中藥復(fù)方的研究進(jìn)展

徐何方

摘要：中藥復(fù)方是中醫(yī)用藥的特點(diǎn)之一，是臨床用藥的主要形式和手段。復(fù)方中藥的化學(xué)成分極其復(fù)雜，其研究必須采用多學(xué)科、多技術(shù)綜合研究的方法。本文在分析中藥復(fù)方研究現(xiàn)狀的基礎(chǔ)上結(jié)合中藥復(fù)方配伍的規(guī)律，重點(diǎn)分析中藥復(fù)方的研究思路和方法。

關(guān)鍵詞：中藥復(fù)方；研究狀況；思路和方法

1.中藥復(fù)方研究狀況

由于中藥復(fù)方化學(xué)成分的復(fù)雜性，使得在揭示其配伍的科學(xué)內(nèi)涵和作用機(jī)制、物質(zhì)基礎(chǔ)上存在很多困難，因此探討中藥復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)理研究的方法學(xué)，成為當(dāng)今學(xué)術(shù)界矚目的焦點(diǎn)問題。中醫(yī)藥工作者對中藥復(fù)方的藥效學(xué)與配伍規(guī)律進(jìn)行了大量的研究工作，如血府逐瘀湯、生脈散等復(fù)方的拆方分析與藥理學(xué)研究，均取得了較好的研究結(jié)果。隨著天然藥物分離純化技術(shù)的發(fā)展和檢測手段的日益提高了人們試圖采用中藥復(fù)方拆方的研究，分離追蹤獨(dú)特功效的活性成分，發(fā)現(xiàn)具有高生物活性的先導(dǎo)化合物，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行中藥復(fù)方的物質(zhì)基礎(chǔ)研究，最終達(dá)到創(chuàng)造有高生物活性，獨(dú)特功效的新藥的目的?，F(xiàn)在化學(xué)分析、分離、鑒定方法與技術(shù)的介入，在一定程度上克服了拆方分析在揭示中藥復(fù)方配伍作用的生物學(xué)本質(zhì)上的局限性，有效的推動了該領(lǐng)域研究的進(jìn)度。

中醫(yī)與西醫(yī)治病的主要區(qū)別在于中醫(yī)是辨證論治，治療的是“證”，也就是通常所說的“治本”而非僅僅“治標(biāo)”。中藥復(fù)方成分復(fù)雜，我們從中藥復(fù)方中得到有效成分，成分的個(gè)體作用怎樣來揭示中藥復(fù)方的整體作用，怎樣用有效？這些問題不解決就很難闡明復(fù)方作用的物質(zhì)基礎(chǔ)[1]。

中藥復(fù)方藥理、藥效研究低水平問題嚴(yán)重，許多研究仍停留在臨床療效觀察階段，一些藥效學(xué)指標(biāo)的靈敏度偏低。中藥復(fù)方的實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)絕大數(shù)僅限于藥效學(xué)的觀察，而且由于沒有化學(xué)工作者的有效配合，方劑組成多不穩(wěn)定，藥效重現(xiàn)性較差，難以反映復(fù)方的藥理學(xué)作用。而且其研究絕大數(shù)僅限于整體動物的觀察，缺乏從分子、細(xì)胞水平上進(jìn)行深入系統(tǒng)的研究，針對中藥復(fù)方治療的病或證，缺少良好的現(xiàn)代病理生理基礎(chǔ)，藥理研究模式基本上沿用西藥藥理學(xué)的模式，不能客觀的反映中藥復(fù)方的主要藥效，無法切實(shí)表達(dá)復(fù)方的臨床療效[2]。

2.中藥復(fù)方研究思路和方法

中藥復(fù)方是在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，根據(jù)臨床需要，按照一定的組方原則，由多種單味中藥所形成的藥物組合體。中藥復(fù)方的作用就是由這個(gè)特定的組合體作用于機(jī)體所產(chǎn)生的，實(shí)質(zhì)上是一種特殊的化學(xué)藥物整體，而中藥藥效成分是復(fù)方發(fā)揮藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，所以對中藥復(fù)方成分即藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的深入研究是中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵和核心[3]中藥復(fù)方研究必須遵循方證相對模式，方證相對模式為中醫(yī)藥的精華內(nèi)容，它充分體現(xiàn)了中醫(yī)治病的辨證、組方用藥的根本法則。

2.1 中藥復(fù)方的活性成分研究

中藥復(fù)方的作用是由多種活性成分分別作用于不同的器官和不同靶點(diǎn)，相互協(xié)同，對機(jī)體從生理病理上進(jìn)行調(diào)理，經(jīng)整合調(diào)節(jié)而發(fā)揮復(fù)方的療效。中藥復(fù)方活性成分研究的思路一種是以中藥方的傳統(tǒng)功效為前提，從多味中藥復(fù)方拆方提取有效成分，尋找先導(dǎo)化合物，再進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾。另一種是以中醫(yī)藥理論為依據(jù)對中藥復(fù)方配伍整體觀、協(xié)同、拮抗作用機(jī)制及其物質(zhì)基礎(chǔ)的研究，以獲得優(yōu)質(zhì)、高效、安全、穩(wěn)定、可控、“三效”、“三小”、“三便”的現(xiàn)代中藥。理論上，中藥復(fù)方可以從不同層次分解為單味藥及其化學(xué)成分，但復(fù)方是一個(gè)復(fù)雜體系，在這樣一個(gè)動態(tài)復(fù)雜體系中分離出多種活性成分，并闡明它們之間的相互作用是很困難的。近年來分離、分析和鑒定的技術(shù)和方法的突破性進(jìn)展，為闡明中藥復(fù)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供了強(qiáng)有力的手段，使通過對活性成分的分析來進(jìn)行中藥復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究的思路成為可能[4-5]。

2.2 中藥復(fù)方指紋圖譜

中藥復(fù)方指紋圖譜是復(fù)方制劑經(jīng)一定的處理后，采用現(xiàn)代的分析手段表達(dá)出的色譜、光譜或聯(lián)用的圖譜，用以表達(dá)復(fù)方化學(xué)成分的特征，是中藥現(xiàn)代化的突破口與關(guān)鍵技術(shù)之一。中藥復(fù)方譜效學(xué)指將復(fù)方指紋譜圖與藥效結(jié)果結(jié)合起來，將復(fù)方指紋圖譜中化學(xué)成分的特征與復(fù)方藥效研究聯(lián)系起來，建立有意義的復(fù)方譜效關(guān)系，從而反應(yīng)制劑內(nèi)在的質(zhì)量。指紋圖譜研究是中藥質(zhì)量控制的關(guān)鍵技術(shù)之一，可以完善表達(dá)中藥的整體性特征，為現(xiàn)代中藥的質(zhì)量控制、鑒定提供新的思路和方法，同時(shí)為中藥復(fù)方的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究奠定基礎(chǔ)。譜效學(xué)研究所獲得的信息可以進(jìn)一步闡明與機(jī)體相關(guān)的主要藥效成分，為識別中藥復(fù)方制劑藥效成分研究奠定基礎(chǔ)[6-7]。

2.3 中藥血清藥理和血清藥物化學(xué)

血清藥理學(xué)是近十多年來才逐漸興起的一門實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，是一種研究中藥藥效較為科學(xué)的方法。它是指將中藥或中藥復(fù)方經(jīng)口給動物灌服一定時(shí)間后采集動物血液，分離血清，用此含有藥物成分的血清進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的一種實(shí)驗(yàn)方法。目前中藥血清藥理學(xué)已經(jīng)應(yīng)用到越來越多的研究領(lǐng)域中，而且取得了一些進(jìn)展，如對陽和湯的研究中，可以觀察到陽和湯血清對MCF27細(xì)胞有抑制增殖、促進(jìn)分化及誘導(dǎo)凋亡作用，從而產(chǎn)生抗腫瘤作用。血清藥理學(xué)方法的最大優(yōu)點(diǎn)是能模擬藥物的體內(nèi)過程，用體外實(shí)驗(yàn)體系再現(xiàn)藥物的體內(nèi)作用，可以防止中藥粗制劑本身理化性質(zhì)對實(shí)驗(yàn)干擾，實(shí)驗(yàn)的結(jié)果與在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果一致性好，不僅能反應(yīng)藥物中可吸收部分的直接作用， 而且能反應(yīng)藥物成分在機(jī)體作用下形成的代謝產(chǎn)物和藥物誘生的機(jī)體內(nèi)源性物質(zhì)的間接效果[8]。中藥血清藥物化學(xué)是研究血清中的化學(xué)物質(zhì)，是以傳統(tǒng)藥物化學(xué)方法為基礎(chǔ)，綜合應(yīng)用多種現(xiàn)代技術(shù)，分析鑒定口服中藥后血清中的移行成分，研究其藥效相關(guān)性，確定中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的應(yīng)用學(xué)科，此法將成為快速、準(zhǔn)確地研究確定中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的有效途徑?？傊?，中藥血清藥物化學(xué)研究，使中醫(yī)藥研究進(jìn)入系統(tǒng)藥物學(xué)研究的科學(xué)化領(lǐng)域。但是，在研究思路上往往局限于具體某一中藥復(fù)方中藥物間相互關(guān)系配伍研究，僅能說明具體中藥復(fù)方中藥物存在的必要性及藥物間的“七情和合”，而不是隨證候變化的中藥復(fù)方配伍規(guī)律。中藥復(fù)方的物質(zhì)基礎(chǔ)是其有效化學(xué)成分，必須將中藥復(fù)方藥理學(xué)的研究與復(fù)方的有效成分研究結(jié)合起來，才能真正搞清復(fù)方作用機(jī)理，如將中藥血清藥理學(xué)與中藥血清藥物化學(xué)協(xié)同研究結(jié)合起來，方能揚(yáng)長避短[9]。

2.4 細(xì)胞膜生物色譜法

細(xì)胞膜色譜法是指將活性組織細(xì)胞膜固定在特定載體表面，制備成細(xì)胞膜固定相（CMSP），再用液相色譜的方法研究藥物與受體之間的相互作用，將藥物在體內(nèi)的作用過程在體外進(jìn)行動態(tài)模擬。傳統(tǒng)中藥及中藥復(fù)方篩選有效成分的方法是先提取分離，再逐一進(jìn)行藥效試驗(yàn)以確定有效成分，研究周期一般較長，命中率相對較低，而細(xì)胞膜色譜法是一種新型生物親和色譜方法，研究的藥物可不經(jīng)提取分離步驟，直接在特定的CMC模型上完成篩選過程，并且藥物在CMC模型中的保留特性（容量因子）和其藥物的作用有顯著的相關(guān)性。中藥復(fù)方是一個(gè)復(fù)雜體系，發(fā)揮CMSP具有色譜分離和活性篩選雙重功能的優(yōu)勢，即可簡捷快速分離出中藥復(fù)雜體系中有效成分。我們已將CMC方法用于藥用植物和中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的研究，篩選和發(fā)現(xiàn)天然藥物中的有效部位和有效成分。但CMC法用的是自然生物膜（組織細(xì)胞），膜受體的密度較小，柱效較低，色譜柱壽命通常比較短，自然生物膜存在有多種活性蛋白，藥物可能與多種受體或通道蛋白結(jié)合，容量因子反映藥物與細(xì)胞膜上多種受體的協(xié)同結(jié)合效應(yīng)，因此CMC 法研究中常受非特異結(jié)合的因素的干擾，尚不能完全模擬體內(nèi)復(fù)雜環(huán)境以及機(jī)體內(nèi)其它系統(tǒng)對藥物發(fā)揮藥效作用的影響。同時(shí)，固定相的制備、色譜柱流動相、緩沖溶液的組成、PH、柱溫、柱壓、流速等要求較苛刻，對流動相難以進(jìn)行靈活地調(diào)整。通過對細(xì)胞膜固定相制備方法的改進(jìn)和CMC 技術(shù)的進(jìn)一步系統(tǒng)化和規(guī)范化將有助于問題的解決[10-11]。

2.5 中藥藥物動力學(xué)研究

中藥藥物動力學(xué)是借助動力學(xué)原理，研究中藥活性成分、組分、中藥單、復(fù)方在體內(nèi)吸收、分布、代謝、排泄等過程的動態(tài)變化規(guī)律及其體內(nèi)時(shí)量一時(shí)效關(guān)系，并用數(shù)學(xué)方程定量地預(yù)測這些過程的性質(zhì)的一門邊緣學(xué)科。中藥日服經(jīng)消吸收后，多數(shù)以原形或代謝產(chǎn)物的形式進(jìn)入血液。由于有些藥物的血藥濃度低，檢測比較困難尿中有效成分相對較高，可以通過對尿液，成分進(jìn)行分析確定體內(nèi)代謝產(chǎn)物。另外，對復(fù)方生物活性物質(zhì)的藥動學(xué)藥效學(xué)關(guān)性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，借助于指紋圖譜，建立明確的潛效關(guān)系，這對復(fù)方篩選、刊型優(yōu)化等上作極為重要，是今后藥動學(xué)發(fā)展的必然力向現(xiàn)代新技術(shù)在中藥藥代研究中的應(yīng)用。

綜上所述，中藥復(fù)方研究的困難在于作用的物質(zhì)基礎(chǔ)不明確，對中藥復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)方面的深入研究，已成為中藥現(xiàn)代化，中藥進(jìn)入國際市場迫在眉睫的任務(wù)。而根據(jù)中藥復(fù)方研究狀況，把現(xiàn)代中藥復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究方法相融合，從血清藥理學(xué)和血清藥物化學(xué)方法入手，結(jié)合多種現(xiàn)代技術(shù)的應(yīng)用，尋找并建立一種簡便、快捷、符合中醫(yī)中藥用藥原則的中藥復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)研究方法的思路，相對可行。復(fù)方中藥的研究與其他科學(xué)發(fā)展的規(guī)律一樣，也必須采用多學(xué)科、多種技術(shù)綜合研究的方法。隨著先進(jìn)技術(shù)如LC—MS、CE—MS、LC—NMR及LC—MS—MS等的發(fā)展、普及和應(yīng)用，采用與中醫(yī)藥理論相對應(yīng)的藥理模型，我們將最終能夠闡明中藥復(fù)方治療疾病的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理；另一方面生物芯片技術(shù)的出現(xiàn)和發(fā)展，可以應(yīng)用于中藥藥理的分析、新藥的研制開發(fā)、中藥鑒定、毒理觀察等方面，有利于在分子生物學(xué)水平上闡明中醫(yī)藥治病的機(jī)制，促進(jìn)中藥現(xiàn)代化，具有重要的意義和廣泛的應(yīng)用前景。

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