉中的粗蛋白含量來驗(yàn)證其純度,就蛋白質(zhì)得率與蛋白粉純度與本研究中的優(yōu)化方法進(jìn)行比較,結(jié)果如表5所示。

表5 蛋白質(zhì)得率與蛋白粉純度比較Table 5 Comparison of yield and purity of protein powder in different optimization parameters

如表5所示,僅從蛋白質(zhì)得率來看,本法的得率(12.66%±0.14%)要低于參考方法(14.64%±0.30%),差異極顯著(p=0.003<0.01)。但是從所得到蛋白粉的純度來看,經(jīng)本法所提取的云南卡布里鷹嘴豆蛋白粉純度(77.82%±0.53%)高于按照參考方法所提的蛋白質(zhì)純度(69.86%±1.57%),差異極顯著(p=0.007<0.01)。

用本優(yōu)化條件與周麗卿等人報(bào)道的方法[20]相比較,發(fā)現(xiàn)兩地的鷹嘴豆蛋白質(zhì)等電點(diǎn)并不相同,這可能是由于選擇鷹嘴豆的來源不同,周麗卿等用的是來自新疆的鷹嘴豆,而本研究中的鷹嘴豆來源于云南文山州,兩地土壤、光照等生長條件的不同可能導(dǎo)致鷹嘴豆籽粒中蛋白質(zhì)類型的不同,最終造成兩地鷹嘴豆蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的不同。采用本法提取鷹嘴豆蛋白,其得率略低于參考方法,但本方法得到的蛋白質(zhì)純度卻顯著高于參考方法所得的蛋白質(zhì)純度。本法與參考方法相比,所用的酸沉pH較高,本法為4.9,參考方法為4.3。在酸沉過程中不可避免地會(huì)引入少量淀粉等雜質(zhì)。不同的酸沉pH使沉淀過程中引入雜質(zhì)的量不同。而本法所用的最佳堿溶pH較低,只有10,而參考方法中所用的堿溶pH達(dá)到了11。過高的pH條件會(huì)引起蛋白質(zhì)的變性。這可能是導(dǎo)致本法蛋白質(zhì)得率略低但是所提蛋白粉純度較高的原因。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)確定了云南文山的卡布里品種鷹嘴豆總蛋白的等電點(diǎn)為4.9,可以為進(jìn)一步測(cè)定云南卡布里品種鷹嘴豆中清蛋白和球蛋白的等電點(diǎn)提供依據(jù)。并通過Box-Behnken設(shè)計(jì),建立了堿溶酸沉法云南卡布里鷹嘴豆蛋白提取工藝參數(shù)的二次多項(xiàng)式數(shù)學(xué)模型,經(jīng)檢驗(yàn)該模型是合理可靠的,能夠比較準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)鷹嘴豆蛋白的得率。堿溶酸沉法工藝參數(shù)中堿溶pH、堿溶時(shí)間對(duì)鷹嘴豆蛋白得率有極顯著影響(p<0.01),各因素影響主次順序?yàn)閴A溶pH>堿溶時(shí)間>液料比。完成了對(duì)堿溶酸沉法條件的優(yōu)化,確定了最佳工藝為40 ℃條件下液料比12∶1 mL/g、堿溶pH10、堿溶時(shí)間120 min,此時(shí)蛋白得率可達(dá)12.66%±0.14%，與理論值相差2.39%。

本文所得到的工藝參數(shù)具有針對(duì)性,既可以充分提取云南卡布里鷹嘴豆中的蛋白質(zhì),又可以得到較高純度的蛋白粉,并用于鷹嘴豆蛋白質(zhì)的進(jìn)一步研究,如功能肽的提取等;也可以用于食用蛋白粉的工業(yè)化生產(chǎn),產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益,有助于推廣鷹嘴豆在云南地區(qū)進(jìn)一步種植。