• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    鮮食糯玉米己醛和己醇的生成與LOX活性及其基因表達(dá)的相關(guān)性

    2018-09-10 10:11:35牛麗影沈凌雁劉春菊李大婧劉春泉肖麗霞
    關(guān)鍵詞:己醛

    牛麗影 沈凌雁 劉春菊 李大婧 劉春泉 肖麗霞

    摘要:為探討生鮮糯玉米汁主要揮發(fā)性成分己醛與己醇的生成與脂氧合酶(LOX)的關(guān)系,對4個(gè)籽粒發(fā)育期的鮮食糯玉米京甜紫花糯2號和蘇玉糯11號生鮮玉米汁中己醛與己醇含量、脂氧合酶活性以及ZmLOX1、Zm-LOX2、ZmLOX3、ZmLOX10基因的相對表達(dá)量進(jìn)行了測定和比較。結(jié)果顯示己醛與己醇含量顯著正相關(guān)(P<0.05),4種LOX基因的表達(dá)量之間顯著正相關(guān)(P<0.05),但LOX活性與其他指標(biāo)之間未表現(xiàn)出顯著的相關(guān)關(guān)系。主成分分析( PCA)結(jié)果顯示所有指標(biāo)聚為3類:4種LOX基因表達(dá)量、己醛與己醇含量、LOX活性,三者之間未表現(xiàn)出顯著的相關(guān)性關(guān)系。

    關(guān)鍵詞:鮮食糯玉米;己醛;脂氧合酶(LOX;基因表達(dá)量

    中圖分類號:S513.01

    文獻(xiàn)標(biāo)識碼: A

    文章編號: 1000-4440(2018)05-1138-06

    糯玉米為起源中國的玉米類型,作為鮮食玉米廣受消費(fèi)者喜愛。鮮食糯玉米蒸煮后散發(fā)的玉米香與類似青葉、青草的清香是其重要特征之一。在鮮食糯玉米揮發(fā)性成分與香氣變化研究中發(fā)現(xiàn),來自脂氧合酶(LOX)途徑的己醛和己醇為生鮮玉米汁揮發(fā)性成分的主要成分,并可能與糯玉米的青香有關(guān)。LOX途徑為LOX啟動的具異戊二烯結(jié)構(gòu)的多元不飽和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)的氧化過程,植物中多以亞油酸和亞麻酸為底物,在LOX作用下生成9-氫過氧化物(9-HPOT)和13-氫過氧化物(13-HPOT),然后由氫過氧化物裂解酶(HPL)作用生成的C6醛和C9醛,并在乙醇脫氫酶(ADH)的作用下生成相應(yīng)的醇。其中C6的醛、醇、酮以及衍生的酯類被稱為青葉揮發(fā)性成分(Green leaf volatile, GLV)。GLV在植物生理研究中被作為抗逆反應(yīng)的標(biāo)志性成分,在番茄、黃瓜或柑橘中為新鮮香氣的表征成分,在豆類、速凍玉米、水稻等谷物中則與油脂氧化味等不良風(fēng)味相關(guān)。

    從基因水平研究LOX途徑及風(fēng)味調(diào)控是近年來的趨勢。LOX是一個(gè)大基因家族,每種植物中都會有多個(gè)LOX同工酶,在番茄、蘋果等植物中只有某特定的LOX同工酶調(diào)控GLV的生成。目前已知玉米中有13種LOX,ZmLOX1基因存在于成熟籽粒中,具有9-LOX和13-LOX的非傳統(tǒng)型雙位點(diǎn)特異性;ZmLOX2基因在玉米生長發(fā)育過程中表達(dá).ZmLOX3存在于玉米植株的根部以及發(fā)育的胚中;ZmLOX10位于葉綠體中,主要調(diào)節(jié)GLV的生成。在對鮮食糯玉米LOX酶特性研究中發(fā)現(xiàn),鮮食糯玉米中至少存在2種LOX同工酶,并且生鮮糯玉米汁的GLV則主要為己醛與己醇。為了在基因表達(dá)水平上探討鮮食糯玉米中GLV生成和香氣變化機(jī)制,本研究對2個(gè)品種4個(gè)發(fā)育期的鮮食糯玉米中己醛和己醇含量、LOX酶活性以及Zm-LOX1、ZmLOX2、ZmLOX3、Zm LOX10的相對基因表達(dá)量之間的相關(guān)性進(jìn)行分析,為鮮食糯玉米香氣的調(diào)控提供理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    糯玉米京甜紫花糯2號(JT)、蘇玉糯11號(SY)均采自江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院六合動物科學(xué)基地試驗(yàn)田。2種糯玉米于授粉后14d、19d、25d、31d進(jìn)行采收,分別對應(yīng)于籽粒建成期、乳熟前期、乳熟后期和蠟熟期,記為JT1—4和SY1~4。采收當(dāng)日手工去除苞葉,分離完整玉米籽粒,液氮速凍后真空包裝,置于-80℃冰箱待用。

    1.2 主要儀器和試劑

    Agilent 7890A/5975C氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀,美國Agilent公司產(chǎn)品;CAR/PDMS/DVB固相微萃取萃取頭,美國supelco公司產(chǎn)品;HP-INNOWAX毛細(xì)管色譜柱,美國Agilent公司產(chǎn)品;熒光定量PCR儀,美國Roche公司產(chǎn)品。Trizol試劑盒,美國Gibco公司產(chǎn)品。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 己醛、己醇含量的測定冷凍玉米粒10g加入40ml 4℃預(yù)冷的蒸餾水,迅速研磨,用5ml水轉(zhuǎn)移至均質(zhì)儀進(jìn)行均質(zhì)后定容到50ml,取5ml于15ml頂空瓶中并加入攪拌子及1.6g NaCl,密封后40℃水浴平衡15min,插入萃取頭(CAR/PDMS/DVB),使之與液面保持1.5cm的距離,加入攪拌子置于磁力攪拌器上,攪拌速度200 r/min,在40℃下萃取15min。色譜條件:色譜柱為HP-INNOWAX(30mx0.32mmx0.25μm)分析柱;升溫程序?yàn)椋浩鸪鯗囟?0℃保持2 min,然后5μ/min升溫至220cC,進(jìn)樣口溫度250℃,解析2min,采用不分流進(jìn)樣;載氣:He。質(zhì)譜條件:離子源溫度230℃,傳輸線溫度為150℃,電離化方式為EI、電子能量70eV,質(zhì)量掃描范圍m/z 30~ 450,掃描速率為5.27scan/s,溶劑延遲l min。定量方法采用外標(biāo)法,首先用色譜純甲醇配置1mg/ml的貯備液,再稀釋為0.2~200.0 mg/L的測定液,建立待測組分標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積與對應(yīng)質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.3.2 LOX活性的測定同牛麗影等的方法 。

    1.3.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR測定LOX基因表達(dá)量使用Trizol試劑盒提取樣品總RNA,用隨機(jī)引物將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDN。反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)條件為25℃10 min,42℃30 min.85℃5 min。根據(jù)基因序列設(shè)計(jì)特異性引物,通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法,采用SYBR GREEN染料法,以GA PDH為內(nèi)參基因,測定LOX基因表達(dá)量,以乳熟期甜玉米晶甜3號為對照。引物序列見表l。PCR反應(yīng)條件為:94℃30s;94℃10s,60℃12s,72℃30s,循環(huán)45次,72℃單點(diǎn)檢測信號。采用2-??法對結(jié)果進(jìn)行相對定量分析。

    1.4 數(shù)據(jù)分析

    采用JMP(JMP 10.0,SAS Institute Inc.)進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)和主成分分析(PCA)。各指標(biāo)重復(fù)測定3次,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用單因素方差分析(ANOVA) Tukey HSD進(jìn)行差異顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同采收期兩種鮮食糯玉米中己醛和己醇含量比較

    4個(gè)采收期兩種鮮食糯玉米京甜紫花糯2號(JT)和蘇玉糯11號(SY)中己醛含量為6.00~59.90μg/kg,己醇含量為0.11~8.29μg/kg。兩種糯玉米的己醛均在籽粒建成期含量最高,在乳熟期含量最低,到蠟熟期略有回升,但蠟熟期蘇玉糯11號的己醛含量與乳熟前期和乳熟后期京甜紫花糯2號差異未達(dá)顯著水平(圖1)。JT的己醇含量隨籽粒發(fā)育期的延長而呈降低趨勢,而SY的己醇含量變化不顯著。

    2.2 兩種鮮食糯玉米脂氧合酶(LOX)活性比較

    LOX活性測定結(jié)果(圖2)顯示,兩種糯玉米京甜紫花糯2號(JT)和蘇玉糯11號(SY) LOX活性均隨籽粒發(fā)育期延長呈現(xiàn)直線上升趨勢(R2=0.980 6、R2= 0.9978),在4個(gè)發(fā)育期兩種玉米的LOX活性并未表現(xiàn)出顯著差異(P>0.05)。

    2.3 兩種鮮食糯玉米ZmLOX1、Zm LOX2、Zm-LOX3、ZmLOX10基因表達(dá)量差異

    京甜紫花糯2號的4種LOX基因表達(dá)量在發(fā)育過程中變化趨勢一致,均為籽粒建成期≤乳熟后期≤乳熟前期<蠟熟期(圖3)。蘇玉糯11號的變化趨勢與京甜紫花糯2號不同,京甜紫花糯2號的4種LOX基因表達(dá)量均為蠟熟期最高,而蘇玉糯11號中ZmLOX3在乳熟后期表達(dá)量最高。另外,蘇玉糯11號ZmLOX1、ZmLOX2、ZmLOX10的表達(dá)量在4個(gè)時(shí)期均等于甚至低于京甜紫花糯2號籽粒建成期的最低值。2種玉米差異較大的為乳熟前期和蠟熟期,乳熟前期京甜紫花糯2號的ZmLOX2和Zm-LOX3基因表達(dá)量分別為蘇玉糯11號的117.25和4.92倍,蠟熟期京甜紫花糯2號的ZmLOX3基因表達(dá)量為蘇玉糯11號的5.54倍。另外,與GLV相關(guān)的ZmLOX10基因表達(dá)量京甜紫花糯2號大于蘇玉糯11號,對應(yīng)4個(gè)發(fā)育期京甜紫花糯2號的基因表達(dá)量分別為蘇玉糯11號的2.56、92.96、10.52和45.15倍。

    2.4玉米己醇和己醛含量與LOX活性、LOX基因表達(dá)量的相關(guān)性分析

    己醛和己醇是生鮮玉米汁中最主要的揮發(fā)性成分。通過調(diào)節(jié)pH以及加熱等方法抑制LOX的活性可以減少二者的生成,說明LOX途徑是二者生成的主要途徑。相關(guān)性分析結(jié)果(表2)顯示,己醛含量與己醇含量之間以及4種LOX基因表達(dá)量之間呈顯著正相關(guān)關(guān)系。己醇含量與己醛含量呈顯著正相關(guān),說明生成的己醛越多,才能生成更多的己醇,但是二者的量與LOX活性、LOX基因表達(dá)量的相關(guān)性不顯著。

    主成分分析(PCA)結(jié)果(圖4)表明,主成分l與主成分2可解釋總方差的87. 0%。從圖4中可以看出己醛與己醇含量、4種ZmLOX基因分別在第1象限和第2象限聚集。而樣品與指標(biāo)在空間上的接近則表明此樣品在此指標(biāo)上具有突出的特征,例如籽粒建成期的京甜紫花糯2號己醛與己醇含量最高,蠟熟期的京甜紫花糯2號ZmLOX基因表達(dá)量最高。

    3 討論

    不同植物的LOX代謝機(jī)制存在差別。本研究中京甜紫花糯2號和蘇玉糯11號2種糯玉米之間也存在顯著差異,例如在乳熟后期京甜紫花糯2號ZmLOX1、ZmLOX2、ZmLOX10基因表達(dá)量均高于蘇玉糯11號,在籽粒建成期和蠟熟期京甜紫花糯2號的己醛和己醇含量也高于蘇玉糯11號。京甜紫花糯2號和蘇玉糯11號糯玉米在發(fā)育過程中GLV的生成量和LOX活性存在顯著變化,但是與LOX基因表達(dá)量隨生長期的變化并不一致,未表現(xiàn)為顯著的相關(guān)性關(guān)系。獼猴桃中隨果實(shí)發(fā)育階段的延長,6種LOX基因表達(dá)量不同.AdLOX1和AdLOX5在成熟期間上調(diào),而AdLOX2、AdLOX3、AdLOX4和AdLOX6則下調(diào)。番茄中TomLOXC基因只有在成熟時(shí)才被檢測到,被認(rèn)為是C6醛醇生成的功能基因。ZmLOX10在玉米植株受到傷害時(shí)表達(dá)量迅速增加,促進(jìn)GLV的產(chǎn)生。但在本研究中,在糯玉米籽粒建成期己醛與己醇含量最高,但籽粒發(fā)育后期ZmLOX10表達(dá)量最高,二者的變化并不一致。陳巧等研究發(fā)現(xiàn)黃瓜GLV含量與LOX基因表達(dá)間也未呈現(xiàn)顯著相關(guān)性,而且黃瓜中Cs LOX2基因表達(dá)高峰的出現(xiàn)先于LOX活性高峰。但是,Zhang等發(fā)現(xiàn)桃成熟過程中GLV含量與PpLOX一2、PpLOX一3、PpHPL-1和PpADHl-3等基因表達(dá)水平存在一致的變化趨勢。Boukobza等發(fā)現(xiàn)添加外源亞油酸/亞麻酸可以增加番茄GLV的生成,但是添加LOX或者乙醇脫氫酶(ADH)都不能影響GLV的生成。在氫過氧化物裂解酶(HPL)過度表達(dá)的番茄中,揮發(fā)性短鏈醛醇的量幾乎沒有改變。這些結(jié)果說明在番茄中GLV含量并不取決于LOX途徑中酶的基因表達(dá)量以及酶的活性。鮮食玉米中LOX活性與C6醛醇含量之間的相關(guān)性不顯著,而與亞油酸含量顯著相關(guān)。谷物(如水稻、玉米)種子中LOX基因表達(dá)量與病原菌入侵引發(fā)的抗逆機(jī)制以及發(fā)芽時(shí)的生理變化有關(guān)。LOX雖然是催化脂肪氧化的酶,但是在谷物中有水的情況下會加速反應(yīng)。鮮食糯玉米作為發(fā)育中的谷物種子,水分含量與果蔬接近,在蒸煮.制汁等條件下LOX作用的微環(huán)境和生化機(jī)制,及其對產(chǎn)品新鮮風(fēng)味的影響仍待進(jìn)一步研究。

    猜你喜歡
    己醛
    基于GC–MS和感官評價(jià)分析紙包裝氣味物質(zhì)對巧克力風(fēng)味的影響
    包裝工程(2023年1期)2023-02-03 05:48:06
    氣相色譜法鑒別柴辛注射液中的柴胡
    吹掃捕集-氣相色譜質(zhì)譜法測定土壤中己醛的含量
    廣州化工(2022年13期)2022-08-01 01:11:10
    與己醛具有群體感應(yīng)協(xié)同抑制效應(yīng)的精油成分組合篩選研究
    氧化法環(huán)己酮裝置中己醛的產(chǎn)生、分布和消除
    廣州化工(2022年5期)2022-03-24 06:58:40
    己醛處理對黃金梨采后果心褐變的影響
    頂空氣相色譜法測定兔肉中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)己醛和己酸
    靜態(tài)頂空與頂空固相微萃取-氣相色譜法測定食用油中正己醛含量比較
    己醛處理對臍橙果實(shí)貯藏品質(zhì)的影響
    柴芩軟膠囊中正己醛的含量測定
    日本在线视频免费播放| 2021天堂中文幕一二区在线观| 午夜福利18| 亚洲熟妇熟女久久| 午夜免费激情av| 在线国产一区二区在线| 中文资源天堂在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播| avwww免费| 国产高清不卡午夜福利| 国产91精品成人一区二区三区| 香蕉av资源在线| 亚洲美女视频黄频| 一区二区三区免费毛片| 亚洲人成伊人成综合网2020| 欧美高清性xxxxhd video| 伦精品一区二区三区| av福利片在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 色哟哟·www| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 99九九线精品视频在线观看视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 久久久久久久久久久丰满 | 免费观看精品视频网站| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲精品一区av在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲成人久久爱视频| 国产日本99.免费观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲最大成人中文| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲最大成人av| 春色校园在线视频观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 乱码一卡2卡4卡精品| 少妇的逼水好多| 亚洲色图av天堂| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲精品久久国产高清桃花| 精品久久久久久成人av| 色综合婷婷激情| h日本视频在线播放| 免费观看在线日韩| 国产成人福利小说| 国产成人影院久久av| 久久精品国产亚洲网站| 欧美+日韩+精品| 久久精品91蜜桃| 嫩草影视91久久| 草草在线视频免费看| 岛国在线免费视频观看| 美女 人体艺术 gogo| 日本三级黄在线观看| 国产综合懂色| av天堂中文字幕网| 日日啪夜夜撸| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产精品一区www在线观看 | 亚洲午夜理论影院| 国产精品福利在线免费观看| 丰满乱子伦码专区| 男人狂女人下面高潮的视频| 欧美日本视频| 久久精品91蜜桃| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产成人福利小说| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 日韩一区二区视频免费看| 一个人看的www免费观看视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 91在线精品国自产拍蜜月| 在线免费十八禁| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲专区国产一区二区| 日韩精品有码人妻一区| 听说在线观看完整版免费高清| 午夜激情欧美在线| bbb黄色大片| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产精品1区2区在线观看.| 一进一出抽搐gif免费好疼| 成人av一区二区三区在线看| 极品教师在线免费播放| 国产中年淑女户外野战色| 国产午夜精品论理片| 欧美日韩黄片免| 国产男人的电影天堂91| 久久精品国产亚洲网站| 免费av不卡在线播放| 午夜福利18| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 少妇人妻一区二区三区视频| 毛片一级片免费看久久久久 | 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 露出奶头的视频| 美女cb高潮喷水在线观看| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国内精品美女久久久久久| 亚洲内射少妇av| 一区二区三区免费毛片| 精品日产1卡2卡| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 精品人妻视频免费看| 欧美精品国产亚洲| bbb黄色大片| 成人美女网站在线观看视频| 国产老妇女一区| 国内精品久久久久久久电影| 日韩大尺度精品在线看网址| 成年女人看的毛片在线观看| 成人特级av手机在线观看| av在线天堂中文字幕| 99久久精品国产国产毛片| 麻豆av噜噜一区二区三区| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 午夜福利欧美成人| 欧美zozozo另类| 老女人水多毛片| 婷婷精品国产亚洲av| 一区二区三区激情视频| 国产主播在线观看一区二区| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 精品一区二区三区av网在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 九九热线精品视视频播放| 亚洲四区av| 波多野结衣巨乳人妻| 12—13女人毛片做爰片一| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 欧美色视频一区免费| 精品久久久久久久久久久久久| 搞女人的毛片| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 久久精品国产亚洲网站| 精品福利观看| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产黄色小视频在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 黄色配什么色好看| ponron亚洲| АⅤ资源中文在线天堂| 久久久色成人| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲精品色激情综合| 可以在线观看的亚洲视频| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 午夜日韩欧美国产| 免费在线观看影片大全网站| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产人妻一区二区三区在| 国产精品久久久久久久久免| 欧美精品啪啪一区二区三区| 少妇的逼好多水| 给我免费播放毛片高清在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲精品一区av在线观看| 精品久久久久久久久av| 99精品久久久久人妻精品| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 露出奶头的视频| 国产成人av教育| 免费人成在线观看视频色| .国产精品久久| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 很黄的视频免费| 国产在线精品亚洲第一网站| 免费看a级黄色片| 听说在线观看完整版免费高清| 精品无人区乱码1区二区| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 久久久久性生活片| 韩国av一区二区三区四区| 日韩精品青青久久久久久| 最近中文字幕高清免费大全6 | 国产在线精品亚洲第一网站| 久久久午夜欧美精品| 国产成人福利小说| 男人的好看免费观看在线视频| 免费av观看视频| 成人国产一区最新在线观看| 国产不卡一卡二| 成人午夜高清在线视频| 亚洲国产欧美人成| 九九在线视频观看精品| 精品福利观看| 看免费成人av毛片| 久久精品91蜜桃| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 精品福利观看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 丰满乱子伦码专区| 欧美色视频一区免费| 日韩欧美国产在线观看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 男人舔奶头视频| 我要看日韩黄色一级片| 美女 人体艺术 gogo| 波野结衣二区三区在线| 天美传媒精品一区二区| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲精品成人久久久久久| 在现免费观看毛片| 一个人看的www免费观看视频| 丰满乱子伦码专区| 成人综合一区亚洲| 黄色女人牲交| 国产视频内射| 一进一出抽搐gif免费好疼| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 欧美zozozo另类| 国产在线精品亚洲第一网站| 婷婷色综合大香蕉| av女优亚洲男人天堂| 网址你懂的国产日韩在线| 免费av毛片视频| 韩国av在线不卡| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 一级毛片久久久久久久久女| 欧美最黄视频在线播放免费| 香蕉av资源在线| 欧美3d第一页| 中文亚洲av片在线观看爽| 免费大片18禁| 国产 一区 欧美 日韩| 身体一侧抽搐| АⅤ资源中文在线天堂| 内地一区二区视频在线| 精品久久久久久,| 毛片一级片免费看久久久久 | av在线观看视频网站免费| 日本a在线网址| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 日韩欧美国产一区二区入口| 日韩欧美精品免费久久| 欧美一级a爱片免费观看看| 99国产极品粉嫩在线观看| 性色avwww在线观看| 免费人成在线观看视频色| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲最大成人中文| 精品久久国产蜜桃| 久久国产精品人妻蜜桃| 大型黄色视频在线免费观看| 最近中文字幕高清免费大全6 | 3wmmmm亚洲av在线观看| 精品人妻熟女av久视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 十八禁网站免费在线| 中文字幕免费在线视频6| av.在线天堂| 听说在线观看完整版免费高清| 成人综合一区亚洲| 3wmmmm亚洲av在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 少妇的逼好多水| 男人狂女人下面高潮的视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 日本爱情动作片www.在线观看 | 麻豆成人av在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 内地一区二区视频在线| 午夜免费成人在线视频| 亚洲四区av| 国产伦在线观看视频一区| 一进一出好大好爽视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办 | 桃红色精品国产亚洲av| 天天一区二区日本电影三级| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲一区高清亚洲精品| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 亚洲七黄色美女视频| 国产高清三级在线| 99热网站在线观看| 欧美3d第一页| 亚洲成人精品中文字幕电影| 色视频www国产| 日本-黄色视频高清免费观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 日本三级黄在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 日本 欧美在线| 国产精品人妻久久久久久| 国产高清激情床上av| 午夜精品久久久久久毛片777| 日韩中文字幕欧美一区二区| 精品免费久久久久久久清纯| 天堂网av新在线| 久久亚洲精品不卡| 桃红色精品国产亚洲av| 国产精品国产高清国产av| 国产精品免费一区二区三区在线| 黄色丝袜av网址大全| 久久精品人妻少妇| 国产高清有码在线观看视频| 又黄又爽又免费观看的视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲在线自拍视频| 日日撸夜夜添| 又爽又黄无遮挡网站| 欧美+亚洲+日韩+国产| 精品久久久久久久末码| 久久久久久久久久成人| 91久久精品国产一区二区三区| 91麻豆av在线| av国产免费在线观看| 日韩亚洲欧美综合| 欧美日韩国产亚洲二区| 成人特级av手机在线观看| 别揉我奶头 嗯啊视频| 美女大奶头视频| 精品欧美国产一区二区三| 国产视频一区二区在线看| 我要看日韩黄色一级片| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 国产成人福利小说| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 干丝袜人妻中文字幕| 神马国产精品三级电影在线观看| 最近在线观看免费完整版| 国产精品亚洲一级av第二区| 校园人妻丝袜中文字幕| 免费av观看视频| 欧美性猛交黑人性爽| 高清在线国产一区| 国产精品免费一区二区三区在线| 免费黄网站久久成人精品| 91久久精品电影网| 亚洲av一区综合| 日日夜夜操网爽| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 日日啪夜夜撸| aaaaa片日本免费| 国产熟女欧美一区二区| 免费搜索国产男女视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲第一电影网av| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲四区av| 亚洲av五月六月丁香网| 极品教师在线免费播放| 亚洲最大成人中文| 嫩草影院精品99| 国产高清三级在线| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 欧美成人免费av一区二区三区| 成人国产一区最新在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲天堂国产精品一区在线| av中文乱码字幕在线| 成人av在线播放网站| av.在线天堂| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲欧美日韩东京热| 午夜亚洲福利在线播放| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲18禁久久av| 99热这里只有精品一区| 亚洲成人精品中文字幕电影| aaaaa片日本免费| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 最近在线观看免费完整版| 婷婷精品国产亚洲av| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲无线观看免费| or卡值多少钱| 国产精品亚洲美女久久久| 色综合站精品国产| 91在线观看av| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产伦人伦偷精品视频| 国产黄片美女视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 毛片一级片免费看久久久久 | 亚洲精品成人久久久久久| 校园春色视频在线观看| 亚洲乱码一区二区免费版| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲av中文av极速乱 | 日韩欧美国产一区二区入口| 麻豆av噜噜一区二区三区| 日本免费一区二区三区高清不卡| 成年免费大片在线观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 最新在线观看一区二区三区| 日本黄色视频三级网站网址| 久久久国产成人免费| 两个人的视频大全免费| 成人av在线播放网站| 日韩欧美国产一区二区入口| 久99久视频精品免费| 国产男靠女视频免费网站| bbb黄色大片| 国内精品美女久久久久久| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 人人妻人人澡欧美一区二区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产免费av片在线观看野外av| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲精品在线观看二区| 老司机午夜福利在线观看视频| 波多野结衣高清无吗| 国产欧美日韩一区二区精品| 色哟哟哟哟哟哟| bbb黄色大片| 国产精品综合久久久久久久免费| 桃红色精品国产亚洲av| 免费看a级黄色片| 性插视频无遮挡在线免费观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 一级毛片久久久久久久久女| av在线亚洲专区| 亚洲熟妇熟女久久| 伦精品一区二区三区| 99九九线精品视频在线观看视频| 精品福利观看| 成年人黄色毛片网站| 成年女人看的毛片在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 日韩人妻高清精品专区| 久久久国产成人精品二区| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 又紧又爽又黄一区二区| 99在线视频只有这里精品首页| 中文亚洲av片在线观看爽| 午夜爱爱视频在线播放| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 国语自产精品视频在线第100页| 国产精品精品国产色婷婷| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 观看美女的网站| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 色精品久久人妻99蜜桃| 在线观看免费视频日本深夜| 男人的好看免费观看在线视频| 精品人妻偷拍中文字幕| av女优亚洲男人天堂| 免费无遮挡裸体视频| a级毛片a级免费在线| 午夜视频国产福利| a级毛片a级免费在线| 午夜视频国产福利| 两个人视频免费观看高清| 天天一区二区日本电影三级| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲最大成人中文| 亚洲黑人精品在线| 小说图片视频综合网站| 日日干狠狠操夜夜爽| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲精华国产精华精| 国产亚洲精品av在线| 欧美在线一区亚洲| 亚洲专区国产一区二区| a在线观看视频网站| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 天堂网av新在线| 久久久成人免费电影| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲,欧美,日韩| 嫩草影院新地址| av福利片在线观看| 午夜免费激情av| 永久网站在线| 欧美色视频一区免费| 国产精品无大码| 亚洲欧美精品综合久久99| 一级a爱片免费观看的视频| 欧美国产日韩亚洲一区| 免费av毛片视频| 日本一本二区三区精品| 国内揄拍国产精品人妻在线| 99热精品在线国产| a级毛片免费高清观看在线播放| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 亚洲av二区三区四区| 精品久久久久久久末码| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 韩国av在线不卡| 亚洲美女黄片视频| 欧美3d第一页| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产激情偷乱视频一区二区| a级毛片a级免费在线| 国产在线男女| 18禁在线播放成人免费| 国产免费男女视频| 男女视频在线观看网站免费| 日韩一本色道免费dvd| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 午夜免费成人在线视频| 亚洲精品456在线播放app | 啦啦啦啦在线视频资源| 搡老岳熟女国产| 精品久久久噜噜| 国产欧美日韩精品亚洲av| 赤兔流量卡办理| 国产精品精品国产色婷婷| 内射极品少妇av片p| 日本爱情动作片www.在线观看 | 美女大奶头视频| 欧美中文日本在线观看视频| 国产 一区精品| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产精品三级大全| netflix在线观看网站| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 嫁个100分男人电影在线观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| aaaaa片日本免费| 五月伊人婷婷丁香| 天堂影院成人在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 99久久精品一区二区三区| 国产精品三级大全| 91狼人影院| 丝袜美腿在线中文| 亚洲 国产 在线| 欧美中文日本在线观看视频| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 最近在线观看免费完整版| 成人国产一区最新在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 久久精品影院6| 国产精品不卡视频一区二区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产伦在线观看视频一区| 日本欧美国产在线视频| 精品人妻1区二区| 91麻豆av在线| 久久久久久国产a免费观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美激情在线99| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久久国产成人精品二区| 亚洲美女视频黄频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 免费看美女性在线毛片视频| 国产毛片a区久久久久| 热99re8久久精品国产| 国产 一区精品| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲av一区综合| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲人成伊人成综合网2020| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 日韩中字成人| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 哪里可以看免费的av片| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 亚洲av美国av| 国产精品电影一区二区三区| 精品久久国产蜜桃| h日本视频在线播放| 一本一本综合久久| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国产黄a三级三级三级人| 少妇的逼水好多| 校园人妻丝袜中文字幕| 日韩人妻高清精品专区| 男人狂女人下面高潮的视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产伦在线观看视频一区| 成人av在线播放网站| 久久国产乱子免费精品| 老司机福利观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产精品亚洲一级av第二区| 一本久久中文字幕| 久久精品国产自在天天线| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲av第一区精品v没综合| 成人毛片a级毛片在线播放| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲av成人av| 老司机深夜福利视频在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲乱码一区二区免费版| 久久精品国产鲁丝片午夜精品 |