MTHFR和MTRR基因多態(tài)性與寧夏高血壓患者血漿同型半胱氨酸水平的相關(guān)性分析

田進(jìn)海，李 璞，張 旭，黃 琦，姜 敏*

（1.寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院生物芯片工程研究中心，寧夏 銀川 750004；2.寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院心腦血管病醫(yī)院，寧夏 銀川 750003）

亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）是甲硫氨酸-葉酸代謝通路中的關(guān)鍵酶，與甲硫氨酸合成還原酶（MTRR）一起，維持機體內(nèi)葉酸正常代謝。另外，它們還參與維持體內(nèi)正常的同型半胱氨酸（Hcy）水平。MTHFR C677T（rs1801133）、A1298C（rs1801131）和MTRR A66G（rs1801394）位點的不同基因型對這兩種酶活性影響比較大，使得葉酸代謝關(guān)鍵酶活性降低，引起葉酸代謝障礙，造成葉酸水平降低及高同型半胱氨酸血癥[1]。對于MTHFR基因異常的人，MTHFR酶活性明顯降低，造成葉酸代謝障礙，導(dǎo)致新生兒神經(jīng)管畸形、唐氏綜合癥、唇腭裂及心血管等疾病的發(fā)病風(fēng)險明顯增高[2]，這類人需要補充更多的葉酸才能達(dá)到預(yù)期的效果。高同型半胱氨酸是高血、腦卒中及冠心病等心血管疾病的危險因素[3]，因此研究MTHFR和MTRR在高血壓人群的分布特征及對血漿同型半胱酸水平的影響對預(yù)防心血管疾病具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年1月至2017年12月寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院高血壓患者798作為研究對象。高血壓診斷按照《中國高血壓防治指南2010》的診斷標(biāo)準(zhǔn)，收縮壓≥ 140 mmHg或舒張壓≥90 mmHg。排除肝腎功能異常、患有其他心血管疾病的及其他嚴(yán)重疾病史的患者。

1.2 同型半胱氨酸測定

選用歐普蘭公司OP-162 微量熒光檢測儀檢測血漿同型半胱氨酸水平。

1.3 基因分型

采用Promega試劑盒（Wizard，Genomic DNA Purification Kit）提取DNA，針對MTHFR和MTRR位點設(shè)計特異性引物rs1801133（F：5-TGAAGGAGAAGGTGTCT GCGGA-3，R：5-AGGACGGTGCGGTGAGAGTG-3）、rs1801131（F：5-CTTTGGGGAGCTGAAGGACTACTA-3，R：5-CACTTTGTGGACCATTCCGGTTTG-3）和rs1801394（F：5-GCAAAGGCCATCGCA GAAGACAT -3，R：5-GTGAAGATCTGCAGAAAATCCATGTA-3），利用Roche480儀器，采用高分辨率溶解曲線（high-resolution melting，HRM）法檢測三個位點的基因型。

1.4 統(tǒng)計分析方法

采用SPSS 23.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計量資料以“±s”表示，應(yīng)用t檢驗，計數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用x2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)有意義。

2 結(jié) 果

2.1 MTHFR和MTRR基因型對血漿同型半胱氨酸水平的影響

結(jié)果顯示，rs1801133 TT基因型Hcy水平最高，其次是CT基因型，CC基因型Hcy水平最低。rs1801131 CC基因型Hcy水平最高，AC基因型次之，AA基因型較低。Hcy水平在各基因型間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。rs1801394位點AG和GG基因型Hcy水平相對較高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 MTHFR和MTRR各基因型間Hcy水平的差異比較

2.2 同型半胱氨酸水平正常組和異常組的基因型差異比較

rs1801133和rs1801131的基因型在Hcy正常組和異常組差異具有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05），rs1801394在Hcy正常組和異常組間沒有統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。見表2。

表2 同型半胱氨酸不同分組間基因型差異比較

3 討 論

血液中Hcy濃度的升高受遺傳、環(huán)境、飲食等多因素影響，在忽略環(huán)境等外部因素的影響下，相關(guān)代謝酶的基因突變引起該酶缺陷或活性下降，進(jìn)而導(dǎo)致Hcy升高可能是發(fā)病的主要原因之一。高同型半胱氨酸是眾多心血管疾病發(fā)生的危險因素之一，對人類健康產(chǎn)生嚴(yán)重的威脅，高同型半胱氨酸可能與動脈粥樣硬化、腦卒中及冠心病的發(fā)生密切相關(guān)[4]，高血壓是這些疾病的病理基礎(chǔ)。研究高血壓患者血漿同型半胱氨酸水平對預(yù)防心血管疾病至關(guān)重要，MTHFR 和MTRR 基因突變造成酶活性降低是血漿同型半胱氨酸積累的遺傳因素，搞清楚它們之間的這種內(nèi)在關(guān)系對預(yù)防和治療心血管疾病有很大幫助。我們研究發(fā)現(xiàn)寧夏人群高血壓患者的rs1801133位點CT 和TT 基因型，rs1801131位點的CC和AC基因型是血漿高同型半胱氨酸主要影響因素，此外rs1801394位點的GG和AG基因型同樣對血漿同型半胱氨酸的積累產(chǎn)生影響，這三個位點對高血壓患者的Hcy水平的影響是顯著的。

綜上，MTHFR和MTRR基因多態(tài)性對高血壓患者血液Hcy水平的影響是顯著的，對包括高血壓在內(nèi)的心血管疾病的預(yù)防及治療具有重要意義。