腹腔預(yù)注射全氟化碳對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用探討

張靜靜 龐繼恩

【摘要】 目的：研究腹腔預(yù)注射全氟化碳對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。方法：研究對(duì)象為2017年5月-2017年8月飼養(yǎng)的60只雄性健康Wistar大鼠，用電腦隨機(jī)數(shù)字表法均分為3組：假手術(shù)組、缺血再灌注組及全氟化碳（PFC）組，每組20只。結(jié)果：與假手術(shù)組相比，缺血再灌注組MPO為（55.19±12.04）U/L、MDA為（10.14±0.61）nmol/mg、LDH為（5 779.12±1 269.14）U/L，PFC組MPO為（40.79±10.19）U/L、MDA為（7.13±0.31）nmol/mg、LDH為（4 119.09±987.03）U/L，測(cè)定值均顯著增加，而缺血再灌注組SOD活性為（77.10±9.09）U/ml、PFC組SOD活性為（87.10±10.67）U/ml，均顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與缺血再灌注組相比，PFC組MPO、MDA、LDH測(cè)定值顯著降低，SOD活性顯著增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：SOD活性增加，MPO、MDA水平降低，表明全氟化碳對(duì)心急缺血再灌注損傷的保護(hù)作用和抗炎作用、抗氧化能力相關(guān)，但是需要對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

【關(guān)鍵詞】 腹腔預(yù)注射； 全氟化碳； 心肌缺血； 再灌注損傷； 保護(hù)作用

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2018.13.076 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2018）13-0175-02

【Abstract】 Objective：To study the protective effect of perfluorocarbon on myocardial ischemia-reperfusion injury in rats.Method：Sixty healthy male Wistar rats from May 2017 to August 2017 were randomly divided into three groups：sham operation group，ischemia reperfusion group and PFC group.Each group 20 only.Result：The MPO of ischemia reperfusion group was（55.19±12.04）U/L，MDA was（10.14±0.61） nmol/mg，and LDH was （5 779.12±1 269.14）U/L，in the PFC group，MPO was （40.79±10.19）U/L，MDA was （7.13±0.31）nmol/mg，and LDH was （4 119.09±987.03）U/L.Compared with the sham group，the values in both groups increased significantly，the differences were statistically significant（P<0.05）.The activity of SOD in ischemia-reperfusion group was（77.10±9.09）U/ml，and the activity of SOD in PFC group was（87.10±10.67）U/ml.Compared with the sham operation group，the values of the two groups were significantly lower，and the differences were statistically significant（P<0.05）.Compared with ischemia-reperfusion group，the values of MPO， MDA， and LDH were significantly lower in the PFC group，and the SOD activity was significantly increased，and the differences were statistically significant （P<0.05）.Conclusion：SOD activity increased，MPO and MDA levels， shows that the carbon fluoride to impatient ischemia-reperfusion injury of protection and anti-inflammatory effects，antioxidant capacity， but need further research on its mechanism of action.

【Key words】 Intraperitoneal injection in advance； All the fluorinated carbon； Myocardial ischemia； Reperfusion injury； Protection

First-authors address：Second Clinical Medical School of Qingdao University，Qingdao 266071，China

臨床上常見于中老年群體的高發(fā)血管疾病是急性心肌梗死，盡快重建冠脈血運(yùn)，心肌再灌注和恢復(fù)冠脈血流是治療急性心肌梗死的關(guān)鍵[1]。然而，再通梗死相關(guān)冠脈后，仍有缺血區(qū)心肌因缺血而受到再灌注損傷，10%～30%的心肌得不到充分灌注[2-3]。近年來，全氟化碳主要應(yīng)用于急性呼吸窘迫和部分液體通氣治療急性肺損傷[4]。本次研究對(duì)象2017年5月-2017年8月飼養(yǎng)的60只雄性健康Wistar大鼠，采用腹腔預(yù)注射全氟化碳對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究采用隨機(jī)對(duì)照等研究方法，研究對(duì)象為60只雄性健康Wistar大鼠，平均體重為（221.8+10.4）g，采用電腦隨機(jī)數(shù)字表法均分為3組：假手術(shù)組、缺血再灌注組及PFC組，每組20只。假手術(shù)組：對(duì)LAD僅穿線不結(jié)扎，造模前48 h起，每隔24小時(shí)采用腹腔注射的方法注射30 mg/kg生理鹽水；缺血再灌注組：造模前48 h起，每隔24小時(shí)采用腹腔注射的方法注射30 mg/kg生理鹽水；PFC組：造模前48 h每隔24小時(shí)腹腔注射的方法注射30 g/kg的PFC原液。

1.2 方法

實(shí)驗(yàn)中，假手術(shù)組、缺血再灌注組及PFC組的死亡數(shù)量分別為1、3、3只。最后從每組中隨機(jī)選擇10只測(cè)定髓過氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脫氫酶（LDH）等指標(biāo)。

1.2.1 采集血清 采用腹動(dòng)脈方法進(jìn)行取血，放入試管中，不抗凝，靜置在37 中1 h，然后進(jìn)行低溫離心，時(shí)間20 min，轉(zhuǎn)速3 000 r/min，取上清液進(jìn)行測(cè)定[5]。

1.2.2 MPO、MDA、SOD、LDH指標(biāo)測(cè)定 所有檢測(cè)按照說明書進(jìn)行嚴(yán)格操作。（1）MPO：采用比色法進(jìn)行測(cè)定；（2）MDA：采用TBA法進(jìn)行測(cè)定。（3）SOD：采用腔羥胺法測(cè)定；（4）LDH：采用比色法進(jìn)行測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS19.0系統(tǒng)軟件分析。計(jì)數(shù)資料用（x±s）表示，不同組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組大鼠MPO、MDA、SOD、LDH測(cè)定值比較

和假手術(shù)組相比，缺血再灌注組、PFC組MPO、MDA、LDH測(cè)定值均顯著增加，而SOD活性顯著降低，差異均統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。和缺血再灌注組相比，PFC組MPO、MDA、LDH測(cè)定值顯著降低，DOD活性顯著增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

3 討論

LDH水平和心肌壞死量具有密切關(guān)系，可以根據(jù)其含量對(duì)心肌細(xì)胞的損傷程度進(jìn)行判斷，在心肌梗死的診斷中有著重要價(jià)值[6-7]。SOD是非常重要的抗氧化酶，其活性與機(jī)體活動(dòng)密切相關(guān)，也是唯一特異性清除超氧自由基的酶，活性和缺血再灌注損傷程度有著密切的相關(guān)性[8-9]。MDA是脂質(zhì)過氧化的反應(yīng)產(chǎn)物，其含量可以反映脂質(zhì)過氧化水平，因此也能夠反應(yīng)細(xì)胞氧化損傷程度。MPO屬于溶酶體的一種，能夠反應(yīng)白細(xì)胞激活程度，也可以作為灌注后炎癥反應(yīng)的指標(biāo)之一[10]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，MPO水平和急性冠脈綜合征預(yù)后具有明顯的關(guān)系。總之，MPO、MDA、SOD、LDH均能反應(yīng)MIRI損傷程度，其中SOD和心肌損傷程度呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，其他三個(gè)指標(biāo)和心肌損傷程度呈現(xiàn)正相關(guān)。全氟化碳具有良好的運(yùn)載呼吸氣體的能力，對(duì)二氧化碳即氧的釋放速度和溶解極快，且具有可逆性，全氟化碳還能保護(hù)缺血心肌[11-12]。

有研究發(fā)現(xiàn)，缺血再灌注組LDH、MPO、MDA值比假手術(shù)組顯著增高，而SOD活性降低（P<0.05）；全氟化碳組LDH、MDA、MPO值比缺血再灌注組降低， SOD活性增高（P<0.05），且心肌形態(tài)學(xué)改變更小[13]，這與本研究結(jié)果相似。本研究結(jié)果顯示，和假手術(shù)組相比，缺血再灌注組、PFC組MPO、MDA、LDH測(cè)定值均顯著增加，而SOD活性顯著降低，差異均統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。和缺血再灌注組相比，PFC組MPO、MDA、LDH測(cè)定值顯著降低，DOD活性顯著增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。SOD活性增加，MPO、MDA水平降低，表明全氟化碳對(duì)心急缺血再灌注損傷的保護(hù)作用和抗炎作用、抗氧化能力相關(guān)，但是需要對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

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（收稿日期：2017-11-29）