慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T 淋巴細(xì)胞亞群變化情況及其針對性治療措施分析

（東莞市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，東莞 523326）

近年來我國免疫學(xué)理論研究深度不斷增加，醫(yī)學(xué)界也因此發(fā)現(xiàn)慢性肝炎并非由病毒直接損傷肝組織所致，而是由于機(jī)體免疫系統(tǒng)過度反應(yīng)導(dǎo)致[1]。在此基礎(chǔ)上結(jié)合大量的臨床資料發(fā)現(xiàn)，慢性肝炎患者大都出現(xiàn)免疫不同程度受損，其中以T細(xì)胞表達(dá)變化最為顯著，因此國內(nèi)外研究人員逐漸將研究的熱點(diǎn)放在慢性肝炎患者免疫失調(diào)機(jī)制上并取得可喜成果，為此我院也對慢性肝炎患病機(jī)制及治療進(jìn)行了積極探討，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月-2016年10月到我院進(jìn)行治療的43例慢性乙肝患者為研究組，另選取43例健康人作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①依據(jù)臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)已確診為慢性肝炎的患者；②身體各項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到本研究標(biāo)準(zhǔn)的患者；③無其他類型肝炎疾病的患者；④知情并同意配合此項(xiàng)研究的所有患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①未完整參與研究的患者；②合并嚴(yán)重免疫缺陷或心腦疾病的患者；③合并精神類疾病以至于不能正常進(jìn)行溝通且不能配合治療的患者。④對本研究治療所用藥物過敏的患者。研究組中，年齡31歲-85歲，平均年齡（42.4±2.16）歲。對照組中，年齡32歲-84歲，平均年齡（41.6±2.33）歲。兩組患者的一般資料間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。本研究已經(jīng)通過我院醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.2 方法 自患者入院時分別采集患者靜脈血5 mL，應(yīng)用流式細(xì)胞儀（美國BD公司，F(xiàn)ACSCaLibur流式細(xì)胞分析儀）及其配套試劑檢測患者外周T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)情況，并應(yīng)用熒光定量PCR法檢測患者體內(nèi)HBV DNA表達(dá)情況。所有患者均進(jìn)行肝組織活體檢測，并對患者肝組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。

1.3 觀察指標(biāo) 根據(jù)患者肝組織單個核細(xì)胞染色情況進(jìn)行CD4、CD8表達(dá)水平評定: 若細(xì)胞未顯色即為陰性，用”-”表示；若患者細(xì)胞400倍視野下顯棕色或深棕色數(shù)量≤20個即為陽性，用”+”表示；若患者細(xì)胞400倍視野下顯深棕色數(shù)量＞20個即為強(qiáng)陽性，用”++”表示。采用相關(guān)儀器進(jìn)行外周T細(xì)胞亞群的檢測，所有操作均由一組專業(yè)醫(yī)師進(jìn)行，以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。最后對患者HBV DNA表達(dá)情況進(jìn)行認(rèn)真記錄分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 18.0進(jìn)行分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，采用t檢驗(yàn)。計數(shù)資料采用率（%）表示，采用卡方檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 外周血CD27+CD28+T細(xì)胞亞群對比 研究組患者T細(xì)胞亞群顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.2 外周血T淋巴細(xì)胞亞群對比 研究組患者T細(xì)胞亞群表達(dá)顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

3 討論

肝細(xì)胞生理病變在延遲超敏反應(yīng)中主要以CD3+、CD4+作為主要免疫T細(xì)胞發(fā)揮免疫作用，在機(jī)體內(nèi)其可借助淋巴因子的釋放引起部分炎癥反應(yīng)而引起體內(nèi)目標(biāo)靶細(xì)胞的損傷[2]。CD3+以及CD8+則主要作為T細(xì)胞毒性反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞存在，其作用機(jī)制主要為借助細(xì)胞漿顆粒釋放穿孔素而導(dǎo)致靶細(xì)胞受損，慢性乙型肝炎主要是T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫損害毒疾病。相關(guān)研究人員[3]還發(fā)現(xiàn)機(jī)體感染病毒初期，患者體內(nèi)各種病毒感染初期，CD3+特異性分化類型均為早期初始型危害相對較小，而后隨著感染程度的不斷加深患者體內(nèi)T細(xì)胞開始相不同方向分化。對比分析兩組患者肝組織免疫表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)研究組患者體內(nèi)CD4以及CD8表達(dá)程度顯著高于對照組患者（P＜0.05）。這主要是因?yàn)槁愿窝谆颊咴诩膊“l(fā)展后期，大量的T細(xì)胞會大量破壞已經(jīng)病變了的肝細(xì)胞，導(dǎo)致肝組織嚴(yán)重受損造成外周T細(xì)胞亞群大量減少。國內(nèi)外研究人員[4]發(fā)現(xiàn)免疫性缺陷疾病CD8+細(xì)胞多為致病機(jī)制不明確的的中期亞群，CD27以及CD28分子在成熟T細(xì)胞表面分布最為廣泛，而CD28分子則主要分布在B細(xì)胞表面抗原，主要作用為與細(xì)胞表面活性分子B7結(jié)合，以便激活患者體內(nèi)T細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答。除此之外，CD27分子在體內(nèi)會和CD70特異性結(jié)合，以第二轉(zhuǎn)導(dǎo)信號的方式間接促進(jìn)T細(xì)胞增值分化。研究表明當(dāng)機(jī)體CD8+T淋巴細(xì)胞被特異性激活后，便會釋放特異性因子啟動CD27和CD28進(jìn)行分化，最后分化為具有效應(yīng)細(xì)胞相關(guān)功能的CD8+CD27-和CD8+CD28-，這種細(xì)胞會釋放IFN-γ、TNF-α細(xì)胞因子，導(dǎo)致肝組織出現(xiàn)不同程度的損壞。本研究比較了健康人與慢性肝炎患者外周血CD27+CD28+T細(xì)胞亞群表達(dá)情況，結(jié)果顯示研究組患者T細(xì)胞亞群顯著低于對照組（P＜0.05）。

慢性肝炎病毒感染患者發(fā)病時間長，發(fā)病初期到疾病后期患者體內(nèi)病毒含量不會出現(xiàn)較大波動，但機(jī)體免疫因子會被長期消耗，最終導(dǎo)致免疫應(yīng)答系統(tǒng)出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p傷，在人體微環(huán)境的表現(xiàn)上則為T淋巴細(xì)胞含量的減少。目前醫(yī)學(xué)上普遍認(rèn)為人體免疫系統(tǒng)對維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定具有重大意義，其不但可以抵御外來物質(zhì)的入侵還可以對已入侵物質(zhì)進(jìn)行清除并對人體內(nèi)環(huán)境進(jìn)行實(shí)時監(jiān)控[5]。慢性肝炎病毒作用機(jī)制獨(dú)特，其通過對免疫因子的長時間消耗和對免疫系統(tǒng)的持續(xù)刺激，導(dǎo)致機(jī)體防御系統(tǒng)處于低敏感狀態(tài)，以至于患者體內(nèi)病毒不能被完全清除形成惡性循環(huán)。保護(hù)機(jī)體免受病原微生物侵害，慢性肝炎患者處于免疫耐受狀態(tài)，免疫功能低下，導(dǎo)致體內(nèi)病毒無法徹底清除。慢性肝炎患者發(fā)病初期體內(nèi)CD3+細(xì)胞百分率并無顯著異常，但在疾病發(fā)展后期患者體內(nèi)CD3+含量明顯降低，這說明患者體內(nèi)免疫系統(tǒng)已經(jīng)受到嚴(yán)重?fù)p害。本研究特地對比了慢性肝炎患者體內(nèi)CD3+、CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+T細(xì)胞亞群表達(dá)情況，結(jié)果顯示研究組患者T細(xì)胞亞群表達(dá)情況顯著低于對照組（P＜0.05），這與相關(guān)研究人員的結(jié)果一致。T淋巴細(xì)胞為人體免疫系統(tǒng)最為特殊的免疫細(xì)胞，其表面具有數(shù)量巨大、種類繁多的各種蛋白質(zhì)，每類蛋白質(zhì)都具有其特定的生理功能，有的分化為效應(yīng)細(xì)胞，有的則直接分化為記憶細(xì)胞。

綜上所述，慢性乙型病毒性肝炎患者相對于健康人外周血T淋巴細(xì)胞亞群會出現(xiàn)明顯變化，運(yùn)用干擾素以及核苷酸藥物治療具有顯著優(yōu)勢，在臨床上應(yīng)該進(jìn)一步推廣。

表1 兩組患者會體內(nèi)外周血CD27+、CD28+ T細(xì)胞亞群對比分析（Mean±SD，分）

表2 兩組患者外周血各類T淋巴細(xì)胞亞群對比分析（Mean±SD, %）

參考文獻(xiàn)

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3 李志堅(jiān), 石正琪, 招文穎. 卡介菌多糖核酸聯(lián)合咪唑斯汀對慢性蕁麻疹的療效及對患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響[J]. 皮膚性病診療學(xué)雜志, 2014, 21(4): 319-321.

4 陳軼, 陳益耀, 韓向陽, 等. 乙型肝炎病毒感染患者外周血T細(xì)胞亞群的表達(dá)特征與相關(guān)性研究[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2016, 26(5): 979-981.

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