蔬菜水果中農(nóng)藥殘留檢測方法的改善研究

（深圳凱吉星農(nóng)產(chǎn)品檢測認(rèn)證有限公司，廣東 深圳 518111）

農(nóng)藥是把“雙刃劍”，對促進(jìn)農(nóng)業(yè)增產(chǎn)有極其重要的作用，但由于農(nóng)藥本身的化學(xué)屬性和使用不當(dāng)，導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留嚴(yán)重超標(biāo)，已經(jīng)嚴(yán)重危害人民群眾的身體健康。因此，改善現(xiàn)有的農(nóng)藥殘留檢測方法，提升檢測的準(zhǔn)確率，實(shí)現(xiàn)從農(nóng)田到餐桌的全程監(jiān)管，日趨必要和緊迫。

1 農(nóng)藥殘留危害

農(nóng)藥殘留是農(nóng)藥應(yīng)用之后在特定時期中沒有被分解而殘留的物質(zhì)，是土壤、水源以及大氣中的微量農(nóng)藥元?dú)?、收獲物、有毒代謝產(chǎn)物以及雜質(zhì)的總稱。農(nóng)藥殘留問題主要是蔬菜水果種植過程中大量應(yīng)用農(nóng)藥所致，現(xiàn)階段世界上農(nóng)藥的年產(chǎn)量在200萬t以上，廣泛用作殺蟲劑、除蟲劑、落葉劑等。但是，難以降解的農(nóng)藥會給人的身體健康帶來嚴(yán)重的威脅。

農(nóng)藥一旦進(jìn)入糧食、蔬菜、水果中，就會導(dǎo)致食物污染，嚴(yán)重威脅人的身體健康。而一些農(nóng)藥在人體中代謝的速度相對較慢，累積的時間也相對較長，對于人體的神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟、腎等重要器官會產(chǎn)生影響，會出現(xiàn)頭痛、視覺模糊以及腹痛等問題，嚴(yán)重者甚至?xí)霈F(xiàn)呼吸加快、昏迷等問題。

農(nóng)藥殘留對人的影響相對較大，國家與行業(yè)對農(nóng)藥殘留含量進(jìn)行了明確的規(guī)定，要求對其進(jìn)行嚴(yán)格檢測。而蔬菜水果作為人民日常生活中的重點(diǎn)部分，其安全問題與人民有著密切的關(guān)系，必須通過有效的方法加強(qiáng)檢測力度，保障食品安全。

2 基于GC/ECD技術(shù)的氣相色譜檢測方法

現(xiàn)階段，蔬菜水果農(nóng)藥殘留檢測方式較多，本文以氣相色譜方法為主進(jìn)行研究分析，并提出農(nóng)藥殘留檢測的改善方式。

氣相色譜方法是通過氣體作為流動相的一種色層分離分析方式。汽化的試樣被載氣（流動相）帶入色譜柱中，而在柱中的固定相以及試樣中的不同分子之間的作用力不同，各個組分在色譜柱中流出的具體時間也不同，從而在不同的組分中其彼此分離。通過科學(xué)的方式對其進(jìn)行記錄分析，有效鑒別，制作各個組分流出色譜的具體時間以及濃度的色譜圖，獲得出峰時間以及順序，對化合物進(jìn)行定性分析，綜合峰的高低以及面積大小，對化合物進(jìn)行定量分析。

現(xiàn)階段，通過氣相方法進(jìn)行蔬菜水果農(nóng)藥殘留測定大多基于GC、HPLC、GC-MS、LC-MS/MS和GC/ECD技 術(shù)。GC、HPLC、GC-MS、LC-MS/MS方法可定性定量測定農(nóng)藥的殘留量，是今后農(nóng)藥殘留分析技術(shù)的發(fā)展主要趨勢，但這些設(shè)備儀器昂貴，技術(shù)要求相對較高，影響限制了該技術(shù)的應(yīng)用。GC/ECD技術(shù)是一種較為有效的氣相色譜檢測方法，同時儀器設(shè)備價(jià)格適宜，靈敏性也相對較高，在基層、一線的檢測以及研究中應(yīng)用較為廣泛。通過GC/ECD技術(shù)對氟蟲腈、氟啶脲、二甲戊靈、蟲螨腈、噠螨靈和苯醚甲環(huán)唑研究的測定農(nóng)藥方法，效果顯著[1]。

3 GC/ECD檢測基礎(chǔ)與條件

3.1 檢測儀器與試劑

在檢測中應(yīng)用美國Agilent公司的氣相色譜儀器配置的ECD檢測器（Agilent7890B）、德國IKA的高速均質(zhì)機(jī)、湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司的高速離心機(jī)、Snpelco的固相萃取裝置等。實(shí)驗(yàn)的樣品主要有1 000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)品氟蟲腈、氟啶脲、二甲戊靈、蟲螨腈、噠螨靈和苯醚甲環(huán)唑[2]。

3.2 檢測材料提取與凈化

將白菜、黃瓜以及蘋果等在農(nóng)貿(mào)市場中購買的蔬菜水果清洗干凈，提取其可食用部分，通過組織搗碎機(jī)對其進(jìn)行粉碎處理，制作形成待測樣品備用。分別稱取數(shù)量為10.00 g的蔬菜水果待測樣品于100 mL的離心管之中，添加不同質(zhì)量濃度的氟蟲腈、氟啶脲、二甲戊靈、蟲螨腈、噠螨靈和苯醚甲環(huán)唑等農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液；加入20 mL乙腈，高速勻漿提取2 min，放入4 g NaCl，通過渦旋儀渦旋，3 000 r/min離心3 min之后，取上清液10 mL置于潔凈的離心管之中，進(jìn)行氮吹處理，直至近干為止；再加入2 mL比例為95∶5的氯甲烷-甲醇混合液，待凈化處理。

加入4 mL體積比為95∶5的氯甲烷-甲醇混合溶液進(jìn)行凈化處理，將混合液預(yù)淋洗凈化柱，在溶液到達(dá)柱吸附層的表面時，加入待凈化的溶液。使用10 mL的離心管收集洗脫液，加入混合液洗滌離心管，保持潔凈。然后再淋洗凈化柱，收集洗脫液，重復(fù)2次，氮吹操作，待凈化液即將干的時候加入正己烷定容至5 mL，等待檢測。

3.3 檢測標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

將1 000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)品氟蟲腈、氟啶脲、二甲戊靈、蟲螨腈、噠螨靈和苯醚甲環(huán)唑按照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)說明書標(biāo)注的溶劑進(jìn)行溶解稀釋，配制成混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液，再配制混合純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)工作液以及基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作液[3]。

3.4 氣相色譜測定條件

色譜柱為Agilent DB-1MS色譜柱，在設(shè)置升溫程序的時候，120 ℃保持14 min，以10 ℃/min的狀態(tài)上升到270 ℃，并且保持12 min；進(jìn)樣口的溫度則為210 ℃，檢測器的溫度則為310 ℃。柱流速度為1 mL/min，其尾吹為30 mL/min，不分流進(jìn)樣處理。在此種環(huán)境中，農(nóng)藥的保留時間具有一定的差異性，其中氟蟲腈為13.474 min、氟啶脲12.710 min、二甲戊靈13.366 min、蟲螨腈為14.913 min、噠螨靈為19.506 min、苯醚甲環(huán)唑?yàn)?4.095 min。

4 GC/ECD優(yōu)化分析

4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

在蔬菜水果農(nóng)藥殘留檢測中，為了提升定量檢測的精準(zhǔn)度以及可靠性，要對配制的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液在色譜條件下進(jìn)行檢測分析，每個質(zhì)量濃度要重復(fù)進(jìn)樣5次。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以測定農(nóng)藥的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得各個目標(biāo)化合物的線性回歸方程以及相關(guān)系數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。

通過分析發(fā)現(xiàn)，這幾種農(nóng)藥在0.02～4.0 mg/L的范圍中，均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，其線性系數(shù)大于0.99，基于3倍的S/N確定方法檢出限，在10倍的S/N確定方法的定量限則可以滿足檢測的實(shí)際需求。

4.2 樣品凈化方法優(yōu)化

通過實(shí)驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)，在現(xiàn)階段的農(nóng)藥殘留測定前期的處理凈化中，應(yīng)用SPE柱凈化以及PSA/C18吸附劑凈化效果較好。因?yàn)椋珿C/ECD技術(shù)在農(nóng)藥檢測過程中檢測器相對較為靈敏，容易受到檢測物質(zhì)各個方面因素的影響，對樣品的凈化要求相對較為嚴(yán)格。而通過Florisil-SPE凈化小柱、NH2-SPE凈化小柱、C18SPE凈化小柱、PSA凈化劑對其進(jìn)行凈化優(yōu)化實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，在凈化處理中，F(xiàn)lorisil- SPE凈化小柱的效果較為顯著。相對于目前常用的方式來說，凈化能力以及回收率較為顯著。

在3種樣品中分別添加質(zhì)量濃度為0.09、0.17、0.81 mg/kg的氟蟲腈農(nóng)藥、氟啶脲農(nóng)藥、二甲戊靈農(nóng)藥、蟲螨腈農(nóng)藥、噠螨靈農(nóng)藥和苯醚甲環(huán)唑農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中每個物質(zhì)質(zhì)量濃度分為3個水平，而每個水平則要充分測定5次，其分析結(jié)果見表1。這6種農(nóng)藥的平均加標(biāo)回收率范圍與殘留標(biāo)準(zhǔn)分析要求規(guī)定吻合，凈化方法效果明顯。

表1 添加回收率以及精密度表

5 結(jié)語

本文通過對黃瓜、白菜以及蘋果3種樣品中的農(nóng)藥殘留氟蟲腈農(nóng)藥、氟啶脲農(nóng)藥、二甲戊靈農(nóng)藥、蟲螨腈農(nóng)藥、噠螨靈農(nóng)藥和苯醚甲環(huán)唑農(nóng)藥的檢測，論述了利用氣相色譜法GC/ECD技術(shù)結(jié)合Florisil- SPE凈化柱檢測上述幾種農(nóng)藥殘留方法和有效性。分析結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，該方法在農(nóng)藥殘留檢測中應(yīng)用此種方法精準(zhǔn)、有效，在蔬菜水果中農(nóng)藥殘留檢測中應(yīng)用效果顯著。