胸腺瘤患者螺旋CT影像特征與CKP、VEGF表達(dá)的相關(guān)性研究

　，，立紅，城瑞，　*

(1.河北省滄州市中心醫(yī)院CT診斷科，河北 滄州061001；2.河北省滄州市中心醫(yī)院胸外科；3.河北省滄州市中心醫(yī)院病理科)

胸腺瘤為源于胸腺上皮的腫瘤，多發(fā)病于前縱隔處，臨床上較為常見(jiàn)[1-2]。上皮細(xì)胞的主要構(gòu)成成分細(xì)胞角蛋白(CKP)為重要的腫瘤標(biāo)志物，其常用于診斷腫瘤[3]。腫瘤血管生成對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)起著重要的作用，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)有益于血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂增殖及強(qiáng)化血管通透性等，同腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[4]?；仡櫺苑治霰驹菏罩蔚?3例胸腺瘤患者臨床資料，分析其螺旋CT影像特征和腫瘤組織中CKP和VEGF的表達(dá)情況，進(jìn)而探討其相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料以本院2013年2月～2017年4月收治的83例胸腺瘤患者為研究對(duì)象，所有患者均經(jīng)手術(shù)病理檢查確診為胸腺瘤，其中男49例，女34例；年齡20～76歲，中位年齡55歲；37例表現(xiàn)為重癥肌無(wú)力，有不同程度咳嗽、胸痛、聲音嘶啞，疲乏無(wú)力及氣短癥狀者30例，12例吞咽困難，5例上腔靜脈綜合征。病程1個(gè)月到3年不等。

1.2方法觀察并記錄所有患者的螺旋CT影像表現(xiàn)，如外形是否呈鋸齒或尖角狀，有無(wú)分葉狀，密度是否均勻，病灶直徑，肺部轉(zhuǎn)移情況，心包、胸膜有無(wú)侵犯，縱隔脂肪線是否存在等。檢測(cè)所有患者手術(shù)病理切片CKP和VEGF的表達(dá)情況。

1.2.1螺旋CT掃描方法采用德國(guó)西門子公司Somatom Emotion 16排螺旋CT掃描儀，掃描參數(shù)125 mA，120 kV；5～10 mm的準(zhǔn)直器寬度，床移動(dòng)速度為7.5 mm/s。自胸廓入口掃描至橫隔處，容積掃描后重建薄層，index 1.5 mm。增強(qiáng)掃描對(duì)比劑為65%Angiografin、76%泛影葡胺，肘前靜脈注射，流率為2～3 mL/s，延遲掃描時(shí)間12～15 s。圖像均經(jīng)VoxelQ工作站和膠片雙重結(jié)合分析，由2位資深醫(yī)生獨(dú)立閱片，觀察并記錄數(shù)據(jù)。

1.2.2CKP、VEGF檢測(cè)試驗(yàn)試劑：鼠抗人細(xì)胞角質(zhì)蛋白(廣譜)單克隆抗體，鼠抗人原始造血細(xì)胞單克隆抗體CD34，VEGF多克隆抗體(即用型)，DAB濃縮型試劑盒和SP免疫組織化學(xué)染色試劑盒均由上海科新生物技術(shù)公司提供。檢測(cè)方法：取本組手術(shù)病理標(biāo)本行免疫組化SP法染色觀測(cè)CKP、VEGF表達(dá)情況，所有操作均按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行，具體方法：①石蠟切片行常規(guī)二甲苯脫蠟。②使用緩沖液PBS(pH 7.4)進(jìn)行3次漂洗，每次3 min。③將定量pH=6.0的檸檬酸鹽緩沖液放于微波盒并加熱，直至沸騰，組織切片脫蠟水化后放于高溫塑料切片架，放于沸騰緩沖液中，微波持續(xù)加熱處理5～10 min，重復(fù)1次，取出微波盒冷卻為常溫。④取出玻片用蒸餾水沖洗2次，再用緩沖液漂洗2次，每次3 min。⑤滴加過(guò)氧化酶阻斷劑，37 ℃環(huán)境下孵育10 min。⑥緩沖液漂洗3次，每次3 min。⑦甩去緩沖液，滴加非免疫性動(dòng)物血清，并在37 ℃環(huán)境下孵育10 min。⑧甩去血清，并滴入第一抗體(CKP、VEGF)，4 ℃環(huán)境下過(guò)夜。而后緩沖液沖洗3次，每次3 min。再甩去緩沖液，滴入第二抗體(生物素標(biāo)記的鼠抗人抗體)，37 ℃環(huán)境中孵育10 min，而后緩沖液漂洗3次，每次3 min。甩去緩沖液后加入DBA新鮮顯色劑，顯微鏡下觀察期顯示狀況。⑨用自來(lái)水沖洗后行蘇木素復(fù)染，再用0.5%鹽酸酒精分化，緩沖液漂洗，以氨水返藍(lán)。再將切片行梯度酒精常規(guī)脫水，二甲苯透明，以中性樹膠封片。

1.2.3結(jié)果判讀以細(xì)胞陽(yáng)性百分率和染色強(qiáng)度得分之和為CKP、VEGF表達(dá)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)[5]。隨機(jī)選取(400倍)高倍鏡視野5個(gè)來(lái)進(jìn)行評(píng)判：①0分為無(wú)染色，1分為淺黃色染色，2分為棕黃色染色，3分為黃褐色染色。②0分為細(xì)胞陽(yáng)性率低于5%；1分為細(xì)胞陽(yáng)性率為5%～25%；2分為細(xì)胞陽(yáng)性率為25%～50%；3分為細(xì)胞陽(yáng)性率>50%。取上述兩項(xiàng)得分之和，陰性(-)為0分；弱陽(yáng)性(+)為1～2分；中度陽(yáng)性(++)為3～4分；強(qiáng)陽(yáng)性(+++)為≥5分。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)均用軟件SPSS18.0處理。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1胸腺瘤患者CT影像學(xué)特征所有患者均行CT平掃，顯示病灶均處于前中縱隔或前縱隔，其中36例位于左前縱隔，42例位于右前縱隔，5例位于雙前縱隔；外形呈尖角或鋸齒狀33例，呈分葉狀55例；病灶最大13 cm×8 cm，最小2 cm×2 cm，直徑≤10 mm 54例，>10 mm 29例；病灶密度均勻39例，密度不均勻44例；肺內(nèi)轉(zhuǎn)移7例，侵犯心包、胸膜27例；37例存在縱隔脂肪線，46例不存在。41例行增強(qiáng)掃描均顯示病灶明顯強(qiáng)化。

2.2胸腺瘤CKP、VEGF表達(dá)同CT強(qiáng)化幅度的關(guān)系在41例行CT增強(qiáng)掃描的患者中，CT強(qiáng)化幅度>20 HU的病灶25例，CT強(qiáng)化幅度≤20 HU的病灶16例。在CT強(qiáng)化幅度>20 HU的病灶中VEGF陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于CT強(qiáng)化幅度≤20 HU的病灶(χ2=6.002，P=0.011)；但強(qiáng)化幅度同CKP的陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)明顯相關(guān)性(χ2=0.151，P=0.672)。見(jiàn)表1。

表1　41例胸腺瘤患者CKP和VEGF陽(yáng)性表達(dá)同CT強(qiáng)化幅度間的關(guān)系　(例，%)

注：CKP為細(xì)胞角蛋白，VEGF為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

2.3胸腺瘤CKP表達(dá)同CT影像學(xué)特征的相關(guān)性分析83例胸腺瘤患者病灶CKP表達(dá)均呈陽(yáng)性，但陽(yáng)性強(qiáng)度不同，分析其表達(dá)同CT影像學(xué)特征的關(guān)系。結(jié)果提示：胸腺瘤CKP表達(dá)與病灶外觀是否呈尖角或鋸齒狀、密度是否均勻、是否侵犯心包及胸膜和是否存在縱隔脂肪線存在相關(guān)性，而與外觀是否呈分葉狀、病灶直徑、肺內(nèi)是否轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)。見(jiàn)表2。

表2　83例胸腺瘤CKP表達(dá)同CT影像學(xué)特征的相關(guān)性分析　(例，%)

注：CKP為細(xì)胞角蛋白

2.4胸腺瘤VEGF表達(dá)同CT影像學(xué)特征的相關(guān)性分析83例胸腺瘤患者病灶VEGF表達(dá)均呈陽(yáng)性，且陽(yáng)性強(qiáng)度不同，分析其表達(dá)同CT影像學(xué)特征的關(guān)系，結(jié)果提示：胸腺瘤VEGF表達(dá)與病灶外觀是否呈尖角或鋸齒狀、是否呈分葉狀、肺內(nèi)是否轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，而與密度是否均勻、病灶直徑、有無(wú)縱隔脂肪線和是否侵犯心包、胸膜無(wú)關(guān)。見(jiàn)表3。

表3　83例胸腺瘤VEGF表達(dá)同CT影像學(xué)特征的相關(guān)性分析　(例，%)

注：VEGF為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

3　討　　論

胸腺瘤是一種發(fā)病在縱隔處的原發(fā)性腫瘤，其發(fā)病率較高，占前縱隔腫瘤的50%左右[6-8]。既往研究發(fā)現(xiàn)，多數(shù)胸腺瘤的包膜較完整，一部分胸腺瘤會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)移、侵犯和復(fù)發(fā)，其在生物行為學(xué)上多表現(xiàn)為低度惡性或潛在惡性[9-10]。本文對(duì)本院83例經(jīng)手術(shù)病理檢查確診的胸腺瘤患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，通過(guò)分析其CT影像學(xué)資料，總結(jié)出胸腺瘤大致的影像學(xué)特征：①多發(fā)病于前中縱隔或前縱隔，本組36例位于左前縱隔，42例位于右前縱隔，5例位于雙前縱隔；②病灶多不規(guī)則，本組呈尖角或鋸齒狀33例，呈分葉狀55例；③病灶密度無(wú)特殊差異，本組病灶密度均勻39例，密度不均勻44例；④少部分發(fā)生肺內(nèi)轉(zhuǎn)移，可侵犯心包、胸膜，本組肺內(nèi)轉(zhuǎn)移7例，侵犯心包、胸膜27例；⑤增強(qiáng)掃描多強(qiáng)化，本組41例行增強(qiáng)掃描均顯示病灶明顯強(qiáng)化。

大量文獻(xiàn)顯示，腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移的主要過(guò)程是腫瘤內(nèi)部新生血管形成，該新生血管導(dǎo)致毛細(xì)血管通透性、血容量等變化[11-13]。腫瘤細(xì)胞分泌的VEGF是誘導(dǎo)血管生成的重要因子，VEGF在腫瘤中的過(guò)高表達(dá)對(duì)胸腺瘤內(nèi)血管的生成起著推動(dòng)作用[14]。同時(shí)VEGF還能增加CT檢查對(duì)比劑的滯留量，故可增強(qiáng)CT增強(qiáng)掃描對(duì)腫瘤的分辨能力，可以完整顯示腫瘤狀況，全面反映腫瘤供血狀況[15]。本文結(jié)果顯示，CT增強(qiáng)幅度越大，VEGF陽(yáng)性表達(dá)率越高，而CKP陽(yáng)性表達(dá)率同CT的增強(qiáng)幅度無(wú)關(guān)。為此，可以通過(guò)增強(qiáng)CT掃描的強(qiáng)化幅度對(duì)腫瘤性質(zhì)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后和侵犯情況進(jìn)行判斷。

KUO等[16]研究表明，CKP和VEGF是上皮細(xì)胞的重要組成部分，均為重要的腫瘤生物學(xué)標(biāo)志物，當(dāng)上皮細(xì)胞發(fā)生腫瘤病變時(shí)，二者均會(huì)出現(xiàn)高表達(dá)。本文所有患者的CKP和VEGF表達(dá)均為陽(yáng)性，但有強(qiáng)弱差別。在CT特征表現(xiàn)為外形呈尖角或鋸齒狀、密度均勻、有縱隔脂肪線存在和有心包、胸膜侵犯時(shí)，CKP均表達(dá)為中陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性，提示胸腺瘤CKP表達(dá)與病灶外觀是否呈尖角或鋸齒狀、密度是否均勻、是否侵犯心包及胸膜和是否存在縱隔脂肪線存在相關(guān)性，而與外觀是否呈分葉狀、病灶直徑、肺內(nèi)是否轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)。此狀況可能同胸腺瘤的類型有關(guān)，有研究發(fā)現(xiàn)上皮型胸腺瘤中CKP表達(dá)多為中等陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性，呈弱陽(yáng)性的多為淋巴型胸腺瘤[17-18]?？梢?jiàn)，單純看CKP表達(dá)并不能判斷胸腺瘤的性質(zhì)，該表達(dá)只是提示此腫瘤發(fā)生于上皮細(xì)胞，但可以此來(lái)鑒別胸腺淋巴瘤。VEGF是判斷腫瘤性質(zhì)及預(yù)后的重要指標(biāo)[19]。本文胸腺瘤CT特征表現(xiàn)為尖角或鋸齒狀、分葉狀、肺內(nèi)轉(zhuǎn)移時(shí)，其VEGF多表現(xiàn)為中等陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性，提示胸腺瘤VEGF表達(dá)與病灶外觀是否呈尖角或鋸齒狀、是否呈分葉狀、肺內(nèi)是否轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，而與密度是否均勻、病灶直徑、有無(wú)縱隔脂肪線和是否侵犯心包、胸膜無(wú)關(guān)。此結(jié)果提示出現(xiàn)此類影像學(xué)特征時(shí)胸腺瘤的惡性程度較高，且腫瘤生長(zhǎng)較為活躍。

總之，胸腺瘤螺旋CT影像特征與CKP、VEGF表達(dá)明顯相關(guān)，為胸腺瘤的診斷提供了一種便捷的方法，對(duì)該病的臨床診斷及治療具有重要價(jià)值。