廄舍糞便污染致雷州山羊頸部化膿創(chuàng)診療

涂軻

摘 要 目的：探索氯化鈉溶液與粉末治療化膿創(chuàng)的效果；篩選致病菌敏感的抗生素，為化膿創(chuàng)的有效治療提供依據(jù)。方法：用廄舍糞便污染山羊頸部?jī)蓚?cè)人造創(chuàng)口，化膿后一側(cè)用氯化鈉粉劑、另一側(cè)用10%氯化鈉溶液治療；同時(shí)，取膿汁進(jìn)行細(xì)菌的分離培養(yǎng)、鑒定及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)廄舍糞便污染導(dǎo)致化膿的致病菌是革蘭氏陰性短桿菌，該菌對(duì)頭孢類(lèi)藥物敏感；氯化鈉粉和10%氯化鈉溶液對(duì)治療化膿創(chuàng)都有確切可靠的治療效果。

關(guān)鍵詞 化膿創(chuàng)；氯化鈉；山羊

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

山羊1只，體重20公斤。由廣東海洋大學(xué)農(nóng)學(xué)院動(dòng)物遺傳實(shí)驗(yàn)室繁養(yǎng)。飼以飼草及玉米粉。實(shí)驗(yàn)期間自由攝食、飲水。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 人造化膿創(chuàng)

收集污染源：從山羊的廄舍隨機(jī)選取五個(gè)點(diǎn)取適量糞便置于洗凈的托盤(pán)中，混勻。

致感染化膿創(chuàng)：用1：1000濃度的新潔爾滅溶液對(duì)手術(shù)器械進(jìn)行浸泡消毒。將山羊保定好，在左側(cè)頸部下三分之一處將毛剪凈，用酒精棉球消毒術(shù)部后，用一次性注射器抽取0.5%普魯卡因作局部浸潤(rùn)麻醉。待麻醉起效后，沿血管走向用手術(shù)刀在兩側(cè)術(shù)部分別作長(zhǎng)約3cm割破皮膚的傷口，然后用手術(shù)刀柄將傷口下的皮膚與肌肉組織分離。將準(zhǔn)備好的污染源糞便填塞到傷口內(nèi)。右側(cè)頸部以同樣方法處理。

2.2 化膿菌的培養(yǎng)分離鑒定

2.2.1 培養(yǎng)基的配制

肉湯瓊脂培養(yǎng)基：根據(jù)瓊脂培養(yǎng)基配制方法，稱(chēng)取肉湯營(yíng)養(yǎng)瓊脂34.5g，置于大燒杯內(nèi)，加入蒸餾水1000ml，加熱溶解后，以三角瓶分裝，牛皮紙封口。

肉湯培養(yǎng)基：稱(chēng)取肉湯培養(yǎng)基19.5g，加入蒸餾水至1000ml，加熱溶解后，以大試管分裝，肉湯量不超過(guò)試管容量的三分之二，加蓋試管塞。

2.2.2 滅菌

將實(shí)驗(yàn)所需器械及配制完成的培養(yǎng)基用牛皮紙包扎好后，置于高壓蒸汽滅菌鍋中，在121℃下滅菌30min。

超凈工作臺(tái)紫外線照射30min，打開(kāi)抽風(fēng)設(shè)備，保持無(wú)菌環(huán)境。

3 分離培養(yǎng)鑒定

去除傷口上及周?chē)奈廴疚铮萌コ橆^的一次性注射器分別從對(duì)照組和治療組兩個(gè)傷口內(nèi)抽取無(wú)被外界污染的膿液，蓋上針頭，做好標(biāo)記。

取出肉湯瓊脂培養(yǎng)基放于超凈工作臺(tái)，冷卻到約50℃時(shí)倒平板，晾涼至平板凝固。每個(gè)平板培養(yǎng)基厚度控制在2-3mm。平板凝固后倒置備用。

無(wú)菌條件下將樣品注入平板中，用涂布器涂滿平板，做好標(biāo)記后置于恒溫培養(yǎng)箱中37℃，24h培養(yǎng)后，觀察菌落形態(tài)及生長(zhǎng)情況。挑取單個(gè)可疑菌落于新瓊脂平板中劃線培養(yǎng)，做好標(biāo)記后在恒溫培養(yǎng)箱中37℃下經(jīng)過(guò)24h后，挑取單個(gè)菌落進(jìn)行抹片，作革蘭氏染色，在油鏡下鑒別細(xì)菌形態(tài)。

挑取單個(gè)菌落接種至肉湯培養(yǎng)基中。每個(gè)可疑菌落接種一個(gè)肉湯培養(yǎng)基。于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。

3 制作好的菌液置于4℃冰箱中保存。

3.1 藥敏實(shí)驗(yàn)（紙片法）

在超凈工作臺(tái)中無(wú)菌條件下用移液槍吸取0.1ml菌液至營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上，用涂布器涂布均勻后，一個(gè)平板分散貼上4-5片不同藥物的藥敏片，一種細(xì)菌使用18種藥物。置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中感作20-24h。測(cè)量抑菌圈直徑，結(jié)果按抑菌圈直徑大小和各抗菌藥的NCCLS標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)定為高度敏感、中度敏感或耐藥。

3.2 臨床診斷

每?jī)商鞂?duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體溫、脈搏、呼吸進(jìn)行一次測(cè)量，以監(jiān)測(cè)動(dòng)物機(jī)體變化情況。判斷化膿創(chuàng)創(chuàng)腔深度、化膿嚴(yán)重程度和化膿創(chuàng)的愈合程度。根據(jù)診斷結(jié)果進(jìn)行治療方法調(diào)整。

4 結(jié)果

4.1 污染致化膿創(chuàng)的結(jié)果

對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組的傷口均在第二天出現(xiàn)少量稀薄水樣白色膿汁，第三天出現(xiàn)量較多漿糊狀渾濁膿汁并開(kāi)始出現(xiàn)紅、腫現(xiàn)象，第四天出多量濃稠黃色膿汁并伴有惡臭氣味，傷口比第三天腫得更大。

4.2 化膿菌的培養(yǎng)鑒定

鏡檢肉湯瓊脂培養(yǎng)基和肉湯培養(yǎng)基中的細(xì)菌可以判斷對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組的致化膿菌均為革蘭氏陰性菌。

4.3 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

在藥敏試驗(yàn)的十八種藥物中，致山羊化膿創(chuàng)的主要細(xì)菌對(duì)四種藥物高度敏感，六種藥物不敏感。從大多藥物抑菌圈大小相近可看出對(duì)照組與治療組的致病菌應(yīng)為同一種菌，這與同一污染源的條件相符。致山羊化膿創(chuàng)的致病菌對(duì)頭孢拉定、頭孢唑林、頭孢克肟、頭孢氨芐這四種頭孢高度敏感，對(duì)復(fù)方新諾明、諾氟沙星、克林霉素、林可霉素、阿米卡星、克拉霉素這六種藥物不敏。

4.4 臨床診斷的結(jié)果

在致化膿創(chuàng)之后，山羊體溫呼吸心率的均呈上升趨勢(shì)，第六天后開(kāi)始平穩(wěn)下降。山羊的三個(gè)常規(guī)生理指標(biāo)在致化膿創(chuàng)后均有上升高于正常值。

4.5 化膿創(chuàng)治療結(jié)果

在致化膿創(chuàng)第四天時(shí)抽取了傷口膿汁作化膿菌的培養(yǎng)分離鑒定后開(kāi)始對(duì)山羊的創(chuàng)口進(jìn)行治療。以左側(cè)作治療組右側(cè)為對(duì)照組。由于對(duì)照組的傷口創(chuàng)腔較深，需在創(chuàng)腔底部作一個(gè)反切口。第五、六天（治療第二、三天）治療組與對(duì)照組均有乳白色濃稠膿汁，但量比治療前要少，實(shí)驗(yàn)組的傷口可見(jiàn)一層干燥的薄痂，第七天實(shí)驗(yàn)組的膿汁顏色變淺，第八天實(shí)驗(yàn)組為稀薄半透明白色膿汁，干痂變厚，對(duì)照組有少量黃白色渾濁膿汁并也出現(xiàn)了干痂，兩側(cè)傷口均已消腫，第九天治療組與對(duì)照組均無(wú)明顯膿汁（見(jiàn)附錄圖5、6），開(kāi)始轉(zhuǎn)入肉芽創(chuàng)處理。

5 討論

新鮮污染創(chuàng)被廄舍糞便后出現(xiàn)明顯的化膿創(chuàng)病癥，說(shuō)明家畜創(chuàng)傷沒(méi)有得到及時(shí)正確的處理治療很容易發(fā)展為感染化膿創(chuàng)。山羊在化膿創(chuàng)期間，體溫、呼吸、心率均超出正常值，傷口出現(xiàn)典型的炎癥癥狀：紅、腫、熱、痛。

化膿菌的種類(lèi)有很多，本實(shí)驗(yàn)中的治療組與對(duì)照組的化膿菌的培養(yǎng)分離鑒定結(jié)果均為革蘭氏陰性菌。由于實(shí)驗(yàn)條件限制，沒(méi)能再進(jìn)一步研究該菌為具體的哪種菌，若有條件完善試驗(yàn)，應(yīng)鑒定出化膿菌，這樣對(duì)臨床治療可以提供更好依據(jù) 。由于抗生素的濫用及其他原因，現(xiàn)在細(xì)菌的耐藥性日益嚴(yán)重，實(shí)驗(yàn)中的十八藥物中，化膿菌只對(duì)其中頭孢拉定、頭孢唑林、頭孢克肟、頭孢氨芐四種藥物的藥敏試驗(yàn)為高度敏感，對(duì)復(fù)方新諾明、諾氟沙星、克林霉素、林可霉素、阿米卡星、克拉霉素這六種藥物為不敏，所以，在臨床治療化膿創(chuàng)的全身感染使用抗生素時(shí)，應(yīng)先做藥敏試驗(yàn)，再根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果用藥，這樣才能得到理想的治療效果。

由于操作、實(shí)驗(yàn)條件等原因，治療組跟對(duì)照組的傷口大小不完全相等，每天清洗傷口會(huì)對(duì)傷口進(jìn)行一定刺激，這都對(duì)治療效果的對(duì)比可能存在著影響。本實(shí)驗(yàn)只對(duì)比了氯化鈉粉與10%氯化鈉溶液的治療效果，但沒(méi)有考慮氯化鈉粉的劑量與氯化鈉溶液的濃度。

參考文獻(xiàn)：

[1]李鄉(xiāng)城. 四川部分地區(qū)山羊皮下膿腫的細(xì)菌學(xué)分析[D]. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016