HPLC—CDD法測定以碳酸鈉為助溶劑的頭孢類產(chǎn)品中碳酸鈉的含量

程沫仁

摘 要：方法：采用羧酸基鍵合硅膠為填充劑色譜柱，1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）為流動相，非抑制型電導檢測器，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。結論：本法簡便、準確，可用于碳酸鈉為助溶劑的頭孢類產(chǎn)品中碳酸鈉的含量測定。

關鍵詞：頭孢類產(chǎn)品；含量；測定

碳酸鈉是一種易溶于水的白色粉末，溶液呈堿性（能使酚酞溶液變淺紅），但分類屬于鹽，不屬于堿。碳酸鈉是一種重要的有機化工原料，主要用于醫(yī)藥、造紙、冶金、玻璃、紡織、染料等工業(yè)。國際貿(mào)易中又名蘇打或堿灰，廣泛用于生活洗滌、酸類中和以及食品加工等。由于部分頭孢類原料難溶于水，需加碳酸鈉做助溶劑或pH調(diào)節(jié)劑。目前測定碳酸鈉的方法主要有離子選擇電極、酸堿滴定法與電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法、原子吸收分光光度法[1-5]。本實驗采用高效液相色譜法對碳酸鈉為助溶劑的頭孢類產(chǎn)品中的碳酸鈉的進行了含量測定。高效液相-電導法和高效液相-蒸發(fā)光散射測定結果基本一致。

1儀器與試藥

1.1儀器：電子天平FA1004型（南京華欣分析儀器制造有限公司）；721可見光分光光度計（四川賽恩思儀器有限公司）；LU230四元低壓梯度液相色譜分析系統(tǒng)（大連依利特分析儀器有限公司）；CO-Ⅳ色譜柱溫箱（恒溫柱箱）（天津琛航科苑科技發(fā)展有限公司）；MPC-K6s 加熱制冷型恒溫水浴油?。ū本┵惷浪純x器設備有限公司）；Genser大型旋轉蒸發(fā)儀（北京賽美思儀器設備有限公司）；TH-UP實驗室專用高純水機（滕州市滕海分析儀器有限公司）；ILMVAC真空泵--德國伊爾姆抗化學腐蝕隔膜泵（上海泰坦科技股份有限公司）；BILON-1000C多用途恒溫超聲提取機（上海比朗儀器制造有限公司） ；JASCO V-7000系列紫外可見近紅外分光光度計（沈陽佳士科商貿(mào)有限公司）；Waters VanGuard保護柱（沃特世科技（上海）有限公司）。

1.2色譜柱：羧酸基鍵合硅膠為填充劑色譜柱。

1.3對照品：碳酸鈉購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4試劑：甲醇（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、乙腈（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、冰醋酸（青島雅各化學試劑銷售有限公司）、磷酸二氫鈉（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、三乙胺（濟南匯豐達化工有限公司）、氫氧化鉀（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、磷酸（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、硝酸（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、吡啶二羧酸（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）。

1.5試藥：注射用鹽酸頭孢甲肟、注射用硫酸頭孢匹羅、注射用頭孢他啶、注射用鹽酸頭孢替安、注射用頭孢匹胺。

2測定方法確定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下。流動相：1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16），非抑制型電導檢測器，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取氯化鈉對照品適量，置容量瓶中，加流動相溶解稀釋，即得。

2.3供試品溶液的制備

注射用鹽酸頭孢甲肟、注射用硫酸頭孢匹羅、注射用頭孢他啶、注射用鹽酸頭孢替安、注射用頭孢匹胺適量，精密稱取，加5毫升流動相，超聲2分鐘，過濾，濾液轉移至10毫升容量瓶內(nèi)，流動相定容，即得。

2.4專屬性試驗

分別鹽酸頭孢甲肟、硫酸頭孢匹羅、頭孢他啶、鹽酸頭孢替安、頭孢匹胺原料制成陰性樣品，依上述方法測定，結果在碳酸鈉出峰處陰性液無色譜峰，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5對照品的線性考察

精密稱取氯化鈉對照品，分別配置濃度為0.01微克/毫升、0.015微克/毫升、0.03微克/毫升、0.035微克/毫升0.04微克/毫升、0.045微克/毫升、0.05微克/毫升、0.055微克/毫升、0.06微克/毫升溶液。分別按照實驗條件測定，記錄色譜峰。以鈉離子峰面積峰面積（Y）為縱坐標，鈉離子濃度（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結果表明，鈉離子呈良好的線性關系。

2.6準確度試驗

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的碳酸鈉對照品，上述方法進行測定，計算回收率，平均回收率為99.1%，RSD=0.93%。結果表明此方法的回收率良好。

2.7與高效液相-蒸發(fā)光散射檢測法對比

以0.02mol·L-1醋酸銨溶液（用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至4.8）-乙腈（70：30）為流動相，流速為1.5mL·min-1，蒸發(fā)光散射檢測，檢測器溫度：40℃，霧化氣體（空氣）壓力：0.35 MPa。

3結論

分別考察乙腈-0.1%冰醋酸（27：73），乙腈-0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液 （pH 6.5）（36：64），磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（80：10：10），乙腈-0.2%（質(zhì)量分數(shù)）磷酸（體積比25：75），甲醇-0.1%磷酸溶液（30：70）；甲醇-0.2%磷酸溶液（40：60），甲醇-異丙醇-乙腈（37∶61∶2）；0.05 mol.L-1磷酸鹽緩沖液-乙腈（體積比為50∶50），0.2%三乙胺溶液（用磷酸調(diào)p H至5.3）-乙腈（65∶35），1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）不同比例的流動相，結果以1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用1.7mmol/L硝酸一0.7rnmol/L吡啶二羧酸溶液一甲醇（59.5：24.5：16）為流動相。本實驗表明此方法可用于碳酸鈉為助溶劑的頭孢類產(chǎn)品中碳酸鈉的含量測定。高效液相-電導法和高效液相-蒸發(fā)光散射測定結果基本一致。

參考文獻：

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[4段旭川.]酸堿滴定法與電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法聯(lián)合測定混合堿中碳酸鈉和碳酸氫鈉[J].冶金分析.2009（09）

[5]張冬，赫曉軍，苑華，付焱.原子吸收分光光度法測定注射用頭孢他啶中助溶劑碳酸鈉的含量[J].中國藥房. 2011（05）