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    高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀同時測定飲料中甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、紐甜的檢測方法研究

    2018-07-05 09:46:28袁月蘭
    食品安全導(dǎo)刊 2018年17期
    關(guān)鍵詞:阿斯巴甜三氯甜味劑

    隨著食品工業(yè)的快速發(fā)展,甜味劑由于甜度高、性質(zhì)穩(wěn)定、熱量小等特點被廣泛應(yīng)用于食品加工行業(yè),為了改善口感,大多數(shù)甜味劑由多種成分復(fù)配使用。但是人工合成甜味劑的安全性已受到廣泛質(zhì)疑, GB 2760-2014對飲料中甜味劑的使用進行了嚴(yán)格的規(guī)定,我國屯制定了一些針對人工合成甜味劑的檢測標(biāo)準(zhǔn),但一般是針對單一甜味劑的,并且這些方法屯存在一些局限性,如甜蜜素的檢測需要衍生;用高效液相以譜-示差檢測器檢測三氯蔗糖,檢出限高;紐甜的響應(yīng)值低,阿斯巴甜的峰容易拖尾等等問題,并且這四種甜味劑,用到的樣品處理方法、儀器流動相等條件都水一致,給日常檢驗增加了工作量。因此,建立一個同時檢測飲料中甜蜜素、阿斯巴甜、紐甜、三氯蔗糖的檢測方法意義重大。

    試驗部分

    試劑和儀器 Agilent 6460超高壓液相-質(zhì)譜聯(lián)用儀、電子天平,氮吹儀、甲酸銨、乙腈、甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、紐甜標(biāo)樣標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)物

    儀器條件 液相條件:安捷倫XDB-C18以譜柱,4.6×100mm,5μm;流速:0.3mL/min;進樣量:5μl;柱溫:30℃流動相比例如下表:

    時間(min)流動相B乙腈(%)0 85 15 3 10 90 3.01 85 15 6 85 15流動相A :5mmoL/L甲酸銨(%)

    質(zhì)譜條件

    MRM監(jiān)測模式下的監(jiān)測條件

    測定步驟

    標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液的配制:精密稱取適量的甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、紐甜標(biāo)準(zhǔn)樣品,用蒸餾水溶解,配制成質(zhì)量濃度為1000μg/mL甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、紐甜單標(biāo)儲備液,備用。

    混合標(biāo)準(zhǔn)工作液:分別用移液管移取一定體積的甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、紐甜單標(biāo)儲備液,混合于容量瓶中,用pH為4.3的水(乙酸調(diào)pH值)定容,配制成甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、紐甜的濃度分別為10μg/mL、10μg/mL、100μg/mL、10μg/mL的混合中間標(biāo)準(zhǔn)溶液。逐級稀釋到甜蜜素、阿斯巴甜、紐甜10~400μg/L,三氯蔗糖100-4000μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

    試樣溶液的制備:稱取10 g樣品,于50 mL離心管中,加入純甲醇溶液20 mL,旋渦充分混勻,4000r/min離心,上清液轉(zhuǎn)移至另一個 50 mL離心管中;使用15 mL甲醇重復(fù)提取殘渣一次,上清液合并入50 mL離心管中(若提取液渾濁,可嘗試加入0.5 mL鎢酸鈉溶液,再離心);

    60-70 ℃水浴對提取液進行氮吹濃縮,體積至10 mL 。

    結(jié)果與討論

    儀器條件選擇 分別比較了電噴霧離子源(ESI)的正離子和氟離子掃描模式,發(fā)現(xiàn)氟離子模式下的目標(biāo)化合物的離子化效率和響應(yīng)值均較高。

    試驗中,選乙腈-甲酸銨為流動相。采用甲醇-水,由于甜蜜素的離子化效率低而為出峰,采用甲醇-甲酸銨,甜蜜素、三氯蔗糖峰型較寬[7],采用乙腈-甲酸銨溶液,4種甜味劑均達到良好的分離和響應(yīng)值。測試了5 、10.、20mmoL/L甲酸銨溶液,發(fā)現(xiàn)三種濃度下,4種甜味劑的相應(yīng)值無較大變化,故選擇5mmoL/L甲酸銨溶液為流動相。

    方法的線性、檢出限 選用甜蜜素、阿斯巴甜、紐甜濃度為10、20、50、100、200、400μg/L,三氯蔗糖濃度為100、200、500、1000、2000、4000μg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,在超高壓液相以譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀上進行測定,以峰面積為Y軸,質(zhì)量濃度為X軸,得到線性回歸方程,根據(jù)根據(jù)方法檢出限(LOD)為基線噪音的3倍,測定方法檢出限,結(jié)果如下

    甜味劑 線性范(μg/L)線性方程相關(guān)系數(shù)檢出限(μg/L)甜蜜素 10~400 Y=10.6845X+26.6140 0.9999 3.0阿斯巴甜 10~400 Y=5.1472X-3.6503 0.9999 7.2三氯蔗糖 100~4000 Y=0.4121X-59.3921 0.9991 29紐甜 10~400 Y=6.9676X+27.9746 0.9992 2.8

    方法的精密度試樣分別稱取6個空白試樣(精確至0.0001g),加入甜蜜素、阿斯巴甜、紐甜為100μg/L,三氯蔗糖濃度為1000μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,測得甜蜜素含量的RSD為3.8%、阿斯巴甜含量的RSD為5.2%、紐甜含量的RSD為6.8%、三氯蔗糖含量的RSD為5.8%。

    方法的準(zhǔn)確度試驗已空白的樣品中添加適量標(biāo)樣,測量其回收率,其回收率為在82%~110%,結(jié)果表明本方法的準(zhǔn)確度良好。

    本文建立了一種采用高效液相以譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀同時測定飲料中甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、紐甜的檢測方法。此方法檢出限遠低于國標(biāo)要求,簡單、便捷、高效,為飲料中超量或違法添加甜味劑的監(jiān)督檢驗提供了科學(xué)優(yōu)質(zhì)的方法,具有較高的實際應(yīng)用價值。

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