應(yīng)用SP免疫組化法檢測(cè)宮頸鱗癌組織中SOX2蛋白表達(dá)水平的臨床價(jià)值分析

胡 幸，徐曙光，符青云(.江門市五邑中醫(yī)院病理科，廣東 江門 5900；.江門市婦幼保健院病理科，廣東 江門 5900)

宮頸癌是臨床常見(jiàn)的惡性腫瘤疾病，具有較高的發(fā)病率和死亡率，直接影響著女性患者的身心健康[1]。目前，有研究結(jié)果證實(shí)，白血病、結(jié)腸癌、肺癌等中均存在腫瘤干細(xì)胞，可見(jiàn)其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。SOX2蛋白屬于干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子，在胚胎干細(xì)胞、生殖腫瘤細(xì)胞中均有表達(dá)[2-3]。分析SOX2蛋白在宮頸鱗癌、CIN組織以及正常宮頸組織中的表達(dá)情況，探討其在宮頸鱗癌發(fā)展中的參與作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2011年6月～2016年6月96例宮頸鱗癌組織、75例宮頸CIN組織，術(shù)中切除并行組織病理學(xué)檢查證實(shí)。96例宮頸鱗癌患者，年齡39～68歲，平均(49.62±2.43)歲，TNM分期：56例Ⅰ期，40例Ⅱa期；分化程度：36例低分化，33例中分化，27例高分化；38例合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，58例無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。74例CIN患者，年齡35～64歲，平均(50.26±3.26)歲，44例正常宮頸組織均來(lái)源于子宮肌瘤切除術(shù)患者，年齡31～60歲，平均(24.26±2.65)歲。以三組患者年齡對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2SP免疫組化檢測(cè)：取宮頸組織標(biāo)本行切片、脫蠟、水化處理。取pH值6.0枸櫞酸鈉對(duì)抗原行修復(fù)處理，對(duì)切片進(jìn)行加熱，加熱溫度控制100℃，并取PBS沖洗切片。依次滴入過(guò)氧化酶阻斷液、非免疫生動(dòng)物、第一抗體、生物素標(biāo)記的第二抗體、SP溶液，每滴入1次溶液，于常溫下孵育10 min，最后滴入DAB顯色劑顯色，于室溫下孵育5 min，將切片置于顯微鏡下觀察染色情況。

1.3結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：于顯微鏡下觀察細(xì)胞核染色情況，若為棕褐色顆粒狀，則提示SOX2為陽(yáng)性表達(dá)。判定標(biāo)準(zhǔn)：①觀察細(xì)胞核染色深度積分，分值為0～3分，0分為無(wú)染色，1分為弱染色，2分為中度染色，3分為強(qiáng)染色；②觀察細(xì)胞的染色率，分值為0～3分，0分為無(wú)染色，1～3分染色率臨界值分別為25%、50%。兩種判定標(biāo)準(zhǔn)值：將染色深度和細(xì)胞染色率分值相加，0分提示SOX2為陰性表達(dá)，<2分為弱陽(yáng)性，3～4分為中度陽(yáng)性，>5分為強(qiáng)陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1不同宮頸組織的SOX2-mRNA的表達(dá)情況：宮頸鱗癌組織的SOX2-mRNA相對(duì)表達(dá)量為0.895±0.197，明顯高于CIN組織0.453±0.068和正常宮頸組織0.218±0.065，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 同宮頸組織的SOX2-mRNA的表達(dá)對(duì)比

注：與宮頸鱗癌組織相比，①t=18.58，P<0.05；②t=22.86，P<0.05

2.2宮頸鱗癌臨床病理表表現(xiàn)與SOX2表達(dá)的關(guān)系：Ⅱa期宮頸鱗癌組織的SOX2陽(yáng)性表達(dá)率為82.50%，顯著高于Ⅰ期51.79%，低分化宮頸鱗癌組織的SOX2陽(yáng)性表達(dá)率94.44%，顯著高于中分化(69.70%)和高分化(51.85%)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸鱗癌組織的SOX2陽(yáng)性表達(dá)率84.21%，顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的50.34%，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 宮頸鱗癌臨床病理表表現(xiàn)與SOX2表達(dá)的關(guān)系[例(%)]

3 討論

SOX屬于SRY相關(guān)基因中的一種，在胚胎干細(xì)胞、生殖道細(xì)胞、腫瘤中的陽(yáng)性表達(dá)相對(duì)較高。梁洪享等指出，SOX蛋白可直接參與神經(jīng)、器官發(fā)育中，若其出現(xiàn)病變，可能誘發(fā)疾病[4]。隨著臨床對(duì)SOX的是深入研究，發(fā)現(xiàn)SOX2作為SOX的轉(zhuǎn)錄因子在肺癌、乳腺癌的陽(yáng)性表達(dá)率相對(duì)較高[5-6]。有文獻(xiàn)指出，食管鱗癌的SOX2陽(yáng)性表達(dá)率高達(dá)56.0%顯著高于食管癌正常黏膜組織。臨床研究表明，宮頸鱗癌的發(fā)生、發(fā)展可能與SOX2表達(dá)存在直接關(guān)系。HPV感染是宮頸鱗癌發(fā)病的高危影響因素，部分HPV感染的細(xì)胞球可能病變?yōu)槟[瘤細(xì)胞，誘發(fā)宮頸鱗癌[7]。

本研究中，宮頸鱗癌組織的SOX2-mRNA相對(duì)表達(dá)量為0.895±0.197，明顯高于CIN組織和正常宮頸組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Ⅱa、低分化以及存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者宮頸鱗癌組織的SOX2陽(yáng)性表達(dá)率相對(duì)高，與Ⅰ期、中高分化、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸鱗癌組織相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果顯示,SOX2可能參與至宮頸鱗癌的發(fā)展中。陳淑貞等[8]分析SOX2在胃癌中的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)與正常胃組織相比，SOX2-mRNA呈明顯上升趨勢(shì)。蔡永萍等[9]提出SOX2在骨肉瘤中的陽(yáng)性表達(dá)率相對(duì)較高，本研究結(jié)果與其相符。有研究表明，腫瘤分期與分化情況均存在SOX2陽(yáng)性表達(dá)，含SOX2蛋白細(xì)胞可能是腫瘤細(xì)胞，但該研究結(jié)果結(jié)果還有待進(jìn)一步證實(shí)。谷冀暉等認(rèn)為，SOX2的陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤分化程度呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，可能與腫瘤組織的浸潤(rùn)深入有關(guān)[10]。

綜上所述，SOX2與宮頸鱗癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等存在直接關(guān)系，對(duì)患者的預(yù)后診治具有指導(dǎo)意義。

4 參考文獻(xiàn)

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