間隙連接蛋白CX26和CX43在食管鱗癌組織中的表達(dá)及意義

陳曉琦，，，

(河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，河南 鄭州 450000)

食管癌是目前消化系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，我國是食管癌高發(fā)區(qū)，且是目前死亡率最高的國家之一，河南省食管癌發(fā)病率較高，嚴(yán)重危害了人們的健康。食管癌的發(fā)生、發(fā)展是一個多步驟、多因素、復(fù)雜的過程，其疾病進(jìn)展主要是由DNA的損傷所造成，這種損傷能引起多個癌基因(或)抑癌基因的改變。

細(xì)胞間隙連接是相鄰細(xì)胞間普遍存在的膜通道結(jié)構(gòu)，是由相鄰細(xì)胞膜上的2個連接子互相錨定而成，連接子是由相同的6個啞鈴形的蛋白亞單位即連接蛋白CX組成的六聚體，因此，CX是細(xì)胞間隙連接通訊的基本結(jié)構(gòu)單位。間隙連接是細(xì)胞之間進(jìn)行物質(zhì)交換的通道，這種物質(zhì)和信息交流被稱為由間隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間隙連接通訊。細(xì)胞間通過間隙連接所介導(dǎo)的細(xì)胞間隙連接通訊進(jìn)行著信息和能量的傳遞，參與細(xì)胞間的物質(zhì)交換，調(diào)控細(xì)胞的新陳代謝、增殖、分化，維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定[1-3]。惡性腫瘤的發(fā)生及生物學(xué)特性與間隙連接蛋白的基因表達(dá)及細(xì)胞間隙連接通訊功能受抑密切相關(guān)。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源42例食管鱗癌和對應(yīng)的正常食管黏膜組織、17例癌旁不典型增生組織均來自我院2010年6月至2012年8月手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的標(biāo)本。42例食管鱗癌患者中，低分化組8例，中分化組15例，高分化組19例；淺層組15例，深層組27例。所有患者術(shù)前均未進(jìn)行放療、化療及其他治療。

1.2方法采用免疫組化S-P法，切片經(jīng)烤片、常規(guī)脫蠟、水化、滅活內(nèi)源性過氧化物酶、抗原修復(fù)、封閉、抗原抗體反應(yīng)、DAB染色、蘇木素進(jìn)行復(fù)染、常規(guī)脫水、透明、干燥、樹脂封片、鏡下觀察等步驟。

1.3免疫組化染色判定標(biāo)準(zhǔn)呈棕黃色顆粒樣物質(zhì)的均為CX26和CX43蛋白陽性信號，主要位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。隨機(jī)在高倍鏡下選取5個視野(觀察細(xì)胞數(shù)不少于每視野200個)，按陽性信號細(xì)胞所占的百分比和著色深淺來進(jìn)行結(jié)果的判定：1)按照切片中的細(xì)胞著色深淺進(jìn)行評分：細(xì)胞無顯色，0分；淺黃色，1分；棕黃色，2分；棕褐色，3分；2)按照陽性細(xì)胞數(shù)所占的同類細(xì)胞數(shù)的百分比評分，1分：<30%，2分：30%～<70%，3分：≥70%。取2項(xiàng)評分的乘積為總積分，陰性(-)為0～1分，弱陽性(+)為2～3分，強(qiáng)陽性(++)≥4分，后兩者均為陽性。

2 結(jié)果

食管鱗癌組織中CX26、CX43陽性率分別為40.5% (17/42)和31.0% (13/42)，均明顯低于正常食管黏膜組織及癌旁不典型增生組織(P<0．05)。CX26、CX43蛋白水平表達(dá)與食管鱗癌的組織學(xué)分級、浸潤深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0．05)。見表1～4。

表1 不同食管組織中CX26蛋白的表達(dá)

表2 食管鱗癌組織中CX26蛋白表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

表3 不同食管組織中CX43蛋白的表達(dá)

表4 食管鱗癌組織中CX43蛋白表達(dá)與臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系

3 討論

研究[4-7]表明在多數(shù)的惡性腫瘤細(xì)胞中無細(xì)胞間隙連接通訊功能，間隙連接很少或不存在，而鄰近正常組織中或良性腫瘤中的間隙連接正常，說明在癌變的過程中細(xì)胞間隙連接通訊扮演著很重要的作用，其基因具有抑制腫瘤生長的特點(diǎn)，當(dāng)通過調(diào)控機(jī)制上調(diào)表達(dá)間隙連接基因和恢復(fù)間隙連接通訊功能，則表現(xiàn)出抑制腫瘤細(xì)胞生長、逆轉(zhuǎn)惡性表型的腫瘤抑制效應(yīng)，所以，間隙連接蛋白被認(rèn)為是非突變腫瘤抑制基因。

本結(jié)果證實(shí)，在食管鱗癌組織中CX26、CX4蛋白水平表達(dá)明顯降低，說明在食管黏膜上皮細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化過程中有其參與，并可能與食管鱗癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。CX26、CX43蛋白表達(dá)與食管鱗癌組織學(xué)分級之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，在食管鱗癌組織中CX26、CX43蛋白陽性率隨組織學(xué)分級升高而明顯下降，提示CX26、CX43基因與食管鱗癌的分化程度密切相關(guān)，CX26、CX43基因異常表達(dá)與食管鱗癌的惡性程度有關(guān)。CX26、CX43陽性率隨食管鱗癌的進(jìn)展而明顯降低，提示其異常表達(dá)與食管鱗癌的浸潤密切相關(guān)。在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組其陽性表達(dá)率明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，提示其與食管鱗癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系。

對CX26、CX43表達(dá)規(guī)律的研究為全面合理地揭示食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展提供了一個新的理論依據(jù)，對各種連接蛋白在腫瘤組織中表達(dá)機(jī)制的深入研究能為腫瘤的早期診斷提供新的指標(biāo)，為腫瘤的基因治療提供新的途徑。

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