曲妥珠單抗聯(lián)合TC方案治療HER—2過度表達乳腺癌的效果及安全性

王曉梅　王松芝　歐江華

[摘要] 目的 探討曲妥珠單抗聯(lián)合多西他賽、環(huán)磷酰胺化療方案（TC）治療人類表皮生長因子受體2（HER-2）過度表達乳腺癌的效果和安全性。 方法 選取2015年10月～2016年10月于新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院就診的79例乳腺癌患者作為研究對象，采用隨機數(shù)字表法分為研究組與對照組，其中研究組38例，對照組41例。對照組患者在乳腺癌根治術(shù)前采用TC聯(lián)合化療，研究組在對照組基礎(chǔ)上采用曲妥珠單抗治療。治療18周后，比較兩組患者的治療效果、不良反應(yīng)發(fā)生率，比較兩組治療前后HER-2蛋白、B7同源體（B7-H1）及白細胞介素-2（IL-2）表達情況。 結(jié)果 治療后研究組的總有效率顯著高于對照組（P < 0.05）；治療后兩組HER-2過表達率均顯著降低（P < 0.05），且研究組治療后HER-2過表達率顯著低于對照組（P < 0.05）；研究組治療后B7-H1、IL-2陽性表達率均較治療前顯著降低（P < 0.05）；兩組患者治療后不良反應(yīng)發(fā)生率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。 結(jié)論 曲妥珠單抗聯(lián)合TC方案可有效降低HER-2過度表達乳腺癌患者的HER-2蛋白、B7-H1和IL-2表達含量，提高臨床治療效果，且不會增加用藥風(fēng)險。

[關(guān)鍵詞] 曲妥珠單抗；HER-2過度表達；乳腺癌

[中圖分類號] R734 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2018）04（b）-0104-04

[Abstract] Objective To investigate the efficacy and safety of Trastuzumab combined with Docetaxel and Cyclophosphamide chemotherapy in the treatment of HER-2 overexpression breast cancer. Methods From October 2015 to October 2016， 79 cases of breast cancer patients in Cancer Hospital Affiliated to Xinjiang Medical University were selected. The patients were divided into the study group （38 cases） and the control group （41 cases） according to the random number table method. The control group was treated with TC combined chemotherapy before radical mastectomy. The study group was treated with Trastuzumab on the basis of control group. After 18 weeks of treatment， the curative effect and adverse reaction rate of the two groups were compared. The results of HER-2 protein， B7-H1 and IL-2 expression before and after treatment were compared. Results After treatment， the total effective rate （RR） of the study group was significantly higher than that of the control group （P < 0.05）. After treatment， HER-2 overexpression rates of the two groups were significantly reduced than before treatment （P < 0.05）， and the overexpression rate of the study group was significantly lower than that of the control group （P < 0.05）. The positive expression rates of B7-H1 and IL-2 in the study group after treatment were significantly lower than those before treatment （P < 0.05）. Adverse reactions occurred in both groups after treatment had no significant difference （P > 0.05）. Conclusion Trastuzumab combined with TC regimen in the treatment of patients with HER-2 overexpression breast cancer can effectively reduce the expression of HER-2 protein， B7-H1 and IL-2， improve the clinical curative effect， which can not increase the risk of medication.

[Key words] Trastuzumab； HER-2 overexpression； Breast cancer

在我國乳腺癌的發(fā)病率在近十幾年總體呈現(xiàn)上升趨勢，流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示，全國城市地區(qū)女性乳腺癌每年新發(fā)病例約為15.8萬，位居城市女性發(fā)病癌癥之首[1]。因此，如何有針對性的治療乳腺癌是臨床工作中亟待解決的重要課題。有文獻報道，20%～25%的乳腺癌患者呈表皮生長因子受體-2（human epidermal growth factor receptor 2，HER-2）的過度高表達狀態(tài)，HER-2的表達與腫瘤的強侵襲性、高復(fù)發(fā)率和高死亡率有關(guān)[2]。多西他賽和環(huán)磷酰胺（Docetaxel and Cyclophosphamide，TC）聯(lián)合化療是以紫杉類為基礎(chǔ)的化療治療方案，屬于新輔助化療的給藥方案[4-5]，聯(lián)合化療方案多用于術(shù)前控制乳腺癌的發(fā)生發(fā)展，但對HER-2陽性的乳腺癌患者因耐藥對化療藥物不敏感，導(dǎo)致治療效果不理想。曲妥珠單克隆抗體是以HER-2為靶向目標來抑制腫瘤細胞增殖并誘導(dǎo)腫瘤細胞死亡的生物制劑[3]，其用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌的治療和術(shù)后的輔助治療，與TC化療方案聯(lián)合應(yīng)用理論上可以提高HER-2過度表達乳腺癌患者的治療效果。本文旨在探討曲妥珠單抗聯(lián)合TC輔助化療方案對HER-2過度表達型乳腺癌患者病灶組織中相關(guān)指標的表達結(jié)果，評估該治療方案對HER-2過度表達型乳腺癌的臨床治療效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年10月～2016年10月于新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院（以下簡稱“我院”）就診的79例乳腺癌患者作為研究對象。納入標準：①符合中國抗癌協(xié)會《乳腺癌診治指南與規(guī)范（2013版）》[6]中對乳腺癌的相關(guān)診斷標準；②經(jīng)病理與免疫組化聯(lián)合熒光原位雜交技術(shù)檢測確診結(jié)果為HER-2過度表達的乳腺癌患者；③患者知情同意并簽署知情同意書。排除標準：①入組前有放化療治療史；②合并乳腺組織慢性炎癥、其他臟器病變、自身免疫性疾病、原發(fā)性惡性腫瘤和凝血功能障礙；③合并有精神疾病。采用隨機數(shù)字表法將患者分為研究組與對照組，其中，研究組38例，對照組41例。研究組患者平均年齡（40.5±4.7）歲；平均腫瘤大?。?.8±1.2）cm；浸潤性導(dǎo)管癌16例，浸潤性小葉癌13例，黏液腺癌8例，髓樣癌1例；TNM分型為Ⅰ級5例，Ⅱ級25例，Ⅲ級8例；對照組患者年齡（43.2±3.6）歲；腫瘤大小（4.4±2.5）cm；浸潤性導(dǎo)管癌14例，浸潤性小葉癌15例，黏液腺癌9例，髓樣癌3例；TNM分型為Ⅰ級4例，Ⅱ級26例，Ⅲ級11例。兩組患者的年齡、腫瘤大小、腫瘤類型、TNM分型比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 兩組患者采取相同的術(shù)式且由同一手術(shù)組醫(yī)師操作。兩組患者均采用PICC管行深靜脈管化療。對照組采用TC聯(lián)合化療方案：每日使用75 mg/m2多西他賽（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，生產(chǎn)批號：HZ0150609、HZ20151002）聯(lián)合500 mg/m2環(huán)磷酰胺（江蘇盛迪醫(yī)藥有限公司，生產(chǎn)批號：035460、035670），每3周為1個治療周期，持續(xù)治療6個周期。研究組患者在對照組TC聯(lián)合治療方案基礎(chǔ)上再加用曲妥珠單抗（美國羅氏制藥有限公司，生產(chǎn)批號：S20150104、S20151124）靜脈滴注，第1周治療劑量為4 mg/kg，第2～18周劑量為2 mg/kg，每周給予1次，持續(xù)治療18周。待兩組患者化療結(jié)束后2周，行乳腺癌改良根治術(shù)。

1.2.2 HER-2蛋白、B7-H1及IL-2檢測方法 治療前組織樣本通過穿刺腫瘤部位獲取，治療后組織樣本通過手術(shù)切除組織獲取，兩次組織取樣部位保持一致。經(jīng)臨床取得的乳腺癌組織樣本采用10%中性甲醛固定，經(jīng)常規(guī)脫水后制成石蠟切片，放置于-80℃保存?zhèn)溆么郎y。免疫組化方法：取組織石蠟切片，采用二甲苯-100%酒精-100%酒精-90%酒精-80%酒精-70%酒精順序進行脫蠟，用水、PBS緩沖液洗3次，每次5 min，加入3%過氧化氫溶液于37℃孵育10 min，再加入PBS緩沖液沖洗3次，每次5 min，加入pH 9.0的EDTA于100℃反應(yīng)7 min，PBS沖洗后，加入一抗，4℃過夜孵育，第2天加入二抗，37℃孵育30 min，加入試劑盒中的SP試劑37℃孵育30 min，按照試劑盒方法進行沖洗、染色，最后脫水、透明、封片，進行鏡檢。每例標本鏡下隨機觀察10個視野（400×），每個視野計數(shù)100個細胞，記錄細胞著色強度評分×細胞百分比評分。

1.3 觀察指標與評價標準

1.3.1 療效評價 采用中國抗癌協(xié)會《乳腺癌診治指南與規(guī)范（2013版）》的相關(guān)標準進行評估。①完全緩解（CR）：影像學(xué)復(fù)查顯示病灶完全消失；②部分緩解（PR）：影像學(xué)復(fù)查顯示病灶體積縮小50%以上；③疾病穩(wěn)定（SD）：影像學(xué)復(fù)查顯示病灶體積縮小0～50%或增加0～25%；④疾病進展（PD）：像學(xué)復(fù)查顯示病灶體積增加25%以上或出現(xiàn)新病灶?？傆行В≧R）=CR+PR。

1.3.2 HER-2蛋白表達評估[7] 無著色或細胞膜著色的腫瘤細胞計數(shù)≤10%記為（-）；微弱、不完整細胞膜著色的腫瘤細胞計數(shù)>10%記為（+）；弱至中度完整細胞膜著色的腫瘤細胞計數(shù)>10%記為（++）；清晰完整細胞膜著色的腫瘤細胞計數(shù)>10%記為（+++）。HER-2蛋白非過度表達記為（-）或（+），HER-2蛋白的過度表達記為（+++）；檢測記為（++）的患者需要再次進行FISH檢測，檢查結(jié)果以（+）為HER-2蛋白過度表達，其他則為非過度表達。

1.3.3 B7-H1和IL-2蛋白表達評估[8] B7-H1和IL-2的陽性物質(zhì)均為棕黃色顆粒物且細胞膜及細胞質(zhì)著色。細胞著色強度評分×細胞百分比評分結(jié)果≥3分記為陽性表達。其中，細胞著色包括無色、淡黃色、棕黃色和棕黃色，分別記為0、1、2、3分。細胞百分比評分：0分為無陽性細胞，1分為陽性細胞計數(shù) ≤10%，2分為陽性細胞計數(shù)11%～50%，3分為陽性細胞計數(shù)51%～75%，4分為陽性細胞計數(shù)>75%。

1.3.4 安全性評價 記錄治療后兩組患者肝損害、胃腸道反應(yīng)、白細胞計數(shù)和心臟毒性發(fā)生例數(shù)，計算不良反應(yīng)發(fā)生率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者療效比較

治療后，研究組RR為76.3%，顯著高于對照組的53.7%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 兩組患者治療前后病灶組織HER-2、B7-H1與IL-2表達比較

治療后，兩組HER-2過表達率均顯著降低（P < 0.05），其中研究組治療后過表達率顯著低于對照組（P < 0.05）。研究組治療后B7-H1、IL-2陽性表達率均較治療前顯著降低（P < 0.05），且均低于對照組治療后（P < 0.05）。見表2。

2.3 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較

兩組患者治療后不良反應(yīng)發(fā)生率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。見表3。

3 討論

乳腺癌是在女性群體中高發(fā)的一種惡性腫瘤，目前在臨床研究報道中沒有明確乳腺癌的發(fā)病機制，通過對乳腺癌的流行病學(xué)調(diào)查可以發(fā)現(xiàn)其在25～55歲的女性人群中具有較高發(fā)病率[9-11]。目前認為乳腺癌并不是僅僅局限在乳房的的局部病變，僅用手術(shù)手段來切除乳腺癌病灶遠遠不能控制其復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。隨著新輔助治療開始在臨床中得到普及，大量臨床應(yīng)用研究認為，在乳腺癌術(shù)前應(yīng)用化療方案對患者早期的微小轉(zhuǎn)移灶進行一定程度的控制，從而延長患者的生存時間，術(shù)前的化療應(yīng)用對于控制乳腺癌的局部復(fù)發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移具有重要的臨床意義[12-13]。術(shù)前化療是采用全身化療加乳腺癌改良根治術(shù)的方式提升抗癌效果。治療乳腺癌的常用化療藥物為蒽環(huán)類和紫杉醇類，這種藥物可以很好地控制術(shù)前乳腺癌的進展。由于HER-2陽性的乳腺癌患者因耐藥對化療藥物不敏感，導(dǎo)致術(shù)前僅應(yīng)用蒽環(huán)類和紫杉醇類進行化療療效不理想[14-15]。曲妥珠單抗是一種作用于HER-2受體的靶向治療HER-2陽性乳腺癌的單克隆抗體[16-17]，具有治療特異性，因此在理論上，化療治療聯(lián)合曲妥珠單抗用于乳腺癌根治術(shù)前治療，可以提高HER-2陽性乳腺患者的治療效果，縮短術(shù)后恢復(fù)時間，提高乳腺癌的治療預(yù)后。

通過本研究可見，治療后研究組RR為76.3%，顯著高于對照組的53.7%（P < 0.05）；治療后兩組HER-2過表達率均顯著降低（P < 0.05），其中，研究組治療后HER-2過表達率顯著低于對照組（P < 0.05）。HER-2是分子量為185 kD的跨膜糖蛋白，在人體乳腺、腸道、胃部和心臟等器官均有表達，其異常激活常會導(dǎo)致腫瘤的生長、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。曲妥珠單抗是用于各期HER-2過表達乳腺癌治療的靶向治療藥物，其機制主要是阻礙HER-2受體二聚體的形成。張綱領(lǐng)等[18]研究采用紫杉醇聯(lián)合卡鉑新輔助化療加用曲妥珠單抗對HER-2陽性乳腺癌患者進行治療，結(jié)果認為4個療程的紫杉醇聯(lián)合卡鉑單周化療方案加曲妥珠單抗對HER-2陽性乳腺癌患者治療具有較好效果及耐受性。本研究中在TC方案基礎(chǔ)上加用HER-2靶向治療的曲妥珠單抗取得了較好療效。

進一步考察TC方案聯(lián)合曲妥珠單抗治療的安全性。結(jié)果顯示，研究組治療后B7-H1、IL-2陽性表達率均較治療前顯著降低（P < 0.05）。劉鴻飛等[19]研究認為，免疫共刺激分子B7-H1的表達與乳腺癌細胞化療敏感性相關(guān)，上調(diào)B7-H1表達可減弱乳腺癌細胞對化療藥物表柔比星和多西他賽的敏感性。鄒小盼等[20]研究發(fā)現(xiàn)，B7-H1在乳腺癌組織中的陽性表達率明顯高于乳腺良性病變，而IL-2在乳腺癌組織中的陽性表達率明顯低于乳腺良性病變；在44例乳腺癌患者中，腫瘤直徑>2 cm、組織學(xué)分級較高、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HER-2陽性以及TNM分期ⅢA～Ⅳ期者，其B7-H1的表達較高，認為B7-H1、IL-2與乳腺癌病情的嚴重程度相關(guān)，兩者存在聯(lián)合參考價值。本研究顯示，兩組患者治療后肝損害、胃腸道反應(yīng)、白細胞計數(shù)和心臟毒性的不良反應(yīng)發(fā)生率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），說明在提高治療效果的同時，并不增加TC化療方案的不良反應(yīng)發(fā)生率，其是一種合理、安全的術(shù)前治療方案。

綜上所述，曲妥珠單抗聯(lián)合TC方案治療HER-2過度表達乳腺癌患者可有效降低HER-2蛋白、B7-H1和IL-2的表達含量，提高HER-2過度表達乳腺癌的臨床治療效果，同時不會增加不良反應(yīng)發(fā)生率，可以在臨床治療中推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2018-01-08 本文編輯：程 銘）