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    紫薯葛根酸奶發(fā)酵工藝優(yōu)化及其抗氧化性研究

    2018-07-09 08:00:48史田田
    中國釀造 2018年6期
    關(guān)鍵詞:紫薯白砂糖復(fù)原

    徐 艷,史田田

    (荊楚理工學(xué)院 生物工程學(xué)院,湖北 荊門 448000)

    酸奶是通過乳酸菌發(fā)酵制成的風(fēng)味宜人、營養(yǎng)豐富的乳制品。與鮮奶相比,其營養(yǎng)成分更加豐富,并且更容易被人體吸收利用。隨著我國人民的生活水平不斷提高,人們對酸奶質(zhì)量與風(fēng)味的要求也越來越高。基于消費者的不同需求,有必要研發(fā)不同功能的酸奶產(chǎn)品[1-4]。

    酸奶中的乳酸菌和在發(fā)酵過程中所產(chǎn)生的氨基酸、多肽均有一定的抗氧化能力[5]。紫薯(Solanum tuberdsm)具有較高的營養(yǎng)價值,含有硒、花青素、纖維素等多種成分,具有一定的抗氧化性[6]。葛根(Pueraria lobata)為豆科植物葛的根,是藥食兩用的物質(zhì),含有葛根素、葛根素木糖苷等異黃酮成分及鐵、鈣、鋅、硒等礦物質(zhì)元素,具有較強的抗氧化性[7-8]。近幾年來多人將具有各種營養(yǎng)成分的植物與牛乳相結(jié)合發(fā)酵生產(chǎn)保健酸奶。曹亞麗等[9]以紫薯、牛乳為原料,經(jīng)發(fā)酵劑發(fā)酵確定了最佳發(fā)酵工藝條件;李亞軍等[10]以葛根、牛奶為主要原料制備了葛根酸奶;趙叢叢[11]以紫薯和純牛奶為原料,通過單因素及正交試驗制得了紫薯酸奶。國外也有相關(guān)研究[12-16]。但未見紫薯葛根酸乳發(fā)酵生產(chǎn)及其抗氧化活性方面的報道。本試驗以紫薯、葛根和脫脂奶粉為原料,采用正交試驗優(yōu)化紫薯葛根酸奶發(fā)酵工藝,并對其理化性質(zhì)及抗氧化活性進行研究。旨在為紫薯葛根酸奶的發(fā)酵工藝提供參考,為酸乳保健產(chǎn)品的開發(fā)提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    紫薯(廣紫薯1號):湖北省荊門市東寶區(qū)種植;野生葛根:湖北鐘祥市客店鎮(zhèn)市售;奶粉:內(nèi)蒙古伊利實業(yè)集團股份有限公司;白砂糖(純度99.8%):廣州福正東海食品有限公司;復(fù)合乳酸菌(嗜熱鏈球菌∶保加利亞乳桿菌=1∶1):北京川秀國際貿(mào)易有限公司。

    α-淀粉酶(50 000 U/mL)、糖化酶(50 000 U/mL):北京索萊寶科技有限公司;鄰苯二甲酸氫鉀、氫氧化鈉、酚酞、維生素C(vitaminC,VC)、過氧化氫、水楊酸、硫酸亞鐵、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)(均為分析純):天津市福晨化學(xué)試劑廠。

    1.2 儀器與設(shè)備

    JY1002電子天平:上海上天精密有限公司;DK-98-11A電熱恒溫水浴鍋、PH20電熱恒溫培養(yǎng)箱:天津市泰斯特儀器有限公司;WK2102電磁爐:廣東美的生活電器制造有限公司;RSD-348T榨汁機:合肥榮事達小家電有限公司;海爾BC/BD-519HK臥式冷藏冷凍轉(zhuǎn)換柜:青島海爾特種電冰柜有限責(zé)任公司。

    1.3 方法

    1.3.1 紫薯葛根酸奶發(fā)酵工藝流程及操作要點[17]

    紫薯漿的制備:選擇外觀優(yōu)良,新鮮成熟的紫薯,清洗干凈之后蒸熟,去皮后置于榨汁機中,按質(zhì)量比1∶4加水打漿,加入α-淀粉酶40 U/g(按紫薯漿進行計算),用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至6.0,90℃酶解25min,待酶解液冷卻至約67℃,加入130 U/g糖化酶,用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至4.5,在67℃條件下糖化1 h,最后用雙層紗布過濾即可得紫薯漿。

    葛根汁的制備:將新鮮葛根清洗干凈、切片、烘干、磨粉,按質(zhì)量比1∶4加水打汁,加入40U/g(按葛根汁進行計算)α-淀粉酶,于90℃、pH 6.0條件下完全液化,再將完全液化的溶液冷卻至約67℃,加入130 U/g糖化酶,在pH值為4.5、67℃的條件下進行糖化1 h,將糖化后的葛根液用雙層紗布過濾,得到的濾液為葛根汁。

    調(diào)配:奶粉按質(zhì)量比1∶4加水制成復(fù)原奶,然后將紫薯漿、葛根汁、復(fù)原奶和白砂糖調(diào)和混勻。

    滅菌:在90~95℃條件下將調(diào)配好的紫薯葛根奶液滅菌30 min。

    接種、發(fā)酵:將滅菌好的紫薯葛根奶液冷卻至約50℃,按質(zhì)量比1∶10接入復(fù)合乳酸菌(保加利亞乳桿菌∶嗜熱鏈球菌=1∶1),混合均勻后分裝入已滅菌的酸乳瓶,擰緊密封,于恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵。

    后熟:發(fā)酵結(jié)束后,將酸乳瓶置于4~6℃冰箱中貯藏12~14 h,測得紫薯葛根酸奶的pH值為4.0~4.5。

    1.3.2 單因素試驗

    選取紫薯漿、葛根汁與復(fù)原奶配比(5∶15∶80、10∶10∶80、15∶5∶80、10∶20∶70、15∶15∶70(V/V))、白砂糖添加量(3%、5%、7%、9%、11%)、發(fā)酵時間(6 h、7 h、8 h、9 h、10 h)和發(fā)酵溫度(35℃、37℃、39℃、41℃、43℃)進行單因素試驗,考察這4個因素對紫薯葛根酸奶品質(zhì)的影響。

    1.3.3 正交試驗[18-19]

    根據(jù)單因素試驗結(jié)果,以感官評分為評價指標(biāo),進行L9(34)正交試驗設(shè)計,優(yōu)化紫薯葛根酸奶的發(fā)酵條件。正交試驗因素與水平見表1。

    表1 酸奶發(fā)酵條件優(yōu)化正交試驗因素與水平Table 1 Factors and levels of orthogonal experiments for formula fermentation conditions optimization

    1.3.4 測定方法

    感官評定標(biāo)準(zhǔn)[17]:組織10名酸奶品評員(男女各5名),在飯后2~3 h對產(chǎn)品的色澤、風(fēng)味、滋味、組織狀態(tài)進行評分,最后取平均值作為最終感官評分結(jié)果,滿分為100分。酸奶感官評分標(biāo)準(zhǔn)見表2。

    表2 酸奶感官評分標(biāo)準(zhǔn)Table 2 Sensory evaluation standards of yogurt

    脂肪、蛋白質(zhì)、酸度、微生物指標(biāo):按GB 19302—2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵乳》的方法進行測定。

    1.3.5 抗氧化性的測定

    DPPH自由基清除能力[15]:為評價添加紫薯葛根后酸奶清除DPPH自由基能力的變化,將其與復(fù)原奶酸奶(未加紫薯、葛根,實驗步驟一樣制成的酸奶)的清除DPPH自由基能力做比較,以VC作為陽性對照。將樣品用蒸餾水進行萃取,配制成5 mg/mL、10 mg/mL、15 mg/mL、20 mg/mL、25mg/mL的溶液。取3mL樣品溶液,加入3mL0.16mmol/L的DPPH溶液,在25℃條件下加熱15min,然后在波長517nm處測定吸光度值(Ai);取3 mL樣品溶液,加3 mL蒸餾水,在波長517 nm處同樣波長條件下測定樣品本底吸光度值(Aj);以蒸餾水代替樣品作為空白對照測定空白吸光度值(A0),以VC作為陽性對照。所有樣品均重復(fù)測定3次。DPPH自由基清除率(R)計算公式如下:

    式中:Ai為樣品吸光度值;Aj為樣品本底吸光度值;A0為空白吸光度值。

    羥基自由基清除能力[15]:同上,分別量取4mL5mg/mL、10 mg/mL、15 mg/mL、20 mg/mL、25 mg/mL的樣品溶液,9mmol/L的FeSO40.5mL,9mmol/L水楊酸0.5mL,8.8mmol/L的H2O20.5mL,混合均勻后,置于37℃水浴鍋中加熱30 min,在波長510 nm處測定樣品吸光度值(A)i。以0.5 mL蒸餾水代替8.8 mmol/L H2O2,在波長510 nm處測定樣品本底吸光度值(A)j,以蒸餾水代替樣品作為空白對照測定空白吸光度值(A0),以VC作為陽性對照。所有樣品均重復(fù)測定3次,羥基自由基清除率計算公式同上。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素試驗

    2.1.1 紫薯漿、葛根汁與復(fù)原奶的配比對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)的影響

    圖1 紫薯漿、葛根汁與復(fù)原奶的配比對酸奶感官品質(zhì)的影響Fig.1 Effect of the ratio of purple potato slurry,Puerariae lobata juice and reconstituted milk on the sensory quality of yogurt

    由圖1可知,紫薯漿、葛根汁的含量對酸奶的組織狀態(tài)、口感及風(fēng)味有一定的影響。當(dāng)紫薯漿、葛根汁與復(fù)原奶的配比為10∶10∶80(V/V)時,紫薯葛根酸奶的組織狀態(tài)、香味、口感評分最高,其組織狀態(tài)和凝固狀態(tài)、黏稠性較好,細膩爽口,有發(fā)酵的奶香味及紫薯葛根特有的香氣。因此,選擇最佳紫薯漿、葛根汁與復(fù)原奶配比為10∶10∶80(V/V)。

    2.1.2 白砂糖添加量對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)的影響

    圖2 白砂糖添加量對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)的影響Fig.2 Effect of sugar content on the sensory quality of yogurt with purple potato andPueraria lobata

    由圖2可知,感官評分隨著白砂糖添加量的增加呈先升高后下降的趨勢,當(dāng)白砂糖添加量為7%時,感官評定分數(shù)最高,為89分,口味酸甜適中,細膩爽口;當(dāng)白砂糖添加量>7%時,則酸奶感官評分開始下降,酸甜比例失調(diào)、口感過甜,含糖量過高增加酸奶成本且不利于發(fā)酵。因此,選擇白砂糖添加量7%為宜。

    2.1.3 發(fā)酵時間對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)的影響

    圖3 發(fā)酵時間對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)的影響Fig.3 Effect of fermentation time on the sensory quality of yogurt with purple potato andPueraria lobata

    由圖3可知,隨著發(fā)酵時間延長,酸奶感官評分呈先升高后下降的趨勢。當(dāng)發(fā)酵時間為8 h時,酸奶的凝固狀態(tài)和組織狀態(tài)都較好,且無乳清析出,酸甜適中,有發(fā)酵的奶香味及紫薯葛根特有的香氣,其感官評分最高,為90分;當(dāng)發(fā)酵時間<8 h時,產(chǎn)生的乳酸菌數(shù)量太少,發(fā)酵不完全,酸奶的凝固不好,部分未成形,酸味不足,風(fēng)味欠佳,感官評分較低;而發(fā)酵時間>8 h,乳酸菌生長過量、菌種老化,會使酸奶黏稠性欠佳,有分層,酸度過大,風(fēng)味不協(xié)調(diào),感官評分較低。因此,選擇發(fā)酵時間8 h為宜。

    2.1.4 發(fā)酵溫度對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)的影響

    圖4 發(fā)酵溫度對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)的影響Fig.4 Effect of fermentation temperature on the sensory quality of yogurt with purple potato andPueraria lobata

    由圖4可知,感官評分隨著發(fā)酵溫度的上升呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢。發(fā)酵溫度高于41℃時,會導(dǎo)致酸化過快,不利于風(fēng)味物質(zhì)的形成;當(dāng)發(fā)酵溫度低于41℃時,達不到乳酸菌生長的溫度,發(fā)酵不充分,部分酸奶還未成形,還是液體狀態(tài),感官評分較低。發(fā)酵溫度為41℃時,酸奶組織狀態(tài)、凝固狀態(tài)較好,無乳清析出,黏稠性好,酸甜適中,其感官評分最高。故選擇發(fā)酵溫度41℃。

    2.2 正交試驗

    根據(jù)單因素試驗結(jié)果,進行紫薯葛根酸奶發(fā)酵條件優(yōu)化正交試驗,結(jié)果見表3,方差分析結(jié)果見表4。

    表3 酸奶發(fā)酵條件優(yōu)化正交試驗結(jié)果與分析Table 3 Results and analysis of orthogonal experiments for formula fermentation conditions optimization

    由表3可知,RD>RC>RA>RB,4種因素對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)影響大小依次為發(fā)酵溫度(D)>發(fā)酵時間(C)>紫薯漿、葛根汁與復(fù)原奶配比(A)>白砂糖添加量(B)。

    根據(jù)K值可知最佳因素組合為A2B2C2D2,即紫薯漿∶葛根汁∶復(fù)原奶配比=10∶10∶80(V/V),白砂糖添加量7%,發(fā)酵時間8 h,發(fā)酵溫度41℃。在此發(fā)酵條件下進行3次驗證試驗,紫薯葛根酸奶感官評分平均值為94分,高于正交試驗各組的分數(shù)。

    表4 正交試驗結(jié)果方差分析Table 4 Variance analysis of orthogonal experiments results

    由表4可知,發(fā)酵溫度、發(fā)酵時間及紫薯、葛根與復(fù)原奶配比這3個因素對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)有極顯著的影響(P<0.01),白砂糖添加量對紫薯葛根酸奶感官品質(zhì)有顯著的影響(P<0.05),4個因素影響的主次順序為發(fā)酵溫度(D)>發(fā)酵時間(C)>紫薯、葛根與復(fù)原奶配比(A)>白砂糖添加量(B),與極差分析結(jié)果一致。

    2.3 DPPH自由基和羥基自由基清除能力的測定

    按1.3.6抗氧化性的測定方法對紫薯葛根酸奶、VC、復(fù)原奶酸奶清除DPPH自由基、羥基自由基能力進行測定、計算,結(jié)果見圖5~圖6。

    圖5 不同樣品對DPPH自由基清除率的影響Fig.5 Effect of different samples on scavenging effect of DPPH free radical

    圖6 不同樣品對羥基自由基清除率的影響Fig.6 Effect of different samples on scavenging effect of hydroxyl free radical

    由圖5、圖6可知,DPPH自由基、羥基自由基清除率都隨紫薯葛根酸奶質(zhì)量濃度增加而增加,其清除能力比VC略低,比復(fù)原奶酸奶要高。紫薯葛根酸奶對DPPH自由基的半清除率濃度(half maximal inhibitory concentration,IC50值)為7.5 mg/mL,對羥基自由基的IC50值為10 mg/mL,而復(fù)原乳酸奶對DPPH自由基的IC50值為42 mg/mL,對羥基自由基的IC50值為38 mg/mL,說明添加紫薯、葛根制作酸奶,其對清除能力大大提高。主要原因是紫薯含有的花青素、硒,葛根含有的異黃酮類成分等會增強酸奶的抗氧化性。

    2.4 產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)

    紫薯葛根酸奶呈淡紫色,有紫薯葛根乳香復(fù)合香味,無異味,凝乳細膩柔和,組織形態(tài)呈固態(tài),無明顯乳清析出。酸奶的理化及微生物指標(biāo)見表5。

    表5 紫薯葛根酸奶理化及微生物指標(biāo)Table 5 Physicochemical and microbiological indexes of yogurt with purple potato andPueraria lobata

    由表5可知,在最佳發(fā)酵工藝條件下所研發(fā)的紫薯葛根酸奶各項理化指標(biāo)符合GB 19302—2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵乳》要求。

    3 結(jié)論

    本研究以紫薯、葛根和奶為原料,加入乳酸菌發(fā)酵制備紫薯葛根酸奶。在單因素試驗的基礎(chǔ)上,通過正交試驗對紫薯葛根酸奶的發(fā)酵工藝參數(shù)進行優(yōu)化。結(jié)果表明,紫薯葛根酸奶的最佳工藝參數(shù)為:紫薯、葛根與復(fù)原奶的比例10∶10∶80(V/V),白砂糖添加量7%,發(fā)酵時間8 h,發(fā)酵溫度41℃。在此最佳條件下,所制得的紫薯葛根酸奶感官評分為94分,呈淡紫色,酸甜可口,細膩柔和,具有發(fā)酵酸乳和紫薯復(fù)合香味,對DPPH自由基的IC50值為7.5 mg/mL,對羥基自由基的IC50值為10 mg/mL,其抗氣化性比復(fù)原奶酸奶高。

    所研發(fā)的紫薯葛根酸奶各項理化指標(biāo)符合GB19302—2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵乳》要求。能為紫薯葛根酸奶的發(fā)酵生產(chǎn)提供參考,為植物型酸乳保健產(chǎn)品的開發(fā)提供理論依據(jù)。

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