妊娠期糖尿病孕婦血清miR-126、sVCAM-1水平與糖脂代謝的相關(guān)性

王 青 寇 莉 李小林

湖北省黃石市第二醫(yī)院(435002)

妊娠期糖尿病(GDM)血糖過高可導(dǎo)致妊娠期高血壓等并發(fā)癥[1]。病因尚不十分清楚，胰島素抵抗和胰島 β 細(xì)胞分泌降低被認(rèn)為是GDM發(fā)病機(jī)制的重要環(huán)節(jié)[2]。2型糖尿病患者血漿miRNA表達(dá)異常升高，對(duì)糖尿病起到預(yù)警作用[3]，外周血miRNA表達(dá)穩(wěn)定，對(duì)糖尿病診治意義重大。sVCAM-1屬免疫球蛋白家族,可調(diào)節(jié)細(xì)胞間相互作用[4]。高表達(dá)可促使單核細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附[5]，并與冠心病患者血脂異常存在一定關(guān)系[6]。推測(cè)miR-126、sVCAM-1 與GDM患者糖脂代謝可能有關(guān)。鑒于目前尚無GDM與miR-126、sVCAM-1關(guān)系的研究，本文研究了GDM患者外周血清miR-126、sVCAM -1的表達(dá)特點(diǎn)，及其與糖脂代謝關(guān)系，為臨床診治提供指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

GDM診斷：參照美國糖尿病學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)妊娠中期糖篩查(50g)≥7.8mmol/L,OGTT1h≥10.0mmol/L/OGTT2h≥8.6mmol/L/OGTT3h≥7.8mmol/L；或糖篩查(50g)FPG≥11.1mmol/L且FPG≥5.8mmol/L[7]。納入標(biāo)準(zhǔn)：妊娠≥16周；在本院規(guī)律產(chǎn)檢；資料完整；知情同意本研究。排除妊娠期高血壓、心臟病等妊娠合并癥、不配合本研究、終止妊娠等。依據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)，選擇2016年2月—2018年2月本院婦產(chǎn)科及中西醫(yī)結(jié)合科門診就醫(yī)的GDM患者為觀察組，并選擇同期正常妊娠產(chǎn)檢孕婦為對(duì)照組。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

1.2.2生化指標(biāo)兩組孕婦均采集空腹靜脈血離心取上清液，美國貝克曼DXI 800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定空腹血糖(FPG)和空腹胰島素(FINS)，并采用穩(wěn)態(tài)模型法計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)=(FPG×FINS)/22.5。全自動(dòng)生化檢測(cè)儀(美國雅培C 8000)檢測(cè)TG、TC、apoA、apoB、HDL-C、LDL-C。酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清sVCAM-1。

1.2.3 miR-126血液標(biāo)本提取淋巴細(xì)胞，常規(guī)處理提取，RNA沉淀物至干燥，紫外分光光度法鑒定RNA純度和完整性。RT-PCR反應(yīng)。2-ΔΔCt法計(jì)算miR-126相對(duì)表達(dá)量。引物設(shè)計(jì)軟件Primer Premier 5.0，引物合成為金斯瑞生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 一般臨床資料

兩組一般資料對(duì)比無差異(P>0.05)(表1)。

2.2 兩組血脂代謝指標(biāo)比較

觀察組血清TG、LDL-C、apoA、apoB水平高于對(duì)照組，HDL-C低于對(duì)照組(均P<0.05)，TC水平兩組對(duì)比無差異(P>0.05)，見表2。

表1 兩組一般臨床資料比較

表2 兩組血脂代謝指標(biāo)比較

2.3 兩組血糖代謝及相關(guān)指標(biāo)比較

觀察組FPG、FINS、HOMA-IR、sVCAM-1均高于對(duì)照組，miR-126表達(dá)低于對(duì)照組(均P<0.05)，見表3。

表3 兩組血糖代謝及相關(guān)指標(biāo)比較

2.4 miR-126、sVCAM-1與血脂代謝相關(guān)性分析

miR-126與TG、LDL-C、FPG、FINS、HOMA-IR、apoA呈負(fù)相關(guān)(r=-0.328、-0.510、-0.324、-0.336、-0.616、-0.456、-0.315，P<0.05)，與HDL-C呈正相關(guān)(r=0.335，P<0.05)，與TC、apoB無關(guān)(r=-0.013、-0.015，P>0.05)。sVCAM-1與TG、FPG、HOMA-IR呈正相關(guān)(r=0.433、0.637、0.301，P<0.05)，與HDL-C呈負(fù)相關(guān)(r=-0.325，P<0.05)，與TC、LDL-C、FINS、apoA、apoB無關(guān)(r=0.040、0.158、0.012、0.008，P>0.05)。見表4。

2.5 影響miR-126、sVCAM-1的因素分析

分別以miR-126、sVCAM-1為因變量，以TG、TC、HDL-C、LDL-C、apoA、apoB、FPG、FINS、HOMA-IR等為自標(biāo)量，校正混雜因素影響，逐步排除無關(guān)項(xiàng)目，最終TG、HOMA-IR是影響miR-126的獨(dú)立因素，TG與sVCAM-1獨(dú)立相關(guān)，見表4。

3 討論

目前研究證明microRNA(MiRNA)直接或間接參與了糖尿病的發(fā)病機(jī)制，在胰島細(xì)胞發(fā)育、糖脂代謝等中均發(fā)揮主要作用[8-9]。miRNAs具有高度保守和內(nèi)源性，通過與靶基因3’非翻譯區(qū)互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合轉(zhuǎn)錄，調(diào)控蛋白編碼基因的表達(dá)。現(xiàn)有研究顯示，miRNA參與脂肪細(xì)胞分化、胰島素分泌、糖脂代謝的調(diào)控過程，同時(shí)可能參與胰島素抵抗的發(fā)生[10]。miR-126是內(nèi)皮細(xì)胞特異性高表達(dá)miRNA[11]。在2型糖尿病不同階段呈下降趨勢(shì)[12]，但目前尚缺乏GDM患者miR-126變化特征的報(bào)道。

表4 影響miR-126、sVCAM-1的logistic回歸分析

本研究GDM患者血清miR-126表達(dá)明顯低于正常孕婦，說明miR-126可能參與GDM發(fā)病機(jī)制。分析與GDM糖脂代謝指標(biāo)的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，miR-126與TG、LDL-C、FPG、FINS、HOMA-IR、apoA呈負(fù)相關(guān)，與HDL-C呈正相關(guān)，TG、HOMA-IR是影響miR-126的獨(dú)立因素，說明miR-126可能參與了GDM患者糖脂代謝異常的進(jìn)程，同時(shí)血脂、胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)影響了miR-126的表達(dá)。有研究發(fā)現(xiàn)[13-14]，在合并心血管病變的糖尿病患者中miR-126表達(dá)明顯降低，可能與miR-126表達(dá)下降抑制了內(nèi)皮型一氧化氮合酶而降低一氧化氮生物活性，或降低p65蛋白巰基亞硝基化作用激活核因子κB表達(dá)介導(dǎo)內(nèi)皮損傷有關(guān)。黃婷等[15]研究顯示糖尿病患者血漿miR-126表達(dá)明顯降低，并且與胰島及內(nèi)皮功能有關(guān)，而TC水平是影響miR-126表達(dá)的獨(dú)立因素，說明miR-126與糖脂代謝有關(guān)。

sVCAM-1是廣泛分布于內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞表面的免疫球蛋白,高度表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞，使細(xì)胞間產(chǎn)生黏附作用,并通過分泌各種活性物質(zhì),導(dǎo)致血管增生和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成。長期高脂血癥狀態(tài)，尤其是低密度脂蛋白和膽固醇可損傷動(dòng)脈內(nèi)膜功能，刺激內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞表面發(fā)生變化，刺激黏附因子表達(dá)上調(diào)，從而使內(nèi)皮細(xì)胞與單核細(xì)胞的黏附作用增強(qiáng)，并介導(dǎo)一系列細(xì)胞內(nèi)炎癥反應(yīng)[16]。劉海寧等[17]研究顯示，不穩(wěn)定型心絞痛患者血清sVCAM-1與血清內(nèi)臟脂肪素呈正相關(guān)，說明血清sVCAM-1與不穩(wěn)定型心絞痛患者血脂異常有關(guān)。但目前尚缺乏sVCAM-1在GDM中研究。本研究GDM患者血清sVCAM-1水平顯著升高，且與TG、FPG、HOMA-IR呈正相關(guān)，與HDL-C呈負(fù)相關(guān)，同時(shí)TG是影響sVCAM-1水平的獨(dú)立因素。提示sVCAM-1可能參與了GDM糖脂代謝異常的發(fā)生，而高血脂水平可能促進(jìn)sVCAM-1水平升高。

綜上，GDM患者血清miR-126表達(dá)下調(diào)，sVCAM-1水平升高，血清miR-126、sVCAM-1與GDM患者糖脂代謝相關(guān)，miR-126、sVCAM-1可能參與GDM患者糖脂代謝過程，同時(shí)血脂水平，胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)也影響miR-126與sVCAM-1水平。miR-126、sVCAM-1與糖脂代謝在GDM發(fā)病過程中可能存在協(xié)同調(diào)控作用，但機(jī)制尚不清楚，仍待進(jìn)一步研究證實(shí)。