檢測sFlt-1、PIGF、25-羥基維生素D、D-二聚體診斷子癇前期價值

鄭海娜 趙維英

東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院江北院區(qū)(南京市大廠醫(yī)院)(南京，210000)

妊娠高血壓疾病是臨床常見的妊娠并發(fā)癥，2～7%患者可進展為子癇前期[1]。子癇前期是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡的一個重要原因，準確預(yù)測及時采取有效措施對改善母嬰預(yù)后具有重大意義。目前，臨床對子癇前期的發(fā)病機制尚未完全明確，但大量研究顯示內(nèi)皮細胞受損及功能障礙是子癇前期及子癇發(fā)病的核心原因[2]?？扇苄匝軆?nèi)皮生長因子受體-1(sFlt-1)、胎盤生長因子(PIGF)、25-羥基維生素D均能較好反映血管內(nèi)皮功能，臨床認為其與子癇前期的發(fā)生可能存在密切聯(lián)系。有研究認為[3]，妊娠期血液高凝狀態(tài)與血栓形成傾向可能預(yù)示著子癇前期的發(fā)生，D-二聚體能夠較好地反映血栓前狀態(tài)，其與子癇前期的發(fā)生可能存在一定聯(lián)系。為明確sFlt-1、PIGF、25-羥基維生素D、D-二聚體與子癇前期的關(guān)系，評估其診斷價值，本研究進行了回顧性分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性收集2017年6月-2018年6月在本院產(chǎn)前檢查的孕婦作為研究對象。納入標(biāo)準：單胎妊娠；孕10～13周；血壓在可控制范圍，無需采取措施終止妊娠；依從性良好，自愿配合完成研究；無嚴重心肺疾??；無胎膜早破。排除標(biāo)準：有慢性高血壓、心臟病、糖尿病、甲亢、腎病、結(jié)締組織病、血液病等慢性病史者；有輸血史及免疫治療史者；原發(fā)性高血壓者；血壓水平不可控制者。本研究通過了醫(yī)院倫理委員會批準。對孕婦妊娠結(jié)局隨訪，根據(jù)參考文獻[4]診斷孕中晚期是否發(fā)生子癇前期進行分組：子癇前期30例(觀察組)，年齡(28.7±4.3)歲(21～35歲)，孕(1.7±0.8)次；正常妊娠510例(對照組)，年齡(28.2±5.4)歲(20～36歲)，孕(1.6±0.7)次。兩組年齡、孕次比較無差異(P>0.05)。

1.2 檢測方法

1.2.1儀器及試劑德國Eppendorf 低溫高速離心機；Beckman 公司生產(chǎn)的普通離心機；日本三洋公司生產(chǎn)的零下80℃冰箱；Axygen公司生產(chǎn)的離心管；Eppendorf公司生產(chǎn)的移液器；BEPⅢ全自動酶聯(lián)免疫分析儀；恒溫箱等。試劑為美國R&D Systems公司生產(chǎn)的人血清sFlt、PIGF檢測試劑盒，人血漿D-二聚體檢測試劑盒；英國IDS公司生產(chǎn)的人血清25-羥基維生素D檢測試劑盒。

1.2.2標(biāo)本采集檢測采集孕婦孕10～13周空腹靜脈血(6ml)，分裝兩支試管。一支以枸櫞酸鈉抗凝保存，4℃離心留血漿，置-80℃冰箱保存待D-二聚體檢驗；另一支使用不抗凝試管保存，4℃離心留血清，分裝3支試管置-80℃冰箱保存，待sFlt-1、PIGF、25-羥基維生素D檢驗。sFlt、PIGF、25-羥基維生素D、D-二聚體檢驗均采用酶聯(lián)免疫吸附法，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。使用酶標(biāo)儀測定OD值。

1.3 干預(yù)

對妊娠中晚期確診為妊娠高血壓疾病、子癇前期及子癇者，均參照參考文獻[5]相關(guān)內(nèi)容采取生活、飲食及藥物干預(yù)。

1.4 觀察指標(biāo)

①對比各組sFlt-1、PIGF、25-羥基維生素D、D-二聚體結(jié)果。②根據(jù)《婦產(chǎn)科學(xué)》對子癇前期的診斷及分度標(biāo)準，即妊娠20周后出現(xiàn)血壓≥140/mmHg，24h尿蛋白≥0.3g或隨機尿蛋白為(﹢)，伴或不伴頭痛、上腹不適癥狀)判定為輕度子癇前期；血壓≥160/110mmHg，24h尿蛋白≥2.0g或隨機尿蛋白≥﹢﹢，有持續(xù)性頭痛、上腹不適或其他腦神經(jīng)癥狀、視覺障礙，判定為重度子癇前期。將觀察組分為輕度子癇前期與重度子癇前期兩組。對比兩組檢測結(jié)果。③將觀察組與對照組測得數(shù)據(jù)換算成中位數(shù)倍數(shù)，繪制ROC曲線，計算各項指標(biāo)對子癇前期的診斷敏感度、特異度。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 各組檢測指標(biāo)比較

觀察組孕婦的sFlt-1、D-二聚體水平均高于對照組，PIGF、25-羥基維生素D水平均低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 各組檢測指標(biāo)水平比較

2.2 觀察組不同子癇前期孕婦檢測指標(biāo)比較

觀察組中，輕度子癇前期22例，重度子癇前期孕婦8例，兩組檢測指標(biāo)存在差異(P<0.05)。見表2。

表2 觀察組不同子癇前期孕婦檢測指標(biāo)比較

2.3 各指標(biāo)對子癇前期的診斷敏感度、特異度

sFlt-1、PIGF、25-羥基維生素D、D-二聚體ROC曲線下面積均>0.8，各項指標(biāo)對子癇前期的診斷敏感度、特異度見表3。sFlt-1、PIGF、25-羥基維生素D、D-二聚體、sFlt/PIGF對子癇前期均有較高的敏感性與特異性，相比各項指標(biāo)單獨檢測，4項指標(biāo)聯(lián)合檢測對子癇前期的敏感性、特異性更高(P<0.05)。

表3 不同檢測指標(biāo)對子癇前期的診斷價值

3 討論

國外有學(xué)者對孕早期孕婦進行了血清sFlt-1、PIGF檢測，發(fā)現(xiàn)子癇前期孕婦的PIGF水平顯著低于健康孕婦，而sFlt-1水平顯著高于健康孕婦，故認為PIGF降低和sFlt-1升高可作為子癇前期發(fā)生的預(yù)測因子[6]。本次研究結(jié)果也顯示，觀察組孕婦的sFlt-1水平高于對照組，PIGF水平低于對照組，且重度子癇前期組的sFlt-1水平高于輕度組，PIGF水平低于輕度組。說明子癇前期孕婦在孕早期即存在抗血管生成因子與血管生成因子失衡，且子癇前期病情越重，在孕早期sFlt-1增幅、PIGF降幅越明顯，抗血管生成因子與血管生成因子失衡越明顯。還有文獻[7]指出，相比sFlt-1和PIGF單項檢測，sFlt-1與PIGF比值異常對早發(fā)型子癇前期的敏感度與特異度更高，可反映抗血管生成因子與血管生成因子間平衡狀態(tài)，若異常說明抗血管生成因子與血管生成因子處于失衡狀態(tài)，提示發(fā)生了血管內(nèi)皮損傷，故可將其作為子癇前期的預(yù)測因子。本研究結(jié)果也顯示，sFlt-1、PIGF單項檢測對子癇前期均有較高的診斷敏感性與特異性，但sFlt-1/PIGF對子癇前期的診斷敏感性、特異性更高，提示對子癇前期的預(yù)測價值可能比單項檢測更佳。

早期有研究顯示[8]，相比正常孕婦，子癇前期孕婦血液中的25-羥基維生素D水平明顯更低。國外研究顯示[9]，早發(fā)型重度子癇前期孕婦的血清25-羥基維生素D水平比正常妊娠孕婦更低。國內(nèi)也有多篇文獻顯示[10]，孕婦血清25-羥基維生素D水平降低會增加子癇前期及子癇的發(fā)病概率。本次研究中子癇前期孕婦的血清25-羥基維生素D水平低于正常孕婦，且子癇前期病情越重，25-羥基維生素D水平越低。這可能是因為25-羥基維生素D對血管內(nèi)皮生長因子誘導(dǎo)的血管形成及內(nèi)皮細胞萌芽有抑制作用，血管內(nèi)皮生長因子水平的減少會造成25-羥基維生素D水平的降低，從而增加子癇前期發(fā)病風(fēng)險。子癇前期孕婦存在著血管內(nèi)皮損傷、血小板活化、纖溶/抗凝系統(tǒng)失調(diào)，而這些變化均與凝血功能障礙密切相關(guān)。常規(guī)的凝血四項檢查對血栓前狀態(tài)及凝血功能改變的敏感度并不高。D-二聚體為交聯(lián)纖維蛋白特異性降解生成的特異性終產(chǎn)物，只有在血栓形成引起的繼發(fā)性纖溶過程中才會出現(xiàn)，故其可作為反映體內(nèi)纖溶亢進與高凝狀態(tài)的可靠標(biāo)記物。孕婦由于處于特殊的生理時期，其機體內(nèi)的凝血系統(tǒng)與抗凝血系統(tǒng)平衡被打破，血液通常處于高凝狀態(tài)，繼發(fā)性纖溶系統(tǒng)被激活，凝血與纖溶系統(tǒng)發(fā)生異常，所以在孕期更容易發(fā)生彌散性血管內(nèi)出血等多種產(chǎn)科并發(fā)癥。有研究還發(fā)現(xiàn)[11]，隨著妊娠時間的延長，孕婦D-二聚體水平呈上升趨勢，晚期妊娠孕婦與產(chǎn)褥期產(chǎn)婦的D-二聚體水平最高。有研究顯示[12]，子癇前期患者機體處于病理性高凝狀態(tài)，其血漿D-二聚體濃度異常升高，并隨病情的加重而升高。本次研究結(jié)果也顯示觀察組孕婦的D-二聚體水平顯著高于對照組，且重度子癇前期孕婦D-二聚體水平高于輕度孕婦。ROC曲線數(shù)據(jù)顯示，sFlt-1、PIGF、25-羥基維生素D、D-二聚體單獨檢測對子癇前期均有較高的診斷敏感性與特異性，但4項指標(biāo)聯(lián)合檢測提高了檢測的敏感性、特異性，提示在孕早期行sFlt-1、PIGF、25-羥基維生素D、D-二聚體聯(lián)合檢測對子癇前期有較好的預(yù)測價值。

綜上所述，妊娠早期聯(lián)合檢測sFlt-1、PIGF、25-羥基維生素D、D-二聚體，對子癇前期有較高的診斷價值。由于本次研究僅選取了妊娠早期孕婦進行研究，各項指標(biāo)與子癇前期的關(guān)系還有待更大樣本量及整個孕期動態(tài)監(jiān)測結(jié)果予以證實。