程兆俊, 周文靜, 馮 穎, 王 沖
(杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院 杭州市婦幼保健院,浙江 杭州 310008)
生殖道感染和炎癥是男性不育的重要影響因素,流行病學(xué)研究結(jié)果顯示,約有15%的男性生育問題可以歸結(jié)于感染和炎癥[1]。 生殖道感染的準(zhǔn)確診斷和治療對(duì)于男性生殖功能的改善有重要意義[2-3]。目前常用的生殖道感染檢測方法主要是通過直接計(jì)數(shù)或過氧化酶染色法檢測精液中的白細(xì)胞。但是白細(xì)胞的出現(xiàn)并不能確定疾病的進(jìn)展程度[4],可能會(huì)造成一定的假陰性結(jié)果。近年來,國內(nèi)外研究均提出精漿彈性蛋白酶(polymorphonuclear neutrophil elastase,PMNE)可作為男性生殖道隱性感染和炎癥的檢測指標(biāo)[5-7],與精液白細(xì)胞水平有很好的相關(guān)性[8]。PMNE是由激活的中性粒細(xì)胞分泌的一種水解蛋白酶[9],其主要存在于中性粒細(xì)胞嗜苯胺藍(lán)顆粒中,可反映精液中被破壞和未被破壞的白細(xì)胞總量,被認(rèn)為是更好的檢測指標(biāo),更能準(zhǔn)確地反映男性生殖道感染程度。
有研究結(jié)果顯示,精漿PMNE和白細(xì)胞可影響精液酸堿度和精子活力,導(dǎo)致精子質(zhì)量改變,且抗炎治療后精子活力好轉(zhuǎn)[10-11]。然而,目前對(duì)精漿PMNE是否能影響精液參數(shù)以及患者如何選擇復(fù)查時(shí)間尚無定論。我們通過對(duì)PMNE不同程度陽性患者精液參數(shù)進(jìn)行分析,并對(duì)不同時(shí)間的PMNE復(fù)查結(jié)果進(jìn)行比較,探討PMNE對(duì)男性生殖感染的影響和復(fù)查時(shí)機(jī)的選擇。
選取2015年1—12月來杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院生殖中心進(jìn)行精液分析和PMNE檢測的763例患者,根據(jù)PMNE含量將患者分為3個(gè)組:含量≤290 ng/mL者為未感染組(208例);含量在290~1 000 ng/mL之間者為隱性感染組(319例,對(duì)其中312例進(jìn)行復(fù)查);含量≥l 000 ng/mL者為確證感染組(236例,對(duì)其中213例進(jìn)行復(fù)查)。確證感染及隱性感染患者均服用頭孢克洛或頭孢呋辛治療2周,復(fù)查期間不服用其他抗菌藥物。進(jìn)一步根據(jù)用藥后復(fù)查時(shí)間將患者分為早期復(fù)查組(服藥結(jié)束后7 d內(nèi)復(fù)查)、中期復(fù)查組(服藥結(jié)束后7~14 d內(nèi)復(fù)查)和晚期復(fù)查組(服藥結(jié)束后>14 d復(fù)查)[12-13],并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
1.2.1 精液標(biāo)本采集 患者禁欲2~7 d,用手淫法取精并收集于專用無菌取精杯內(nèi),置37 ℃恒溫水浴箱中并記錄液化時(shí)間。
1.2.2 精漿PMNE檢測 采用西班牙SCA-H-01型計(jì)算機(jī)輔助精液分析儀進(jìn)行精液質(zhì)量分析后,將完成常規(guī)檢查及形態(tài)學(xué)檢查的精液2 000×g離心20 min,留取上層精漿檢測。如不能及時(shí)檢測則存放于-20 ℃冰箱,待檢測時(shí)室溫復(fù)融。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)測定PMNE水平,嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。PMNE定量檢測試劑盒購于深圳華康生物醫(yī)學(xué)工程有限公司,所使用SUNRISE光吸收酶標(biāo)儀購自帝肯(上海)貿(mào)易有限公司。
采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,參數(shù)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)以表示。PMNE水平與精液參數(shù)的3個(gè)組間比較采用方差分析,2個(gè)組間比較采用t檢驗(yàn),不同時(shí)間PMNE陽性率的比較采用χ2檢驗(yàn)。以p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
未感染組、隱性感染組和確診感染組之間精子濃度和前向活動(dòng)精子比例差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);而在分組比較中,確證感染組與未感染組前向活動(dòng)精子比例差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。見表1。
表1 不同PMNE水平患者精液參數(shù)的比較
對(duì)312例PMNE隱性感染患者和213例確證感染患者進(jìn)行了復(fù)查。在PMNE隱性感染的復(fù)查患者中,早期、中期、晚期復(fù)查組之間PMNE陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.434,P=0.180)。在PMNE確證感染的復(fù)查患者中,早期、中期、晚期復(fù)查組3個(gè)組間PMNE陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=22.951,p<0.001),其中早期復(fù)查組PMNE陽性率明顯高于中期復(fù)查組和晚期復(fù)查組(χ2值分別為7.601、18.530,P值分別為0.006、<0.001)。見表2。
表2 隱性感染組和確證感染組不同復(fù)查時(shí)間PMNE陽性率的比較
臨床上部分男性生殖道感染患者其臨床癥狀、體征并無特異性改變,隱性感染導(dǎo)致部分男性不育。精漿PMNE水平檢測是篩查生殖道隱性炎癥的有力手段,臨床上常以290和1 000 ng/ mL判定男性生殖道隱性感染及確證感染[14-15],本研究也依此分組。
有研究結(jié)果顯示,精漿PMNE可影響精液酸堿度和精子活力,導(dǎo)致精子質(zhì)量改變[16-17]。也有研究證實(shí),精漿PMNE水平下降后,約有67%的無癥狀性生殖道炎癥患者的精子質(zhì)量有所改善[18]。本研究結(jié)果也表明,精漿PMNE水平與精液參數(shù)存在一定的相關(guān)性。本研究發(fā)現(xiàn),確證感染組(精漿PMNE含量≥1 000 ng/mL)的精子活力較未感染組顯著降低(P=0.038),表明高水平的白細(xì)胞裂解和分泌物可對(duì)精子產(chǎn)生有害效應(yīng),精漿PMNE水平與炎癥程度顯著相關(guān)。由于精漿PMNE水平與炎癥程度有關(guān),本研究推測精漿PMNE水平還能跟蹤抗菌藥物治療效果,抗炎治療后可通過檢測精漿PMNE水平,指導(dǎo)臨床治療方案的選擇。
在精漿PMNE的臨床應(yīng)用中,醫(yī)生會(huì)因?yàn)橛盟幒驪MNE復(fù)查時(shí)間的選擇對(duì)治療效果的判斷產(chǎn)生一定的偏差。我們通過對(duì)復(fù)查時(shí)間分組統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),對(duì)于確證感染患者,用抗菌藥物治療后,早期復(fù)查患者PMNE陽性率顯著高于中期復(fù)查患者和晚期復(fù)查患者(χ2值分別為7.601、18.530,P值分別為0.006、<0.001),而隱性感染患者中并未顯示這種時(shí)間差異,說明確證感染患者精漿中PMNE水平較高,抗菌藥物治療停止后,PMNE仍持續(xù)降低。停藥14 d后再復(fù)查可避免因PMNE尚未降解造成過度治療,不僅可減少患者抗菌藥物的攝入量,還可減少患者經(jīng)濟(jì)及心理負(fù)擔(dān)。因此,正確選擇精漿PMNE復(fù)查時(shí)間能有效地評(píng)估男性生殖道感染狀態(tài),并指導(dǎo)合理用藥,對(duì)男性生育力的挽救也具有重要的意義。
[1]WEIDNER W,COLPI G M,HARGREAVE T B,et al. EAU guidelines on male infertility[J]. Eur Urol,2002,42(4):313-322.
[2]SAKKAS D,ALVAREZ J G. Sperm DNA fragmentation:mechanisms of origin,impact on reproductive outcome,and analysis[J]. Fertil Steril,2010,93(4):1027-1036.
[3]EISENBERG M L,LIPSHULTZ L I. Varicoceleinduced infertility:newer insights into its pathophysiology[J]. Indian J Urol,2011,27(1):58-64.
[4]王晟,賀占舉,鄶艷榮,等. 精液中白細(xì)胞與精液質(zhì)量的關(guān)系研究[J]. 中國性科學(xué),2013,22(5):3-6.
[5]魏小斌,白志明,李春蕓,等. 不育癥患者精漿彈性蛋白酶檢測的臨床意義[J]. 中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2009,13(11):1563-1566.
[6]ZORN B,SESEK-BRISKI A,OSREDKAR J,et al. Semen polymorphonuclear neutrophil leukocyte elastase as a diagnostic and prognostic marker of genital tract inflammation-a review[J]. Clin Chem Lab Med,2003,41(1):2-12.
[7]KOPA Z,WENZEL J,PAPP G K,et al. Role of granulocyte elastase and interleukin-6 in the diagnosis of male genital tract inflammation[J]. Andrologia,2005,37(5): 188-194.
[8]聶尚丹,陳廷,李雷生,等. 精漿彈性蛋白酶水平、白細(xì)胞定量與男性不育的關(guān)系[J]. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2010,7(14):16-18.
[9]石曉星,商學(xué)軍. 中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶在男性生殖道感染診斷中的意義[J]. 中華男科學(xué),2003,9(2):136-139.
[10]秦松林. 男性不育患者精漿中彈性蛋白酶水平和白細(xì)胞定量及其與精液質(zhì)量的關(guān)系研究[J]. 航空航天醫(yī)學(xué)雜志,2014,25(1):19-21.
[11]張濤,陳斌,呂逸清,等. 抗炎治療對(duì)白細(xì)胞精液癥患者精漿瘦素與活性氧的影響分析[J]. 中國男科學(xué)雜志,2014,29(3):52-55.
[12]林楚懷,周輝譜. 男性泌尿生殖道性病感染的檢驗(yàn)與療效分析[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2014,11(2):171-172.
[13]江傳寧. 泌尿外科感染的原因與治療探討[J]. 醫(yī)學(xué)信息,2015,28(37):246-247.
[14]EGGERT-KRUSE W,ZIMMERMANN K,GEISSLER W,et al. Clinical relevance of polymorphonuclear (PMN-) elastase determination in semen and serum during infertility investigation[J].Int J Androl,2009,32(32):317-329.
[15]HENKEL R,MAASS G,JUNG A,et al. Agerelated changes in seminal polymorphonuclear elastase in men with asymptomatic inflammation of the genital tract[J]. Asian J Androl,2007,9(3):299-304.
[16]ALLAM J P,F(xiàn)RONHOFFS F,F(xiàn)ATHY A,et al. High percentage of apoptotic spermatozoa in ejaculates from men with chronic genital tract inflammation[J].Andrologia,2008,40(5):329-334.
[17]毛金觀,彭忠英,楊戎威,等. 生殖道感染不育患者精漿生化指標(biāo)與精液參數(shù)的相關(guān)分析[J]. 浙江醫(yī)學(xué),2016,38(18):1519-1520.
[18]馮瑞祥,盧坤剛,張紅燁,等. 精液中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的研究進(jìn)展[J]. 中華男科學(xué)雜志,2011,17(11):1023-1028.