珍珠透骨草藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

楊瑞虹，王知平，李 梅，郭愛華，徐變珍，徐麗萍

(山西衛(wèi)生健康職業(yè)學(xué)院，山西 太原 030012)

珍珠透骨草，別名透骨草、山花椒(山西臨汾)，為大戟科植物地構(gòu)葉Speranskia tuberculata (Bge.)Baill.的干燥全草。始載于《本草原始》，現(xiàn)收錄于1987年版《山西省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》(簡(jiǎn)稱《山西87》)[1]和《中國藥典2010版》(一部)[2]的附錄中。珍珠透骨草為山西習(xí)用藥材，能夠祛風(fēng)除濕，活血止痛。用于風(fēng)濕痹痛，筋骨攣縮，寒濕腳氣，瘡癬腫毒。但在《山西87》中的標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)單，僅有性狀描述，為完善該藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，本研究對(duì)薄層鑒別條件、浸出物測(cè)定、水分測(cè)定、總灰分和酸不溶性灰分測(cè)定等做了較系統(tǒng)的研究，制定了該藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 儀器與試藥

FA1104-型電子分析天平(上海精科)，SX-25-10型箱式電阻爐(浙江省嘉興市新騰電器制造廠)，202-Ο型臺(tái)式干燥箱(北京市永光明醫(yī)療儀器廠)，P-薄層色譜展開缸(上海信誼儀器廠)，W-5微量進(jìn)樣器(寧波市鎮(zhèn)海三愛儀器廠)，DZKW電子恒溫水浴鍋(北京市永光明醫(yī)療儀器廠)，硅膠G預(yù)制薄層板(青島海洋化工集團(tuán))，木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所 批號(hào)：111520200504)，化學(xué)試劑均為分析純，水為純凈水。

實(shí)驗(yàn)用樣品共11批(樣品批號(hào)及產(chǎn)地、購地及批號(hào)，見表1)，經(jīng)省藥檢所專家高天愛主任藥師鑒定，均系大戟科植物地構(gòu)葉Speranskia tuberculata (Bge.)Baill.的干燥飲片或藥材。

表1 實(shí)驗(yàn)用珍珠透骨草樣品

注：20111006號(hào)樣品系采自太原南郊的新鮮全草，經(jīng)高天愛老師鑒定，品種準(zhǔn)確，特作為對(duì)照藥材使用。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層色譜鑒定

2.1.1 供試品溶液的制備 稱取藥材粉末2 g ，95%乙醇30mL超聲提取30 min，濾過，濾液減壓回收溶劑至干，殘留物加蒸餾水10 mL，用石油醚(30～60℃)10 mL振搖萃取脫色，水層溶液用正丁醇萃取(10 mL×3次)，合并正丁醇萃取液，減壓回收溶劑至干，殘留物用2 mL乙醇溶解，作為供試品溶液。

2.1.2 對(duì)照藥材溶液的制備 依2.1.1項(xiàng)下方法，制成對(duì)照藥材溶液。

2.1.3 薄層鑒別 分別吸取20111001～20111005批號(hào)和20111007～201110011批號(hào)的樣品溶液及對(duì)照藥材溶液各5μL，點(diǎn)于硅膠G薄層板和默克硅膠G板上，用10 mL甲苯-乙酸丁酯-甲酸(3.5∶1.2∶1.5 上層液)展開劑展開約8 cm，取出，晾干，噴以10%H2SO4乙醇溶液，105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置于365 nm紫外分析儀下觀察，對(duì)照品藥材與供試藥材在相同的位置上均出現(xiàn)相同的斑點(diǎn)。見圖1和圖2。

2.2 醇浸出物測(cè)定

2.2.1 測(cè)定方法 綜合考慮藥材主要成分的溶解性及浸出效果，以薄層色譜行為為指標(biāo)，對(duì)浸出溶劑和浸出方法及時(shí)間進(jìn)行了考察，選定以75%乙醇作為提取溶劑，加熱回流提取30 min制備浸出物測(cè)定的樣品溶液。按照《中國藥典》2010版一部附錄ⅩA 的測(cè)定方法測(cè)定。

2.2.2 測(cè)定結(jié)果 11個(gè)批次不同產(chǎn)地珍珠透骨草藥材醇溶性浸出物測(cè)定結(jié)果。見表2。

圖1珍珠透骨草樣品在默克硅膠G板上的展開圖譜

Fig1ExpansionMapofExtractivesofSperanskia
Tuberculata(Bge.)BaillonMerckSiliconeGBoard

圖2 珍珠透骨草樣品在自制硅膠G板上的展開圖譜

(注：圖1和圖2中，1～11依次為20111001～201110011批號(hào)的樣品溶液，其中6為對(duì)照藥材溶液)

表2 珍珠透骨草浸出物測(cè)定結(jié)果

2.3 水分、總灰分、酸不溶性灰分的測(cè)定

2.3.1 測(cè)定方法 水分測(cè)定按照《中國藥典》2010版一部附錄Ⅸ H第一法測(cè)定11批藥材的水分。總灰分、酸不溶性灰分測(cè)定按照《中國藥典》2010年版一部(附錄Ⅸ K)中總灰分、酸不溶性灰分測(cè)定法測(cè)定樣品11批藥材的總灰分、酸不溶性灰分。

2.3.2 測(cè)定結(jié)果 11個(gè)批次不同產(chǎn)地珍珠透骨草藥材水分測(cè)定值、總灰分測(cè)定值及酸不溶性灰分測(cè)定值。見表3。

表3 珍珠透骨草水分、總灰分、酸不溶性灰分測(cè)定結(jié)果±s)

2.4 性狀和顯微鑒別

本研究利用性狀鑒別和顯微鑒別兩種方法對(duì)珍珠透骨草的生藥學(xué)特征進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，珍珠透骨草藥材性狀、葉橫切面、葉表皮撕片、藥材粉末特征均具有形態(tài)學(xué)規(guī)律，對(duì)其生藥鑒定有實(shí)際意義[3]。

3 討論

根據(jù)11個(gè)批次不同產(chǎn)地珍珠透骨草藥材測(cè)定值，在去掉異常值后，在最高值基礎(chǔ)上，上浮10%作為測(cè)定上限，故暫定珍珠透骨草藥材水分限度為不得過8.0%、總灰分限度為不得過15.0%，酸不溶性灰分不得過3.0%。

醇溶性浸出物測(cè)定中去掉異常值后，以最低值下浮20%設(shè)為浸出物測(cè)定下限，故暫定醇溶性浸出物不得少于8.5%。

范云柏等[4]從該植物中曾分離得到6個(gè)黃酮類化合物，分別是香葉木素、木犀草素、5,7,4′-三羥基二氫黃酮-7-O-β-D-(4〞﹣對(duì)香豆酰) - 吡喃葡萄糖苷、5,7,4′-三羥基二氫黃酮-7-O-β-D-(3〞﹣對(duì)香豆酰)- 吡喃葡萄糖苷、穗花衫雙黃酮、木犀草素-7-O-蕓香糖苷。以木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照，與藥材供試液及加了木犀草素標(biāo)準(zhǔn)品的藥材供試液共薄層，可能由于藥材中木犀草素含量較低，薄層色譜結(jié)果顯示，在與對(duì)照品相應(yīng)位置，藥材供試液未見該成分的斑點(diǎn)。本研究參考相關(guān)文獻(xiàn)資料[5-10]，采用自采并經(jīng)鑒定后的藥材作對(duì)照，進(jìn)行薄層色譜等研究，薄層色譜展開系統(tǒng)分離效果好，斑點(diǎn)清晰，不拖尾，方法耐用性好。 本文制定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)單、易于操作，可用于珍珠透骨草采購及生產(chǎn)中的快速檢驗(yàn)，為該藥材GAP規(guī)范化種植、品質(zhì)優(yōu)劣確定、真?zhèn)舞b別、質(zhì)量控制等奠定了重要基礎(chǔ)。