非洲紫羅蘭的組織培養(yǎng)和快速繁殖

●楊涼花（陜西省安康市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所 陜西 安康 725021）

紫羅蘭又名非洲堇，為苦苣苔科多年生常綠草本花卉，葉片呈橢圓形，花色有白色、紫色、粉色等，有單瓣和重瓣，品種繁多，花期長，花和葉均有較高的觀賞價值，是優(yōu)良的室內(nèi)裝飾花卉，也可用來凈化室內(nèi)空氣，近年來深受人們喜愛。常規(guī)繁殖方法是扦插，因受繁殖材料和季節(jié)的限制，繁殖速度較慢，不容易進(jìn)行大批量的規(guī)模生產(chǎn)，難以滿足人們對市場的需求，采用組織培養(yǎng)方法可以進(jìn)行快速繁殖，在短時間內(nèi)獲得大量成苗，并且保持其優(yōu)良品性。

1 材料與方法

1.1 外植體的選擇

選擇健壯植株的幼嫩莖段。

1.2 培養(yǎng)條件

溫度：一般用25℃恒溫培養(yǎng)。

光照：光照時間為每天12小時，光照度為1 800Lx。

滅菌前pH為5.6～5.8，蔗糖濃度為30g/L，瓊脂濃度為0.68g/L。

2 生長與分化情況

2.1 外植體的處理

于晴天選取健壯、無病蟲害植株的幼嫩莖段，置入燒杯中，滴入少許洗滌劑，在流水條件下沖洗1小時，送入無菌接種間，在超凈工作臺上先用75%的酒精浸泡30秒，無菌水沖洗，再用0.1%升汞滅菌10～12分鐘，無菌水沖洗4～5次，無菌濾紙吸干表面水分，用解剖刀切去基部受損的組織，然后用剪刀剪成0.5～1.0cm的小段備用。

2.2 誘導(dǎo)分化培養(yǎng)

將經(jīng)過無菌處理好的外植體材料分別接種在培養(yǎng)基MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L上，經(jīng)過20天培養(yǎng)以后，基部開始萌動，陸續(xù)產(chǎn)生愈傷組織；再經(jīng)過10天以后，愈傷組織開始逐漸膨大變綠，并形成大量密集的小芽。

2.3 繼代增殖培養(yǎng)

在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)約40天以后，將誘導(dǎo)出的愈傷組織從培養(yǎng)瓶中取出，用解剖刀將其分開，分別轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基MS+BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L上進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶接種4～5個，經(jīng)過15天以后，開始形成綠色叢生芽，逐漸展開伸長，并開始長出新葉，增殖倍數(shù)達(dá)到5倍以上。每隔20～25天將叢生芽分瓶轉(zhuǎn)接，進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)，從而擴(kuò)大培養(yǎng)規(guī)模，建立快速繁殖體系。

2.4 生根培養(yǎng)

在增殖培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，大約25天以后，基部開始陸續(xù)生成少量的白色細(xì)根，但是速度較慢，將已經(jīng)長成的 2～3cm高的幼苗分別轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基1/2MS+IBA0.05mg/L中進(jìn)行生根培養(yǎng)，約12天以后，幼苗基部開始生根，18天以后，幼苗的根數(shù)平均達(dá)到3條以上，并且逐漸變粗，生根率達(dá)到85%以上。

3 瓶苗的移栽

生根的組培苗由于長期生長在恒溫?zé)o菌的條件下，不能直接移栽到大田，必須經(jīng)過一段時間的煉苗。選取生長健壯的瓶苗，從無菌培養(yǎng)室中取出，置于普通室內(nèi)，自然溫度和自然光照煉苗5天左右，再去掉瓶蓋煉苗；如果培養(yǎng)基干裂，可以注入少量清水，再煉苗5天，用鑷子從培養(yǎng)瓶中取出小苗，放入提前準(zhǔn)備好的28～30℃的溫水中，小心洗去根部附著的培養(yǎng)基，用生根粉浸沾幼苗根部，即可進(jìn)行移栽。移栽非洲紫羅蘭的苗床用珍珠巖和腐葉土混合細(xì)沙土合成的基質(zhì)，先用多菌靈處理苗床，再用水澆透，過一天以后再進(jìn)行瓶苗移栽。小苗移栽于苗床后，再澆一遍水，然后用塑料薄膜覆蓋苗床，搭成拱棚，溫度應(yīng)保持在20～22℃，還要注意補充水分，避免陽光直射，如果陽光較強(qiáng)，還需要加蓋遮陽網(wǎng)，并且把塑料薄膜兩頭揭開，保持通風(fēng)，10天以后揭去塑料薄膜，移栽成活率在90%以上。