視黃醇結(jié)合蛋白的檢測方法及臨床應(yīng)用

趙文生

[摘要] 目的 闡述視黃醇結(jié)合蛋白臨床監(jiān)測方法，探究血清視黃醇結(jié)合蛋白含量檢測臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 通過知網(wǎng)、萬方等數(shù)據(jù)庫搜尋視黃醇結(jié)合蛋白臨床監(jiān)測方法，隨機(jī)選取該院2016年5月—2017年5月收治的148例進(jìn)行免疫比濁法檢測視黃醇結(jié)合蛋白的患者，分析比較患者患病類型以及視黃醇結(jié)合蛋白含量變化情況。結(jié)果 肝系疾病中肝硬化、急慢性肝炎患者血清視黃醇結(jié)合蛋白含量分別為（21.68±2.1）、（28.95±2.7）mg/L，明顯低于正常者（t=2.248、2.265，P<0.05）；腎系疾病患者血清視黃醇結(jié)合蛋白含量明顯高于正常者；營養(yǎng)性疾病中甲狀腺功能減退、消化系統(tǒng)疾病患者的血清視黃醇結(jié)合蛋白含量明顯低于正常者（t=2.236、2.245，P<0.05）。 結(jié)論 免疫比濁法檢測視黃醇結(jié)合蛋白對于明確肝腎功能病變以及營養(yǎng)性疾病具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[關(guān)鍵詞] 視黃醇結(jié)合蛋白；檢測方法；臨床應(yīng)用

[中圖分類號] R4 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）02（c）-0183-03

Detection Method and Clinical Application of Retinol Conjugated Protein

ZHAO Wen-sheng

Clinical Lab， Jianshui Traditional Chinese Medicine Hospital， Honghe State， Jianshui Yunnan Province， 654399 China

[Abstract] Objective This paper tries to explain the clinical detection methods of retinol conjugated protein， and explore the clinical application value of serum retinol conjugated protein contents detection. Methods Searching for clinical detection methods of retinol conjugated protein from database such as CNKI and Wanfang. Then choosing 148 patients who were adopting immunoturbidimetry to check retinol conjugated protein in this hospital from May， 2016 to May 2017. Analyzing and comparing the type of disease as well as the changing situation of retinol conjugated protein content. Results In liver diseases， retinol conjugated protein content of liver cirrhosis patients， and oxyhepatitis and chronic hepatitis patients are separately（21.68±2.1）mg/L and（28.95±2.7）mg/L， which are significantly lower than those of normal individuals （t=2.248，2.265， P<0.05）； the retinol conjugated protein content of kidney disease patients are obviously higher than those of normal individuals. In nutritional diseases， the retinol conjugated protein content of hypothyroidism patients and digestive system disease patients are distinctly lower than that of normal individuals （t=2.236，2.245， P<0.05）. Conclusion Immunoturbidimetry in checking retinol conjugated protein content has significant clinical application value to define liver and kidney function lesion and nutritional diseases.

[Key words] Retinol conjugated protein； Detection methods； Clinical application

臨床研究發(fā)現(xiàn)視黃醇結(jié)合蛋白更多的存在于人體血液及尿液中，可參與機(jī)體維生素A轉(zhuǎn)運(yùn)以及轉(zhuǎn)運(yùn)肝細(xì)胞中視黃醇的作用，且對判定肝腎功能損傷以及營養(yǎng)性疾病的發(fā)展具有重要的意義[1-2]。該次觀察比較該院2016年5月—2017年5月收治的148例進(jìn)行免疫比濁法檢測視黃醇結(jié)合蛋白患者疾病類型以及視黃醇結(jié)合蛋白含量變化情況，從而探究視黃醇結(jié)合蛋白臨床應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取該院收治的148例進(jìn)行免疫比濁法檢測視黃醇結(jié)合蛋白患者，其中有35例為正常，排除肝腎功能以及營養(yǎng)性疾病，男性20例，女性15例。有43例患者患有肝系疾病，其中有23例患者患有肝硬化，有20例患者患有急、慢性肝炎，男性25例，女性18例。有53例患者患有腎系疾病，其中有13例患者患有慢性腎盂腎炎，有14例患者患有慢性腎小球腎炎，有6例患者患有腎結(jié)石，有20例患者患有糖尿病腎病，男性28例，女性25例。有17例患者患有營養(yǎng)性疾病，其中有12例患者患有甲狀腺功能疾病，有7例患者為甲狀腺功能亢進(jìn)，有5例為甲狀腺功能減退，有5例患者患有消化系統(tǒng)疾病，男性6例，女性11例。所有患者年齡均在20～70歲，該次實(shí)驗(yàn)患者在年齡、性別等一般資料上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。所有入選患者均自愿參與該次研究，并簽署了知情同意書，研究獲得醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 視黃醇結(jié)合蛋白臨床檢測方法 登錄萬方、知網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫，輸入黃醇結(jié)合蛋白檢測方法，篩查近3年相關(guān)文獻(xiàn)資料，文獻(xiàn)查閱后總結(jié)視黃醇結(jié)合蛋白檢測方式較多。

1.2.2 視黃醇結(jié)合蛋白臨床應(yīng)用 148例不同疾病類型均采用免疫比濁法檢測視黃醇結(jié)合蛋白濃度，清晨抽取患者3～5 mL空腹靜脈血，高速離心30 min后分離提取血清后分離血清而后使用北京北檢的測定試劑盒以及貝克曼Au680型全自動生化分析儀，取3 mL血清樣本加入250 μL磷酸鹽緩釋液以及聚乙二醇6000，置于37℃環(huán)境下5 min而后再次加入磷酸鹽緩釋液與美國MAYSUN公司生產(chǎn)的羊抗人RBP抗血清，延遲20 s讀空白吸光度A1，5 min后讀終點(diǎn)吸光度A2，黃醇結(jié)合蛋白濃度=樣品吸光度（A2-A1）/校準(zhǔn)吸光度（A2-A1）×校準(zhǔn)濃度。

1.3 觀察指標(biāo)

分析比較患者患病類型以及視黃醇結(jié)合蛋白含量變化情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件統(tǒng)計(jì)分析資料，其中計(jì)量資料用（x±s）表示，并用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

分析比較患者患病類型以及視黃醇結(jié)合蛋白含量變化情況，見表1，肝系疾病患者視黃醇結(jié)合蛋白含量明顯低于正常，腎系疾病患者視黃醇結(jié)合蛋白含量明顯高于正常，營養(yǎng)性疾病患者與正常視黃醇結(jié)合蛋白含量相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

視黃醇結(jié)合蛋白臨床檢驗(yàn)主中放射免疫分析法（RIA）主要是利用放射性核素標(biāo)記抗原可與反應(yīng)體系中未標(biāo)記抗原特異性抗體進(jìn)行結(jié)合從而檢測樣本中視黃醇結(jié)合蛋白含量，其臨床檢測范圍為0～320 mg/L，放射免疫分析法靈敏度、特異性高是臨床常用檢測方法；免疫電泳法（IEP）是利用區(qū)帶電泳免疫雙擴(kuò)散結(jié)合原理對患者尿液標(biāo)本進(jìn)行免疫化學(xué)分析，該操作方法簡便，當(dāng)時(shí)臨床檢驗(yàn)時(shí)間長，難以進(jìn)行全自動分析，臨床檢測下限為15 mL/L，故對于肝腎疾病以及營養(yǎng)性疾病早期病變臨床診斷敏感度、特異性低[3]。酶聯(lián)免疫法（ELISA）是在不損壞抗原或抗體免疫活性的條件下預(yù)先結(jié)合至固相載體表面，而后將受檢樣本與酶標(biāo)抗體遵循一定的程度與固相載體抗原進(jìn)行特異性結(jié)合，通過定性、定量分析樣本中物質(zhì)量，從而檢測視黃醇結(jié)合蛋白含量。該檢測方法可重復(fù)性高，但是視黃醇結(jié)合蛋白含量易受外界影響，故敏感度以及特異性低。免疫比濁法主要是通過比較濁度透光光線吸收量以及免疫復(fù)合物形成量，從而推算出抗原量，該檢測方法操作簡便、快速，可用于自動分析監(jiān)測[4]。

研究發(fā)現(xiàn)視黃醇結(jié)合蛋白廣泛存在于人體尿液以及血液中，血液中視黃醇結(jié)合蛋白是由視黃醇以及前白蛋白組成的復(fù)合體。生理狀態(tài)下，腎小球基底膜孔徑屏障以及電荷屏隙可保持血清視黃醇結(jié)合蛋白處于正常水平，部分低分子量視黃醇結(jié)合蛋白以及體液游離視黃醇結(jié)合蛋白可被腎小球?yàn)V過，大部分視黃醇結(jié)合蛋白在近曲小管被重新吸收分解[5-7]。對于肝腎功能損傷的患者視黃醇結(jié)合蛋白血清含量可出現(xiàn)明顯改變。相關(guān)臨床研究發(fā)現(xiàn)視黃醇結(jié)合蛋白與血清膽紅素、谷草轉(zhuǎn)氨酶以及機(jī)體多種堿性磷酸酶活性成反比，對于肝硬化以及肝炎，血清中視黃醇結(jié)合蛋白含量明顯低于正常水平，該次研究中肝硬化、急慢性肝炎患者血清視黃醇結(jié)合蛋白含量分別為（21.68±2.1）、（28.95±2.7）mg/L，明顯低于正常者也證明了這一點(diǎn)。當(dāng)腎臟發(fā)生病變時(shí)，腎臟血流量降低，腎小球?yàn)V過率降低，故流經(jīng)腎小球的視黃醇結(jié)合蛋白被腎臟上皮細(xì)胞重吸收進(jìn)入人體血液中，導(dǎo)致血清視黃醇結(jié)合蛋白含量升高，當(dāng)出現(xiàn)營養(yǎng)性疾病時(shí)血液中視黃醇結(jié)合蛋白可出現(xiàn)不同濃度的改變，該次研究結(jié)果就顯示甲狀腺功能減退、消化系統(tǒng)疾病患者的血清視黃醇結(jié)合蛋白含量明顯低于正常者，而甲狀腺功能亢進(jìn)患者則明顯高于正常者。周琳等[8]同樣采用免疫透射比濁法測定血清視黃醇結(jié)合蛋白含量，并對照了健康組、腎病組、肝病組患者的血清視黃醇結(jié)合蛋白含量，得出肝病組中急性肝炎、肝硬化患者的血清視黃醇結(jié)合蛋白含量分別為（23.23±11.12）、（26.81±13.33）mg/L，較于健康組的（50.02±12.89）mg/L明顯要低，與該次研究得出的肝硬化、急慢性肝炎患者血清視黃醇結(jié)合蛋白含量低于正常者的結(jié)果一致；而腎病組中糖尿病腎病、腎小球腎炎患者血清視黃醇結(jié)合蛋白含量分別為（83.81±22.31）、（95.16±29.93）mg/L，較健康組明顯要高，與該次研究得出的腎系疾病患者血清視黃醇結(jié)合蛋白含量明顯高于正常者的結(jié)果一致。但周琳等的研究未涉及營養(yǎng)性疾病患者血清視黃醇結(jié)合蛋白含量的變化。

綜上所述，可知免疫比濁法檢測視黃醇結(jié)合蛋白對于明確肝腎功能病變以及營養(yǎng)性疾病具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。該次研究僅涉及肝腎、營養(yǎng)性疾病，未對其他疾病進(jìn)行探究，尚需在消化性疾病、心血管疾病等領(lǐng)域進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

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（收稿日期：2017-11-23）