PDE4D基因SNP83多態(tài)性與中國人群缺血性腦卒中相關(guān)性的Meta分析

胡毅，張婷，陳文靜，張夏純，葉璐，黎莉

腦卒中具有發(fā)病率高、致殘率高的特點(diǎn)，是一種全球性的公共衛(wèi)生問題。隨著我國人群膳食結(jié)構(gòu)類型的改變及我國社會人口老齡化的加快，每年新發(fā)腦卒中患者約為200萬人，是我國成年人致死、長期致殘及住院的首要原因[1]。腦卒中的治療及護(hù)理費(fèi)用高昂，不僅給患者家庭帶來沉重的負(fù)擔(dān)，也是社會所面臨的嚴(yán)峻的考驗(yàn)。缺血性腦卒中（IS）是腦卒中最常見的類型，是一組復(fù)雜的多基因遺傳病，是基因與環(huán)境因素相互作用的結(jié)果，當(dāng)前已有較多研究關(guān)注基因多態(tài)性與IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的研究[2-4]。

Duggirala等[5]認(rèn)為遺傳因素在卒中的發(fā)生中所占比重約為66%～74.9%，而血脂、糖尿病、血壓等傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素起促進(jìn)作用。2002年Gretarsdottir等[6]卒中基因解碼科學(xué)小組人員在冰島人群中發(fā)現(xiàn)了與家族性缺血性腦血管病相關(guān)的基因磷酸二酯酶4D（PDE4D）基因，該基因與腦動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。PDE4D能降解血漿cAMP的水平，從而促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，促進(jìn)動脈粥樣硬化的形成。該基因被認(rèn)為是21世紀(jì)第一個(gè)，且也是迄今為止唯一新發(fā)現(xiàn)的卒中候選基因。此后大量學(xué)者做了相關(guān)研究，但結(jié)論并不一致，例如美國的一項(xiàng)研究認(rèn)為PDE4D基因與IS有關(guān)，尤其是大動脈性卒中，而對德國人和75歲以下瑞士人的研究中并未發(fā)現(xiàn)PDE4D基因與IS相關(guān)。這可能與種族、地域環(huán)境等因素有關(guān)，雖然我國學(xué)者也做了相關(guān)的研究，但結(jié)果也并不一致。故本研究搜集了目前國內(nèi)外發(fā)表的關(guān)于PDE4D基因SNP83多態(tài)性與中國漢族人群IS相關(guān)性的病例-對照研究[7-20]，并遵照MOOSE（Meta-Analysis of Observational Studies in Epidemiology）標(biāo)準(zhǔn)[21]進(jìn)行系統(tǒng)評價(jià)/Meta分析，以期得出較為明確的結(jié)論，為我國臨床防治缺血性腦卒中提供一定的參考。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①研究設(shè)計(jì)為病例-對照研究；②研究對象經(jīng)臨床確診為IS的漢族人群；③提供各基因型頻率或可利用相關(guān)數(shù)據(jù)計(jì)算出來；④文種限中英文。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 不符合納入標(biāo)準(zhǔn)者，重復(fù)報(bào)告者（選取發(fā)表年限最新的研究），以及無法獲取全文及重要信息者。

1.2 文獻(xiàn)檢索 計(jì)算機(jī)檢索PubMed、EMbase、CNKI、CBM、Wanfang Data和VIP，檢索時(shí)限均為建庫至2017年1月，同時(shí)追溯納入文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)，以增加納入文獻(xiàn)數(shù)量。中文檢索詞包括磷酸二酯酶4D基因、PDE4D、基因多態(tài)性、缺血性腦卒中；英文檢索詞包括phosphodiesterase 4D、polymorphism、Chinese population、ischemic stroke。

1.3 文獻(xiàn)篩選、資料提取及質(zhì)量評價(jià) 由2位研究者根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)篩選和資料提取，提取信息包括：第一作者姓名、發(fā)表時(shí)間、IS診斷標(biāo)準(zhǔn)、樣本量、基因型頻率、對照來源及質(zhì)量評價(jià)的相關(guān)信息。納入研究的質(zhì)量評價(jià)采用NOS量表（病例-對照研究）進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 首先采用χ2檢驗(yàn)各納入研究的對照組是否符合哈迪溫伯格平衡（HWE）定律。然后采用Stata 12.0軟件進(jìn)行Meta分析，計(jì)算各基因模型病例組與對照組IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的比值比（OR）及其95%可信區(qū)間（CI）。應(yīng)用CochraneQ值檢驗(yàn)各研究的異質(zhì)性，以α=0.1為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，若Q值對應(yīng)的P＞0.1，提示各研究間無顯著異質(zhì)性；若P≤0.1，提示各研究間存在顯著異質(zhì)性。然后利用I2值對異質(zhì)性進(jìn)行定量分析：I2≤40%認(rèn)為異質(zhì)性低，40%≤I2≤70%為中等異質(zhì)性，70%≤I2≤100%表示異質(zhì)性高。當(dāng)I2≤40%時(shí)采用固定效應(yīng)模型，否則使用隨機(jī)效應(yīng)模型，并對可能出現(xiàn)的異質(zhì)性來源進(jìn)行亞組分析。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果 初檢出330篇，最終納入14個(gè)病例-對照研究[7-20]，主題均為探討PDE4D基因SNP83多態(tài)性與中國漢族人群IS的相關(guān)性，包括9篇中文文獻(xiàn)，5篇英文文獻(xiàn)。文獻(xiàn)篩選流程圖見圖1，各納入研究的基本特征及NOS質(zhì)量評分見表1。

2.2 Meta分析結(jié)果 各基因模型納入研究間均存在中～高度異質(zhì)性，故采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析?？傮wMeta分析結(jié)果顯示，對于中國漢族人群，PDE4D基因SNP83多態(tài)性與IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無相關(guān)性（Cvs. T：OR=1.13，95%CI：0.95～1.33，P=0.17；CCvs. TT：OR=1.12，95%CI：0.80～1.57，P=0.52；CTvs. TT：OR=1.22，95%CI：0.91～1.63，P=0.23；CCvs.CT+TT：OR=1.10，95%CI：0.81～1.49，P=0.56；CC+CTvs. TT：OR=1.14，95%CI：0.93～1.41，P=0.21；表2）。

亞組分析結(jié)果顯示（表2），符合HWE研究的Meta分析結(jié)果顯示，與T等位基因攜帶者相比，C等位基因攜帶者可能增加IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)（OR=1.18，95%CI：1.02～1.36，P=0.02）；與TT基因型攜帶者相比，CT基因型（OR=1.17，95%CI：1.02～1.34，P=0.03）和CC+TT基因型（OR=1.20，95%CI：1.03～1.40，P=0.02）均可增加IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

3 討論

圖1 納入文獻(xiàn)流程圖

表1 納入研究的基本特征及NOS評分

表2 各基因型總體及亞組分型Meta分析結(jié)果

2002年冰島的deCODE遺傳學(xué)研究組[6]運(yùn)用多種連鎖技術(shù)，對476例卒中患者及其438位親屬進(jìn)行卒中易患基因組篩查后，將卒中易患基因區(qū)域定位于5q12上。經(jīng)進(jìn)一步研究后，發(fā)現(xiàn)編碼PDE4D的基因與卒中有著極為密切的聯(lián)系。此后引起了研究PDE4D的熱潮，幾年時(shí)間內(nèi)，對超過200多個(gè)SNP進(jìn)行了研究，但研究結(jié)果不甚一致，甚至結(jié)論相反，可能與種族、地域等因素有關(guān)。本研究搜集國內(nèi)外發(fā)表的關(guān)于PDE4D基因SNP83多態(tài)性與我國人群IS相關(guān)性的研究[7-20]，進(jìn)行Meta分析。

本Meta分析納入研究的質(zhì)量均≥6分，故可基本認(rèn)為質(zhì)量較可靠。結(jié)果顯示，五種基因模型均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即PDE4D基因SNP83多態(tài)性與中國漢族人群IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無相關(guān)性。各模型均存在一定程度的異質(zhì)性，故均采用隨機(jī)效應(yīng)模型行Meta分析，并通過按對照組是否符合HWE定律、對照組來源進(jìn)行亞組分型后發(fā)現(xiàn)，主要異質(zhì)性來源為對照組不滿足HWE定律的研究。按照對照組是否符合HWE定律進(jìn)行亞組分型研究結(jié)果顯示，攜帶等位基因C人群的IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)較攜帶等位基因T人群增加到1.18倍，CT基因型和CC+CT基因型攜帶人群的IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)分別是TT基因人群的1.17倍和1.20倍。

2011年劉括等[22]的Meta分析結(jié)果顯示，基因型CT人群的IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)與基因型TT人群相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但本研究結(jié)果中，在對照組符合HWE定律的亞組中，基因型CT人群的IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)為基因型TT人群的1.27倍。通過比較后發(fā)現(xiàn)，本Meta分析的樣本量更大，這可能是結(jié)果不同的原因。此外，本Meta分析也有一定的局限性。首先有些基因模型的異質(zhì)性來源不僅僅是對照組不符合HWE定律，對照組來源在一定程度上也是異質(zhì)性的來源；本研究結(jié)果為中國漢族人群，故其外推行受到一定的限制。故本研究結(jié)論還需大樣本的分子流行病學(xué)研究加以驗(yàn)證。

當(dāng)前研究證據(jù)顯示，PDE4D基因SNP83多態(tài)性與中國漢族人群IS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無相關(guān)性。由于納入研究數(shù)量的限制，該結(jié)論尚需進(jìn)一步開展相關(guān)研究進(jìn)行驗(yàn)證。

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