注射用硫酸奈替米星中11種膠塞添加劑的遷移研究

劉艷 金華 金鵬 陳廣云 李佳

[摘要] 目的 建立同時測定11種膠塞添加劑含量的HPLC法，研究膠塞添加劑向注射用硫酸奈替米星中的遷移情況。方法 采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色譜柱（4.6×50 mm，2.7 μm）；流動相為3相混合體系，A相為水-乙酸（1 000：1），B相為乙腈，C相為異丙醇，梯度洗脫；檢測波長為280 nm。結(jié)果 11種添加劑均在范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.999，回收率在96.7%～111.6%之間。結(jié)論 該方法具有良好的專屬性、檢測靈敏度、精密度、線性和準(zhǔn)確度，可用于注射用硫酸奈替米星膠塞中添加劑遷移的檢測。

[關(guān)鍵詞] 藥用膠塞；添加劑；高效液相色譜；注射用硫酸奈替米星

[中圖分類號] R927 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1672-5654（2018）12（b）-0170-03

藥用膠塞是與藥品直接接觸的藥包材，生產(chǎn)過程中添加了許多化學(xué)添加劑，不可避免的會在膠塞本體內(nèi)殘存一些未被化學(xué)鍵合的反應(yīng)剩余物、不參與反應(yīng)的物質(zhì)、熱分解的產(chǎn)物以及硫化生成物，這些物質(zhì)與藥物之間是否有遷移、吸附甚至發(fā)生化學(xué)反應(yīng)[1-2]，為了確保藥物的安全、有效，因此評價相關(guān)添加劑是否向藥物中遷移很有必要。本文研究并建立了同時測定11種添加劑含量的HPLC法[3-6]，并檢測了不同廠家6批注射用硫酸奈替米星中膠塞添加劑的遷移情況。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

DIONEX UltiMate3000 UHPLC 高效液相色譜儀（Thermo公司）；XS205電子天平（Mettler公司）。

1.2 試藥

添加劑對照名稱廠家含量及批號：抗氧劑1310（Aladdin，98%，D1625133）、對特辛基苯酚（Aladdin，97%，H1511073）、2，4-二特丁基苯酚（J&K、99.5%、LM40Q78）、抗氧劑245（AccuStandard，100%，5787-01）、BHT（Alfa Aesar，99%，5013F26P）、升華硫（天津科密歐化學(xué)試劑，99.5%，20140614）、抗氧劑3114（Aladdin，98%，H1201021）、抗氧劑1010（Aladdin，95.0%，H1506031）、抗氧劑330（Aladdin，99%，J1512033）、抗氧劑1076（Aladdin，98%，D1514012）、抗氧劑168（TCI，98.0%，OPKYD-PP）、溴酚（CNW，98.0%，M125G005）。6批注射用硫酸奈替米星分別為A公司（批號1503011）、B公司（批號150806-4）、C公司（批號B150502）、D公司（批號B15082901）、E公司（批號1510015、1601001）。乙腈、異丙醇為色譜純；其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent Poroshell 120 EC-C18（4.6×50 mm，2.7 μm）；檢測波長：280 nm；進(jìn)樣量：5 μL；柱溫：40℃；流速為2.0 mL/min；流動相：3相混合體系，A相為水-乙酸（1 000：1），B相為乙腈，C相為異丙醇，梯度洗脫[7]，具體程序見表1。

2.2 溶液的制備

2.2.1 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 取溴酚適量，少量二氯甲烷溶解，用丙酮稀釋至濃度為1 100 μg/mL的內(nèi)標(biāo)工作溶液。

2.2.2 混合對照溶液的制備 分別取11種添加劑適量，少量二氯甲烷溶解后，用甲醇稀釋至含內(nèi)標(biāo)溶液的系列濃度對照液。

2.2.3 樣品溶液的制備 取注射用硫酸奈替米星樣品一瓶，加5 mL水溶解，轉(zhuǎn)移至具塞試管中，再加水5 mL至樣品瓶中，振蕩洗滌，合并水至具塞試管中，作為樣品溶液，取樣品溶液，加入適量內(nèi)標(biāo)工作溶液，加入二氯甲烷2 mL，激烈振搖90 s，靜置分層，取下層溶液1 mL，加甲醇4 mL，搖勻，得到樣品測試溶液，平行制備2份。

2.2.4 空白溶液的制備 除不加樣品外，同“樣品溶液的制備”方法配制。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取混合對照溶液及空白溶液進(jìn)樣，根據(jù)各待測物的保留時間加以鑒別，對各待測物的定量采用內(nèi)標(biāo)校正法，通過比較待測物的分析響應(yīng)值與內(nèi)標(biāo)的分析響應(yīng)值來進(jìn)行。結(jié)果表明，空白溶液無干擾，各對照溶液理論板數(shù)均大于4000，相鄰峰之間的分離度均大于1.5（見圖1）。

2.4 線性關(guān)系考察

以各待測物的濃度為Y軸，以各待測物峰面積（Ar）/內(nèi)標(biāo)峰面積（As）×內(nèi)標(biāo)濃度（Cs）的計算值平均值為X軸，建立線性回歸方程。線性范圍和方程及相關(guān)系數(shù)為：抗氧劑1310（0.7～70.5 μg/mL，C=6.693 2×Ar/As×Cs-0.527 9，r=0.999 8）、對特辛基苯酚（0.5～48.4 μg/mL，C=4.795 2×Ar/As×Cs-0.176 0，r=1）、2，4-二特丁基苯酚（0.4～39.9 μg/mL，C=3.530 2×Ar/As×Cs-0.157 9，r=0.999 9）、抗氧劑245（0.4～42.2 μg/mL，C=3.199 5× Ar/As×Cs+0.047 3，r=1）、抗氧劑BHT（0.6～56.8 μg/mL，C=4.274 5×Ar/As×Cs-0.131 9，r=0.999 9）、硫（0.3～27.6 μg/mL，C=3.829 6×Ar/As×Cs-0.054 6，r=1）、抗氧劑3114（0.9～87.3 μg/mL，C=7.818 3×Ar/As×Cs -0.207 1，r=1）、抗氧劑1010（0.8～82.4 μg/mL，C=6.562 1×Ar/As×Cs-0.387 7，r=0.999 9）、抗氧劑330（0.6～56.0 μg/mL，C=4.314 3×Ar/As×Cs-0.126 4，r=1）、抗氧劑1076（1.4～142.0 μg/mL，C=4.314 3×Ar/As×Cs-0.126 4，r=1）、抗氧劑1076（1.4～142.0 μg/mL，C=11.324×Ar/As×Cs -0.492 4，r=1）、抗氧劑168（1.2～121 μg/mL，C=11.027× Ar/As×Cs-0.057 2，r=1）。結(jié)果表明，各對照溶液在濃度范圍內(nèi)，線性良好，能夠滿足測試要求。

2.5 穩(wěn)定性

取混合對照溶液分別在0、24、48 h各進(jìn)樣2次，記錄各待測物和內(nèi)標(biāo)色譜峰面積，計算各待測物與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值，并分別計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。11種添加劑RSD%結(jié)果分別為1.1%、2.4%、1.2%、1.7%、2.8%、3.0%、2.2%、1.6%、2.9%、2.0%、1.7%，表明48 h內(nèi)各對照溶液穩(wěn)定性良好。

2.6 檢測限和定量限

分別取檢測限和定量限溶液，每份溶液各進(jìn)樣2次，記錄待測物的信噪比。檢測限和定量限（μg/瓶）結(jié)果為：抗氧劑1310（2.1/7.1）、對特辛基苯酚（1.5/4.8）、2，4-二特丁基苯酚（1.2/4.0）、抗氧劑245（1.3/4.2）、抗氧劑BHT（1.7/5.7）、硫（0.8/2.8）、抗氧劑3114（2.6/8.7）、抗氧劑1010（2.5/8.2）、抗氧劑330（1.7/5.6）、抗氧劑1076（4.3/14.2）、抗氧劑168（3.6/12.1）。結(jié)果表明，該測試方法具有較高靈敏度，能夠滿足測試要求。

2.7 回收率和精密度

在樣品中分別加入各添加劑對照品，同“樣品溶液的制備”方法制備回收率測試溶液，各分別取3份低、中、高濃度回收率測試溶液，記錄待測物和內(nèi)標(biāo)色譜峰面積，并計算回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果顯示平均回收率在96.7%～111.6%，RSD%在1%～6%，表明各待測物的低、中、高濃度加標(biāo)回收率和測試精密度均能夠滿足測試要求。

2.8 樣品測定結(jié)果

取6批注射用硫酸奈替米星，依法制備并測定，結(jié)果顯示，6批樣品溶液中均未檢出抗氧劑1310、對特辛基苯酚、2，6二叔丁基對甲基苯酚、抗氧劑245、抗氧劑BHT、硫、抗氧劑3114、抗氧劑1010、抗氧劑330、抗氧劑1076和抗氧劑168。

3 討論

有報道顯示，膠塞添加劑本身也有可能發(fā)生降解，《化學(xué)藥品注射劑與塑料包裝材料相容性研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》指出，對于注射劑這類給藥后直接接觸人體組織或血液系統(tǒng)的高風(fēng)險制劑須進(jìn)行藥品與包裝材料的相容性研究，因此有必要關(guān)注這類物質(zhì)向輸液遷移的情況[8]。本文建立了HPLC法同時測定膠塞中常用抗氧劑和硫化劑等11種添加劑的含量測定方法，方法學(xué)驗(yàn)證良好，為進(jìn)一步開展藥品包材與藥物之間相容性研究奠定基礎(chǔ)，對不同廠家6批注射用硫酸奈替米星膠塞中添加劑的遷移情況進(jìn)行了檢測，試驗(yàn)結(jié)果表明，樣品膠塞中添加劑的遷移情況均為未檢出。

[參考文獻(xiàn)]

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[4] 劉雯雯等.藥用丁基膠塞溶出物2，6-二叔丁基苯酚檢測方法的建立[J].四川大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2017，54（3）：629-634.

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[7] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典四部[S].中國科技醫(yī)藥出版社，2015：374-377.

[8] 國家食品藥品監(jiān)督管理局.化學(xué)藥品注射劑與塑料包裝材料相容性研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）[EB/OL].2012[2015-03-12].http：//www.sda.gov.cn/WS01/CL0844/75197.html.

（收稿日期：2018-00-00）