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    補(bǔ)腎培元膠囊對(duì)慢性阻塞性肺疾病腎陽(yáng)虛證炎癥因子及熱休克蛋白水平的影響

    2018-09-17 09:35:48戴勇曾崎岡段晨霞
    關(guān)鍵詞:炎癥因子慢性阻塞性肺疾病

    戴勇 曾崎岡 段晨霞

    [摘要] 目的 研究補(bǔ)腎培元膠囊對(duì)慢性阻塞性肺疾病腎陽(yáng)虛證患者炎癥因子及熱休克蛋白水平的影響。 方法 選擇2017年1~12月于廣東省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院呼吸內(nèi)科門診確診并治療的慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期60例為研究對(duì)象,根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組和對(duì)照組,每組30例。對(duì)照組采用噻托溴銨粉吸入劑維持治療,治療組則聯(lián)合補(bǔ)腎培元膠囊口服治療。觀察兩組治療效果,并采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)檢測(cè)血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)和白介素-8(IL-8)水平,采用雙抗夾心酶免法測(cè)定血清中熱休克蛋白70(HSP70)的表達(dá)水平。 結(jié)果 治療組臨床總有效率(93.3%)明顯高于對(duì)照組(76.7%)(P < 0.05)。兩組患者治療后TNF-α、IL-4和IL-8的表達(dá)均顯著低于治療前(P < 0.05),但治療組炎癥因子表達(dá)水平下降更為明顯(P < 0.05);治療組HSP70水平與治療前比較有顯著上升(P < 0.05),而對(duì)照組HSP70無(wú)明顯改善(P > 0.05)。 結(jié)論 在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上聯(lián)用補(bǔ)腎培元膠囊治療慢性阻塞性肺疾病腎陽(yáng)虛證患者臨床效果顯著,可明顯減輕患者炎性反應(yīng),同時(shí)提高熱休克蛋白表達(dá)水平,從而對(duì)細(xì)胞起一定的保護(hù)作用。

    [關(guān)鍵詞] 補(bǔ)腎培元膠囊;炎癥因子;熱休克蛋白70;慢性阻塞性肺疾病

    [中圖分類號(hào)] R285.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210(2018)08(c)-0133-05

    [Abstract] Objective To study the effect of Bushen Peiyuan Capsules on the levels of inflammatory factors and heat shock protein in chronic obstructive pulmonary disease patients with syndrome of deficiency of kidney yang. Methods Sixty patients with stable chronic obstructive pulmonary disease diagnosed and treated in Guangdong Integrated Traditional Chinese and Western Medicine Hospital from January to December 2017 were selected as research objects. The patients were divided into two groups according to the random number table, with 30 cases in each group. The control group was given Tiotropium Bromide Powder Inhalation to maintain treatment, while the treatment group was added with Bushen Peiyuan Capsules orally. The therapeutic effect between the two groups was observed. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to determine the serum levels of tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-4 (IL-4) and interleukin-8 (IL-8). The expression levels of serum heat shock protein-70 (HSP70) were determined by double-antibody sandwich enzyme immunoassay. Results The total effective rate in the treatment group (93.3%) was significantly higher than that in the control group (76.7%) (P < 0.05). After treatment, the expression levels of TNF-α, IL-4 and IL-8 in the two groups were significantly lower than those before treatment (P < 0.05), but the expression levels of inflammatory factors in the treatment group were decreased more significantly (P < 0.05). After treatment, the HSP70 level in the treatment group was significantly higher than that before treatment (P < 0.05), while the control group had no significant improvement (P > 0.05). Conclusion On basis of conventional treatment, Bushen Peiyuan Capsules in the treatment of chronic obstructive pulmonary disease patients with syndrome of deficiency of kidney yang has a significant clinical effect, which can reduce the inflammatory response, improve the expression of heat shock protein, thus protecting the cells from being damaged.

    [Key words] Bushen Peiyuan Capsules; Inflammatory factors; Heat shock protein 70; Chronic obstructive pulmonary disease

    慢性阻塞性肺疾病(COPD)是預(yù)后較差的慢性呼吸系統(tǒng)疾病,氣流受限不可逆性改變,其發(fā)病率高,且病死率也逐年上升,慢性氣道炎癥性刺激及病理改變是疾病重要的特點(diǎn)之一[1]。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)[2],慢性炎癥刺激氣道是COPD病情反復(fù)的主因,熱休克蛋白(heat shock proteins)作為特異性啟動(dòng)子,可特異性與DNA片段-熱休克素復(fù)合體結(jié)合,促進(jìn)其胞內(nèi)表達(dá),調(diào)控炎癥因子的釋放,但當(dāng)炎性反應(yīng)降低時(shí),熱休克蛋表達(dá)水平也隨之下降[3]。因此,腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)、白介素-8(IL-8)和熱休克蛋白70(HSP70)表達(dá)的差異與COPD病情進(jìn)展及演變具有密切關(guān)系。

    腎陽(yáng)虛證是COPD穩(wěn)定期患者主要的中醫(yī)證型[4],補(bǔ)腎培元膠囊是廣東省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院(以下簡(jiǎn)稱“我院”)呼吸內(nèi)科全國(guó)名老中醫(yī)老昌輝教授治療COPD腎陽(yáng)虛證的臨床經(jīng)驗(yàn)方,具有抗炎平喘、止咳化痰之功,臨床療效確切[5]。本研究在臨床有效性的基礎(chǔ)上進(jìn)一步探究補(bǔ)腎培元膠囊是否通過(guò)影響COPD炎癥因子及熱休克蛋白表達(dá)水平來(lái)發(fā)揮其臨床療效。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選擇2017年1~12月在我院呼吸內(nèi)科門診就診的COPD穩(wěn)定期腎陽(yáng)虛證患者共60例,根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組和對(duì)照組,每組30例。治療組中男27例,女3例;年齡(60.07±7.20)歲;病程(6.87±3.32)年;身高(162.23±6.46)cm;體重(53.34±10.06)kg。對(duì)照組中男25例,女5例;年齡(60.27±5.95)歲;病程(9.55±4.13)年;身高(168.48±6.08)cm;體重(55.37±7.31)kg。兩組患者一般資料比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05),具有可比性。

    1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

    1.2.1 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) 符合2017年GOLD指南[6]以及《慢性阻塞性肺疾病診治指南(2013年修訂版)》[1]中相關(guān)描述的Ⅱ~Ⅲ級(jí)患者。

    1.2.2 中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) 中醫(yī)病證、證候診斷標(biāo)準(zhǔn)均參照《中醫(yī)內(nèi)科常見(jiàn)病診療指南》[7]中相關(guān)內(nèi)容以及腎陽(yáng)虛證特點(diǎn)進(jìn)行診斷。

    1.3 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

    1.3.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合中醫(yī)病癥、證候標(biāo)準(zhǔn),且符合西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn);②年齡18~70歲,男女均可;③無(wú)相關(guān)藥物治療禁忌證;④患者依從性較好,能夠配合完成各項(xiàng)檢查;⑤簽署參與研究知情同意書。

    1.3.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①參與其他藥物臨床試驗(yàn)結(jié)束未超過(guò)3個(gè)月;②存在活動(dòng)性肺結(jié)核或其他急慢性傳染病患者;③惡性腫瘤患者;④患有其他嚴(yán)重疾病需要同時(shí)治療者,或血肌酐、谷丙或谷草轉(zhuǎn)氨酶超過(guò)正常上限的1.5倍;⑤育齡期婦女及近期有懷孕計(jì)劃者。

    1.4 治療方法

    對(duì)照組給予《慢性阻塞性肺疾病診治指南(2013年修訂版)》[1]中西醫(yī)常規(guī)治療:維持使用噻托溴銨粉吸入劑(勃林格殷格翰公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào):H20100194),每次應(yīng)用HandiHaler(藥粉吸入器)吸入裝置吸入1粒膠囊,1次/d。治療組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上服用我院呼吸內(nèi)科專科制劑補(bǔ)腎培元膠囊(規(guī)格:400 mg/粒,36粒/瓶,生產(chǎn)批號(hào):粵Z20070308),3粒/次,3次/d。兩組療程均為3個(gè)月。

    1.5 觀察指標(biāo)

    觀察兩組治療后臨床療效,分析其變化特點(diǎn)。療效評(píng)價(jià)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[8]中有關(guān)定義進(jìn)行分析評(píng)價(jià)。臨床控制:咳嗽等癥狀消失,肺部體征消失,實(shí)驗(yàn)室檢查正常;顯效:咳嗽等癥狀明顯好轉(zhuǎn),肺部體征顯著減輕,實(shí)驗(yàn)室檢查有明顯改善;有效:咳嗽等癥狀好轉(zhuǎn),肺部體征減少;無(wú)效:咳嗽等癥狀、肺部體征及實(shí)驗(yàn)室檢查與治療前比較無(wú)改善??傆行?臨床控制+顯效+有效。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法測(cè)定炎癥因子(TNF-α、IL-4、IL-8)變化水平。所有受試者晨起空腹時(shí)抽取肘部靜脈血,采血量5~6 mL,采血后迅速放置于25℃、半徑15 cm、3000 r/min、相對(duì)離心力400 g的離心機(jī)內(nèi)離心約10 min,取出離心后樣本,分離上層血清,安置于-80℃冰箱冷凍保存待檢。TNF-α、IL-4和IL-8的ELISA試劑盒均購(gòu)自南京建成生物科技有限公司。研究中所采用檢測(cè)儀器為美國(guó)BIO-RAD680型酶標(biāo)儀,并嚴(yán)格按說(shuō)明書操作。采用雙抗夾心酶免法測(cè)定血清中HSP70的濃度,血清HSP70檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海銳聰科技發(fā)展有限公司,其操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    運(yùn)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)最終研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,兩組比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料均采用χ2檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組臨床療效比較

    治療組總有效率明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。見(jiàn)表1。

    2.2 兩組治療前后炎癥因子變化比較

    治療前兩組炎癥因子表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05)。治療后兩組TNF-α、IL-4和IL-8表達(dá)均低于治療前(P < 0.05),進(jìn)一步行組間比較后發(fā)現(xiàn),治療組炎癥因子水平明顯低于對(duì)照組(P < 0.05)。見(jiàn)表2。

    2.3 兩組治療前后熱休克蛋白70水平比較

    兩組治療前HSP70水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05)。對(duì)照組治療后HSP70表達(dá)有下降趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05),治療后治療組HSP70表達(dá)顯著高于治療前,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.01)。治療后治療組HSP70表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P < 0.05)。見(jiàn)表3。

    3 討論

    COPD病情進(jìn)展主要由于氣道內(nèi)炎性反應(yīng)釋放大量炎癥細(xì)胞、介質(zhì)等,破壞氣管結(jié)構(gòu),從而產(chǎn)生氣道重塑、受限等一系列病理改變[9]。目前常用的COPD穩(wěn)定期治療方案以吸入性ICS/LABA為主,或聯(lián)合LAMA進(jìn)行多重聯(lián)合藥物治療,但該療法在穩(wěn)定期COPD的應(yīng)用也備受爭(zhēng)議,因長(zhǎng)期吸入糖皮質(zhì)激素等的安全性尚無(wú)明顯評(píng)價(jià)[10],部分研究結(jié)果甚至發(fā)現(xiàn)其可能導(dǎo)致合并肺炎發(fā)生率和病死率升高[11],尤其目前的吸入療法無(wú)法明確改善并修復(fù)已破壞的氣道結(jié)構(gòu)及作用,且吸入劑中的氣霧劑顆粒過(guò)大,無(wú)法覆蓋并沉積于部分細(xì)小氣道,因而其療效作用局限性較大,而中醫(yī)藥治療COPD效果可靠,副作用少,機(jī)體耐受性良好,也不存在以上弊端,故而具有良好的發(fā)展前景[12]。我國(guó)COPD指南也肯定了中醫(yī)藥療法對(duì)COPD患者痰量減少、痰液稀釋以及提高機(jī)體自身抵抗力等方面的確切療效[1]。近來(lái)研究也發(fā)現(xiàn),經(jīng)中醫(yī)藥治療后,穩(wěn)定期COPD患者的肺功能指標(biāo)如第1秒用力呼氣量(FEV1)雖未見(jiàn)明顯改善,但患者臨床癥狀有顯著緩解,急性加重次數(shù)明顯下降[13]。有系統(tǒng)評(píng)價(jià)研究指出[14]:中醫(yī)藥治療對(duì)COPD患者咳、痰、喘證候改善較好,可顯著提升生活質(zhì)量,并且安全性佳。

    COPD歸屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)“咳嗽”“喘證”“肺脹”等范疇。本病緣由乃因肺腎虧損,日久而精氣衰竭,是所謂“精氣奪則虛”,正虛而氣衰,此氣之衰,不僅涉及肺臟,且易波及腎氣,肺氣虛則衛(wèi)外不固,腎氣虛則動(dòng)則喘促,肺腎金水相生,母病及子,子病及母,久而肺腎兩臟均見(jiàn)衰弱,是所謂“久病必虛”,故而腎陽(yáng)虛證是本病穩(wěn)定期的主要證型之一。目前國(guó)內(nèi)COPD穩(wěn)定期中醫(yī)證型分析結(jié)論多認(rèn)為腎陽(yáng)虛為COPD穩(wěn)定期患者主要中醫(yī)證型[15],尤其腎陽(yáng)虛患者其肺功能表現(xiàn)氣道阻塞情況更為嚴(yán)重[16-19],因而補(bǔ)腎溫陽(yáng)貫穿本病治療始終[20]。文獻(xiàn)報(bào)道補(bǔ)腎培元膠囊治療本病可降低氣道炎性反應(yīng),改善臨床癥狀,減少疾病急性加重住院次數(shù)[5,21]。補(bǔ)腎培元膠囊是由全國(guó)名老中醫(yī)老昌輝教授經(jīng)驗(yàn)方化裁而來(lái),可顯著減少患者住院率,改善生活質(zhì)量,減輕咳嗽、咳痰、痰黏等癥[21]。方以熟地、肉蓯蓉滋腎壯陽(yáng)益精,實(shí)乃益腎填精之要藥,兩藥合用為老昌輝教授慣用之藥對(duì),用以陽(yáng)病治陰,臨床中能起攝斂固本之效,故能收斂宣散之肺氣;核桃仁補(bǔ)腎固本之余,兼以潤(rùn)腸,通腑而使邪有出路,亦應(yīng)“肺與大腸相表里”之意;黨參,補(bǔ)中益氣極佳,且益胃而生津,潤(rùn)肺祛痰而不斂邪,與甘草配伍,取方四君子湯之意,功在健脾和中。補(bǔ)腎培元一方,以溫潤(rùn)納氣、化痰通腑而求固本培元,主要針對(duì)“痰”“氣”“虛”交阻之病因病機(jī),務(wù)求化痰之時(shí)輔以降氣,使生氣得沉降而歸于腎,而降氣化痰之余又時(shí)刻顧護(hù)腎中真陰真陽(yáng),扶正補(bǔ)虛以固本,其治法治則切中病理要害。臨床運(yùn)用此方治療COPD腎陽(yáng)虛證正是方證對(duì)應(yīng),效若桴鼓?,F(xiàn)代藥理研究[10-11]也證實(shí)補(bǔ)腎培元膠囊組方中藥物有效成分對(duì)于支氣管痙攣的緩解、咳嗽反射的抑制以及氣管內(nèi)分泌物的減少等有明確的藥理作用,從而部分程度逆轉(zhuǎn)氣道狹窄、減少痰液分泌起到臨床治療作用。

    COPD穩(wěn)定期患者氣道內(nèi)炎癥改變主要是由于炎癥細(xì)胞激活并釋放炎性介質(zhì),如IL-8、TNF-α等,破壞肺及氣道的結(jié)構(gòu),加劇局部炎性反應(yīng),最終導(dǎo)致肺功能進(jìn)行性下降,往往造成患者反復(fù)感染[20-23]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),采用常規(guī)治療聯(lián)合補(bǔ)腎培元膠囊治療后,臨床總有效率優(yōu)于單純西醫(yī)治療,且補(bǔ)腎培元膠囊聯(lián)合治療后,TNF-α、IL-4和IL-8水平下降幅度要明顯低于對(duì)照組,提示采用補(bǔ)腎培元膠囊聯(lián)合治療COPD穩(wěn)定期患者能明顯降低患者炎癥因子表達(dá),從而抑制炎癥因子對(duì)氣道及肺組織的破壞。目前西醫(yī)常規(guī)治療方案均以改善生活質(zhì)量、減少病情進(jìn)展為目的,對(duì)于肺功能的改變尚無(wú)有效報(bào)道,而中醫(yī)中藥著眼于全身系統(tǒng)性調(diào)節(jié),在針對(duì)病因病機(jī)的基礎(chǔ)上,辨證遣方組藥,不僅不存在藥物長(zhǎng)期使用的耐藥性、變異性及副作用等弊端,還注重了標(biāo)本兼治的特點(diǎn),既能有效地針對(duì)COPD腎陽(yáng)虛證進(jìn)行辨證調(diào)理,同時(shí)能一定程度上改善肺功能,提高生活質(zhì)量。目前許多現(xiàn)代研究也發(fā)現(xiàn),補(bǔ)腎培元方中藥物有效成分對(duì)白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子等炎性介質(zhì)具有明顯抑制作用,與本研究結(jié)論一致[24]。

    HSP70是較為經(jīng)典的分子伴侶之一,在細(xì)胞發(fā)育、應(yīng)激保護(hù)等多方面均發(fā)揮了重要作用[25-27],同時(shí)HSP70也參與了調(diào)節(jié)COPD患者氣道黏蛋白高分泌的過(guò)程,與COPD患者痰液分泌增多、痰質(zhì)黏稠與否密切相關(guān)[28-29],因此干預(yù)HSP70在COPD氣道黏液分泌反應(yīng)中的作用將為COPD患者咳痰量多質(zhì)黏等癥狀改善提供新的治療方向?!罢摗倍嘀笝C(jī)體免疫狀況低下,抗病能力較弱,而HSP70作用以保護(hù)性作用為主,應(yīng)屬于“正氣”范疇,故而藥物如能促進(jìn)HSP70的表達(dá),即可能對(duì)機(jī)體產(chǎn)生“扶正”作用。本研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)過(guò)補(bǔ)腎培元膠囊干預(yù)治療后,患者HSP70表達(dá)亦顯著高于治療前,提示補(bǔ)腎培元膠囊可影響HSP70表達(dá)水平,減少痰液分泌,保護(hù)氣道及肺組織內(nèi)細(xì)胞,起到“扶正”這一重要作用。

    綜上所述,補(bǔ)腎培元膠囊以溫陽(yáng)補(bǔ)腎固本為主,組方新穎,臨床療效確切可靠,市場(chǎng)前景廣闊,本研究進(jìn)一步驗(yàn)證了補(bǔ)腎培元膠囊發(fā)揮其臨床療效的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和科學(xué)依據(jù),今后仍有待挖掘出更深層次的療效關(guān)系,并進(jìn)一步深入探討其療效作用機(jī)制。

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    (收稿日期:2018-05-09 本文編輯:張瑜杰)

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