長(zhǎng)鏈非編碼RNA基因NRON與肉雞生長(zhǎng)性狀關(guān)聯(lián)分析

杜志強(qiáng)，董翔宇，汪禮建，高卓然，李　輝

（1.農(nóng)業(yè)部雞遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱　150030；2.黑龍江省高校動(dòng)物遺傳育種與繁殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱　150030；3.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱　150030）

長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA）是近年新發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸，缺乏蛋白編碼功能，由RNA聚合酶Ⅱ或Ⅲ轉(zhuǎn)錄生成的RNA[1]，可多層面調(diào)控轉(zhuǎn)錄后和表觀(guān)生物學(xué)等過(guò)程[2-4]。起初，lncRNA被視為轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的“轉(zhuǎn)錄噪音”。隨后研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA可作為生物信號(hào)分子、miRNA吸附“海綿體”、轉(zhuǎn)錄因子引導(dǎo)者、增強(qiáng)子及蛋白支架等，參與轉(zhuǎn)錄本可變剪接、基因組印記、染色體沉默、細(xì)胞周期調(diào)控、蛋白質(zhì)合成等生物學(xué)過(guò)程[5-6]。

NRON是抑制NFAT（Nuclear factor of activated T cells，活化T細(xì)胞核因子）的lncRNA[7]，最初是在一個(gè)表達(dá)序列標(biāo)簽（EST）測(cè)序項(xiàng)目中，通過(guò)篩選512個(gè)保守非編碼RNA序列而被找到[8-9]。NFAT是一類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子家族，在免疫反應(yīng)中對(duì)誘導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄起重要作用[10]。除T細(xì)胞外，免疫細(xì)胞多可表達(dá)該類(lèi)蛋白質(zhì)[11]，如B淋巴細(xì)胞[12]、肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等；NFAT也影響心肌、骨骼肌及神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育[9]。此外，NFAT與脂肪細(xì)胞分化有關(guān)[13-14]。鈣離子依賴(lài)的鈣調(diào)蛋白磷酸酶調(diào)節(jié)NFAT活性[15-16]。隨細(xì)胞內(nèi)鈣水平升高，鈣調(diào)磷酸酶（Cn）被激活，直接脫磷酸以過(guò)磷酸化形式存在于NFAT蛋白，誘導(dǎo)其轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核內(nèi)。轉(zhuǎn)移至核內(nèi)NFAT蛋白結(jié)合于靶基因啟動(dòng)子上，單獨(dú)或與其他轉(zhuǎn)錄因子共同誘導(dǎo)基因表達(dá)。與鈣調(diào)磷酸酶激活通路拮抗的NFAT激酶、糖原合成酶激酶（GSK）、酪蛋白激酶（CK），使NFAT蛋白磷酸化，從核內(nèi)轉(zhuǎn)出至細(xì)胞質(zhì)[17]。NRON則通過(guò)與NFAT形成RNA-蛋白復(fù)合物形式調(diào)節(jié)NFAT脫磷酸作用[18]，參與艾滋病病毒HIV-1復(fù)制過(guò)程[19-20]。目前，雞NRON功能研究國(guó)內(nèi)外無(wú)相關(guān)報(bào)道。

本研究以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)肉雞腹脂雙向選擇系和愛(ài)拔益加（Arbor acres，AA）肉雞群體為材料，檢測(cè)NRON單核苷多態(tài)性，進(jìn)一步分析其同生長(zhǎng)性狀間關(guān)聯(lián)，旨在探討NRON基因影響肉雞肌肉和脂肪組織生長(zhǎng)發(fā)育分子機(jī)制。

1　材料與方法

1.1　材料

東北農(nóng)業(yè)大學(xué)肉雞高、低腹脂雙向選擇品系（NEAUHLF）經(jīng)21個(gè)世代選育，高、低脂系間腹脂重和腹脂率差異顯著。本研究以NEAUHLF第19世代雞群和AA肉雞隨機(jī)群體為試驗(yàn)材料，選用高脂系公雞114只，低脂系公雞121只，AA群體公雞母雞共240只，收集各類(lèi)生長(zhǎng)性狀：肉雞1～7各周齡體重，7周齡屠宰時(shí)胴體性狀。

組織表達(dá)檢測(cè)樣品采集過(guò)程如下：從高、低脂系第19世代（G19）肉雞出生后1周齡開(kāi)始取組織樣品，每周采樣一次，直至7周齡。取樣分為兩組：高脂系公雞和低脂系公雞。禁食10 h后稱(chēng)量體重并屠宰，屠宰后稱(chēng)量腹脂重，計(jì)算腹脂率（腹脂重/體重）。采集腹脂、大腦、肝臟、腎臟、脾臟、心臟、肌胃、腸系膜周?chē)?、皮下脂、肌胃周?chē)?0種組織。樣品于0.75%氯化鈉中清洗，液氮中速凍，-80℃保存待用。

1.2　方法

1.2.1引物設(shè)計(jì)與合成

1.2.1.1Real-Time RT-PCR引物設(shè)計(jì)

根據(jù)Ensembl數(shù)據(jù)庫(kù)中雞NRON基因序列（ENSGALG00000025631）和NFAT基因序列（ENSG ALG00000039300），結(jié)合內(nèi)含子位置信息，選擇Primer Premier 5.0設(shè)計(jì)Real-Time RT-PCR表達(dá)檢測(cè)引物。內(nèi)參基因TBP根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)信息，使用Primer Premier 5.0設(shè)計(jì)引物。引物信息見(jiàn)表1。

1.2.1.2酶切引物設(shè)計(jì)

根據(jù)Ensembl數(shù)據(jù)庫(kù)雞NRON基因序列（ENS?GALG00000025631），利用在線(xiàn)軟件WatCut(http://watcut.uwaterloo.ca/)及Primer Premier 5.0設(shè)計(jì)酶切引物（見(jiàn)表2）。

表1　Real-Time RT-PCR表達(dá)檢測(cè)引物Table 1　Primers for Real-Time RT-PCR

表2　酶切引物Table 2　Primers for restriction enzyme cleavage

1.2.2RNA提取及cDNA合成

高、低脂系肉雞（各5只），分別提取組織總RNA（TRIZOL法），通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳分析，Nano?drop檢測(cè)濃度，確保DNA和RNA質(zhì)量和完整性。

取1 mL TRIZOL加入研磨（液氮中）組織樣品50～100 mg，充分混勻。加入0.2 mL氯仿，離心后，水相轉(zhuǎn)移到新離心管。加入400 mL異丙醇沉淀水相中RNA，離心后移去上清。加入1 mL DEPC處理的75%乙醇洗滌，RNA沉淀后移去上清，DEPC水溶解RNA。-80℃冰箱備用。利用PrimeScript?RT reagent Kit with gDNA Eraser（購(gòu)自TaKaRa寶生物公司）獲得去除基因組cDNA。

1.2.3Real-Time RT-PCR

Real-Time RT-PCR反應(yīng)體系為：SYBR?Pre?mix Ex TaqTM（2×）（購(gòu)自寶生物工程（大連）有限公司）5μL，ROX Reference DyeⅡ（50×）0.2μL，上、下游引物10μmol·L-1各0.2μL，cDNA模板1μL，ddH2O 3.4μL，總體積10μL。反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性10 s，95℃變性5 s，60℃復(fù)性延伸34 s，共40個(gè)循環(huán)。溶解曲線(xiàn)95℃15 s，60℃ 10 min，95℃15 s，每個(gè)樣品設(shè)3孔重復(fù)。使用Real-Time RT-PCR儀型號(hào)為ABI 7500。

1.2.4PCR擴(kuò)增

根據(jù)設(shè)計(jì)SNP1和SNP2基因作PCR擴(kuò)增，PCR擴(kuò)增體系為：50 ng·μL-1基因組 1 μL，10×PCR Buffer 0.8 μL，10 mol·μL-1上游引物0.2 μL，10 mol·μL-1下游引物 0.2 μL，10 mmol·μL-1dNTP 0.8 μL，Taq DNA 聚合酶0.1 μL，去離子滅菌水6.7 μL。

PCR擴(kuò)增程序：94℃ 5 min；94℃ 30 s，（55.7～60.7 ℃） 30 s，72 ℃ 30 s，共35個(gè)循環(huán)；72℃7 min。PCR產(chǎn)物于瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，以5μL DNA Marker DL 2000為參照。電泳結(jié)束后利用凝膠成像系統(tǒng)觀(guān)察擴(kuò)增結(jié)果。

NRON基因變異位點(diǎn)可被限制性?xún)?nèi)切酶切割，選用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（Restriction fragment length polymorphisms，RFLP）分型方法。

酶切體系設(shè)計(jì)為：內(nèi)切酶10 U·μL-10.1 μL，10·Buffer 2.0 μL，PCR產(chǎn)物0.3～0.5 μg，去離子水加至20 μL。

將上述反應(yīng)液混勻，于適當(dāng)溫度（依據(jù)不同酶而定）水浴中過(guò)夜消化，將全部反應(yīng)液作瓊脂糖凝膠電泳，檢測(cè)PCR產(chǎn)物酶切效果及片段多態(tài)性。酶切產(chǎn)物經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)并觀(guān)察結(jié)果。

1.2.6基因效應(yīng)分析

根據(jù)群體特點(diǎn)，構(gòu)建基因型分析統(tǒng)計(jì)模型：

其中，Y為性狀觀(guān)測(cè)值，μ為群體均值，G為基因型固定效應(yīng)，L為品系固定效應(yīng)，G×L為基因型和品系互作效應(yīng)，F(xiàn)（L）為品系內(nèi)家系隨機(jī)效應(yīng)，D（F,L）為家系與品系內(nèi)母雞隨機(jī)效應(yīng)，S為性別固定效應(yīng)，G×S為基因型和性別互作效應(yīng)，F(xiàn)為家系隨機(jī)效應(yīng)，D（F）為家系內(nèi)母雞隨機(jī)效應(yīng)，BW（第1或第7周齡體重）為協(xié)方差變量，e為隨機(jī)效應(yīng)。

模型①適于東北農(nóng)業(yè)大學(xué)高、低脂系肉雞雙向選擇系群體，模型②適于A(yíng)A肉雞隨機(jī)群體；使用統(tǒng)計(jì)軟件JMP 7.0檢驗(yàn)基因型與性狀間相關(guān)性，估計(jì)性狀最小二乘均值。P＜0.05為顯著，P＜0.01為極顯著。

2　結(jié)果與分析

2.1　雞NRON基因多態(tài)性檢測(cè)

2.1.1SNP位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)

在婚姻中，不要試圖改造或改變伴侶。人無(wú)完人，每個(gè)人身上都存在優(yōu)點(diǎn)，也存在缺點(diǎn)。當(dāng)初，你之所以選擇和對(duì)方結(jié)婚，肯定是因?yàn)閷?duì)方身上有你欣賞的地方，不妨學(xué)會(huì)欣賞對(duì)方的優(yōu)點(diǎn)，忽略對(duì)方的缺點(diǎn)。一個(gè)善解人意的妻子或丈夫，應(yīng)該尊重對(duì)方的個(gè)性，不要把自己的意志強(qiáng)加給對(duì)方，要給對(duì)方保留一定的自由空間，允許對(duì)方有自己的社交圈子。

本試驗(yàn)根據(jù)19世代高、低脂系肉雞全基因組重測(cè)序數(shù)據(jù)（未發(fā)表結(jié)果），發(fā)現(xiàn)NRON基因上下游共10個(gè)單核苷酸多態(tài)性（SNP）位點(diǎn)。為進(jìn)一步確定SNP真實(shí)性，根據(jù)Ensemble數(shù)據(jù)庫(kù)中雞NRON序列（ENSGALG00000025631），隨機(jī)選取19世代高、低脂系肉雞各3個(gè)基因組樣本為模板，設(shè)計(jì)3段引物及PCR方法擴(kuò)增長(zhǎng)度分別為898、891和837 bp序列（覆蓋2 757 bp，包括NRON基因和其上下游各1 200 bp序列）。PCR產(chǎn)物測(cè)序后與雞基因組（Gallus 5.0）比對(duì)分析，驗(yàn)證10個(gè)SNP，后續(xù)關(guān)聯(lián)分析使用其中兩個(gè)SNP位點(diǎn)，1個(gè)位于NRON基因，另1個(gè)位于NRON基因下游。具體SNP位置信息如圖1所示。

圖1　NRON基因SNP相對(duì)位置信息Fig.1　Relative positions of SNPs discovered in NRON

2.1.2多態(tài)性檢測(cè)及分析

采用SNP-RFLP技術(shù)檢測(cè)NRON基因兩個(gè)SNP位點(diǎn)，高、低脂肉雞和AA肉雞群體中分別檢測(cè)3種基因型。檢測(cè)NRON基因多態(tài)性PCR擴(kuò)增片段產(chǎn)物長(zhǎng)度分別為 217 bp（SNP1）和 202 bp（SNP2）。SNP1片段經(jīng)SspⅠ限制性?xún)?nèi)切酶酶切后產(chǎn)生長(zhǎng)度為143 bp和74 bp片段，根據(jù)條帶不同分別檢測(cè)3種基因型，分別命名為GA基因型（217 bp+143 bp+74 bp）、AA基因型（143 bp+74 bp）和GG基因型（217 bp）；SNP2片段經(jīng)EaeⅠ限制性?xún)?nèi)切酶酶切后產(chǎn)生長(zhǎng)度為166 bp和36 bp片段，根據(jù)條帶不同分別檢測(cè)到3種基因型，分別命名為GG基因型（202 bp）、CC基因型（166 bp+36 bp）和GC基因型（202 bp+166 bp+36 bp）（見(jiàn)圖2）。

關(guān)聯(lián)分析結(jié)果見(jiàn)表3～4，AA肉雞群體中，SNP1位點(diǎn)與生長(zhǎng)性狀無(wú)關(guān)聯(lián)，SNP2位點(diǎn)與心臟重、3周齡和5周齡顯著相關(guān)。高、低脂系肉雞群體中，SNP1位點(diǎn)與肌胃重、骨盆寬、胸角性狀顯著相關(guān)，SNP2位點(diǎn)與心臟重、腺胃重、胸寬性狀顯著相關(guān)。同時(shí)，AA肉雞群體中，雖然SNP2位點(diǎn)多態(tài)性與腹脂重不相關(guān)，但顯性效應(yīng)值大于加性效應(yīng)值，且顯性度為1.3，表明SNP2位點(diǎn)有超顯性且影響腹脂重；高、低脂系肉雞群體中，SNP2位點(diǎn)與胸寬性狀顯著相關(guān)，且顯性效應(yīng)值大于加性效應(yīng)值，顯性度為12.9，表明SNP2位點(diǎn)有超顯性且影響胸寬；但在兩個(gè)群體中，心臟重顯性度均不明顯。

2.2　連鎖不平衡分析

以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)肉雞高、低脂雙向選擇品系第19世代資源群體（G19）235只公雞和AA群體240只公雞和母雞為試驗(yàn)材料，Haploview軟件分析SNP1和SNP2在兩個(gè)群體間連鎖不平衡關(guān)系。結(jié)果表明，AA肉雞群體中，SNP1和SNP2位點(diǎn)間連鎖不平衡程度較強(qiáng)（D'=1.0）（見(jiàn)圖3a）；而高、低脂系肉雞群體中，SNP1與SNP2幾乎不連鎖（D'=0.03，見(jiàn)圖3b）。

圖2　NRON基因SNP多態(tài)片段產(chǎn)物凝膠電泳結(jié)果Fig.2　Gel electrophoresis of NRON SNP RFLP

表3　AA肉雞群體NRON基因SNP多態(tài)性與生長(zhǎng)性狀關(guān)聯(lián)分析Table 3　Association of NRON polymorphisms with growth traits in AA broilers

表4　高、低脂系肉雞群體中NRON基因SNP多態(tài)性與生長(zhǎng)性狀關(guān)聯(lián)分析Table 4　Association of NRON polymorphisms with growth traits in HLF broilers

圖3　AA和高、低脂系肉雞群體中NRON SNP連鎖不平衡分析Fig.3　Linkage disequilibrium analysis of NRON SNPs in AA and HLF broilers

2.3　在不同組織中雞NRON基因表達(dá)規(guī)律

Real-Time RT-PCR檢測(cè)NRON基因高、低脂系肉雞腹部脂肪組織表達(dá)情況（n=5）。

由圖4可知，1、4、7周齡，NRON基因在肉雞高脂系表達(dá)水平顯著高于低脂系（P＜0.05）；且NRON及NFAT基因隨周齡增加，表達(dá)量呈遞增趨勢(shì)。

同時(shí)，檢測(cè)NRON基因在高、低脂肉雞心臟、腺胃、肌胃、胸肌、肝臟、睪丸、脾臟組織中表達(dá)情況（n＝3）。

由圖5可知，NRON基因在睪丸和脾臟組織中不表達(dá)；肌胃、肝臟中表達(dá)差異不顯著；心臟、腺胃、胸肌中表達(dá)差異極顯著（P＜0.01），且在心臟和腺胃中，高脂系顯著高于低脂系，胸肌中，高脂系顯著低于低脂系。

圖4　 雞脂肪組織中NRON及NFAT的mRNA表達(dá)水平Fig.4　mRNA expression patterns of NRON and NFAT in abdominal adipose tissues

圖5　 雞不同組織中NRON的mRNA表達(dá)水平Fig.5　mRNA expression patterns of NRON in different tissues

3　討論與結(jié)論

3.1NRON和NFAT與心臟發(fā)育

本研究發(fā)現(xiàn)NRON與肉雞心臟重極顯著相關(guān)，高、低脂系肉雞中，NRON基因在心臟中表達(dá)差異極顯著，高脂系表達(dá)顯著高于低脂系。研究表明NFAT基因?yàn)檎{(diào)控心房肌生長(zhǎng)發(fā)育重要因子，其功能紊亂導(dǎo)致心臟疾病，在人類(lèi)心臟表達(dá)基因中，13%在啟動(dòng)子區(qū)有NFAT結(jié)合位點(diǎn)，這些基因中20%～40%在心臟病發(fā)病前期發(fā)生表達(dá)修飾[21]。NFAT激活由鈣調(diào)磷酸酶介導(dǎo)，對(duì)于肥厚心肌組織中心肌細(xì)胞基因表達(dá)有重要作用[22]，Putt等研究表明NFAT是心肌肥大反應(yīng)調(diào)節(jié)元件[23]。在心肌肥大心臟中，NFAT脫磷酸化增強(qiáng)自身核定位和轉(zhuǎn)錄活性[24-25]，導(dǎo)致NFAT活性在患心臟病或年老患者中均明顯增強(qiáng)[26]。同時(shí)，抑制NFAT基因活性可干擾心肌肌鈣蛋白基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程，導(dǎo)致心房肌變薄[10]。NRON基因作為NFAT抑制物[9]，作為一種新生物標(biāo)記可預(yù)測(cè)心臟病[27]。NRON可作研究肉雞心臟生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程標(biāo)記基因。

3.2　NRON與肌肉生長(zhǎng)發(fā)育

除與心臟生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)外，NRON與肉雞其他生長(zhǎng)性狀（3周齡重、5周齡重、腺胃重、胸寬）也顯著相關(guān)（P＜0.05）。高脂系胸肌中NRON表達(dá)水平顯著低于低脂系。NRON基因表達(dá)研究表明，在人胎盤(pán)組織、胸腺、脾臟中NRON高豐度表達(dá)，在睪丸、腎臟、大腦和腎上腺組織中也檢測(cè)到NRON基因較高豐度表達(dá)[9]。小鼠骨骼肌、胸腺中NRON基因高豐度表達(dá)，脾臟、淋巴組織和肺組織也可檢測(cè)明顯表達(dá)[9]。NRON基因Northern雜交結(jié)果同其基因表達(dá)結(jié)果吻合，且NRON轉(zhuǎn)錄本在不同組織中有特異性剪接形式，可能有其他未知生物學(xué)功能[9]。研究結(jié)果暗示NRON與骨骼肌和平滑肌生長(zhǎng)發(fā)育可能相關(guān)。因此，NRON基因與肉雞體重等生長(zhǎng)性狀顯著相關(guān)，胸肌中差異表達(dá)，因此可能被作為重要生產(chǎn)性狀候選基因，應(yīng)用于分子育種和肉雞生產(chǎn)。

3.3　NRON與脂肪組織生長(zhǎng)發(fā)育

NRON及NFAT基因在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)高、低脂系肉雞腹部脂肪組織中表達(dá)差異顯著（P＜0.05），表達(dá)趨勢(shì)一致，均為肉雞高脂系中mRNA表達(dá)水平高于低脂系。NFAT轉(zhuǎn)錄因子家族源自REL（c-Rel）-nuclear factor-κB（REL-NF-κB）轉(zhuǎn)錄因子家族[28]，被認(rèn)定為活化T細(xì)胞中重要組成因子，其受鈣調(diào)磷酸酶調(diào)節(jié)特性決定NFAT在多種生物過(guò)程均有調(diào)節(jié)功能[29-31]，如非免疫細(xì)胞生成[32-33]，心肌形成[34-36]和神經(jīng)回路[36]等。最初并未發(fā)現(xiàn)NFAT與脂肪生成相關(guān)[14,30]，近期Graef等研究發(fā)現(xiàn)其在脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中具有重要作用[37-39]。NFAT可與轉(zhuǎn)錄因子CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白互作形成復(fù)合元件[38-39]，調(diào)節(jié)脂肪生成重要調(diào)節(jié)因子過(guò)氧化物酶增殖體受體γ2（PPARγ2）基因表達(dá)[40-41]，參與脂肪生成；此外，NFAT與脂肪酸結(jié)合蛋白（aP2）同樣有關(guān)[42-43]，在小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞中，NFAT蛋白結(jié)合aP2啟動(dòng)子并反式調(diào)控aP2轉(zhuǎn)錄過(guò)程，影響脂肪細(xì)胞分化[44]。

作為脂肪生成重要調(diào)控因子，去乙酰化酶SIRT1不僅結(jié)合NF-κB使其去乙?；?，抑制NF-κB轉(zhuǎn)錄激活活性[45]，還抑制NFAT活性[46]，抑制脂肪生成。NFAT與脂肪分化標(biāo)志基因脂聯(lián)素密切相關(guān)。NFAT家族成員NFAT3/c4通過(guò)結(jié)合脂聯(lián)素啟動(dòng)子區(qū)，激活脂聯(lián)素啟動(dòng)子活性，調(diào)控其在小鼠3T3-L1脂肪細(xì)胞中表達(dá)[47]。綜上，NFAT可通過(guò)多種分子機(jī)制促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化，NRON則通過(guò)抑制NFAT脫磷酸化而促進(jìn)脂肪分化過(guò)程。

3.4　NRON功能性SNP鑒定

通過(guò)連鎖不平衡分析發(fā)現(xiàn)NRON基因中SNP1和SNP2位點(diǎn)在高、低脂系肉雞群體中連鎖不平衡程度較強(qiáng)，且兩個(gè)位點(diǎn)與生產(chǎn)性狀關(guān)聯(lián)分析結(jié)果不同。通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)在線(xiàn)預(yù)測(cè)，發(fā)現(xiàn)NFAT蛋白結(jié)合NRON序列十分接近SNP1（未發(fā)表結(jié)果）。表明SNP1位點(diǎn)可能影響NRON與NFAT形成RNA-蛋白復(fù)合物，參與NRON調(diào)控NFAT功能分子生物學(xué)過(guò)程。本研究?jī)H檢測(cè)NRON基因單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)與生產(chǎn)性狀間相關(guān)及組織中表達(dá)情況，需進(jìn)一步開(kāi)展SNP功能性鑒定和相關(guān)作用機(jī)制分析，揭示NRON與肌肉和脂肪性狀間分子調(diào)控機(jī)制。