乳癌病人血清鳶尾素的表達(dá)及其臨床意義

[摘要] 目的 探討血清鳶尾素（Irisin）在乳癌病人中的表達(dá)及其臨床意義。方法 收集青島大學(xué)附屬醫(yī)院乳腺診療中心46例乳腺浸潤(rùn)性癌病人、30例乳腺纖維腺瘤病人及同期在本院接受體檢的12例健康者血液標(biāo)本。采用ELISA方法檢測(cè)3組空腹血清中Irisin表達(dá)，分析3組之間以及不同病理特征乳癌病人血清Irisin表達(dá)差異。結(jié)果 乳腺浸潤(rùn)性癌組、乳腺纖維腺瘤組、健康人組的血清Irisin表達(dá)水平分別為（2.15±0.53）、（3.08±0.44）、（3.26±0.34） mg/L，乳癌病人血清Irisin水平顯著低于乳腺纖維腺瘤組和健康人組（t=8.03、6.93，P<0.01）；乳腺纖維腺瘤組的血清Irisin水平與健康人組比較差異無顯著性（P>0.05）；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳癌病人血清Irisin表達(dá)水平明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（t=2.38，P<0.05）；Ki67>20%的乳癌病人血清Irisin表達(dá)水平明顯低于Ki67≤20%者（t=2.89，P<0.05）。結(jié)論 血清Irisin表達(dá)水平與乳癌增殖及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，檢測(cè)血清Irisin可能為了解乳癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制、判斷預(yù)后提供參考。

[關(guān)鍵詞] 乳房腫瘤；鳶尾素；淋巴轉(zhuǎn)移；Ki-67抗原

[中圖分類號(hào)] R737.9

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A

[文章編號(hào)] 2096-5532（2018）03-0302-04

鳶尾素（Irisin）是由BOSTROM等[1-2]發(fā)現(xiàn)的一種運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)細(xì)胞因子，Irisin由Ⅲ型纖連蛋白結(jié)構(gòu)域5（FNDC5）經(jīng)蛋白酶水解后形成，其功能包括誘導(dǎo)白色脂肪向棕色脂肪轉(zhuǎn)變，增加能量消耗等[3]，且Irisin可作為運(yùn)動(dòng)激素在代謝疾病治療[4-5]中的潛在靶點(diǎn)。最近發(fā)現(xiàn)，Irisin具有抑制腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)作用[6]。PROVATOPOULOU等[7]發(fā)現(xiàn)Irisin與乳癌有關(guān)，隨著血清Irisin水平升高，乳癌患病風(fēng)險(xiǎn)明顯下降。Irisin表達(dá)與乳癌的臨床病理關(guān)系國(guó)內(nèi)報(bào)道較少。本研究擬檢測(cè)乳癌病人血清Irisin表達(dá)水平變化，分析其在不同病理特征乳癌中差異，探討血清Irisin表達(dá)在乳癌發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

2016年3月—2017年3月，收集在青島大學(xué)附屬醫(yī)院行手術(shù)治療、經(jīng)病理證實(shí)的46例乳腺浸潤(rùn)性癌病人作為實(shí)驗(yàn)組，30例乳腺纖維腺瘤病人及同期在本院接受體檢的12例健康女性作為對(duì)照組，兩組均無高血壓、糖尿病病史，術(shù)前均未進(jìn)行化療、放療。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)、病人知情同意后，留取病人術(shù)前血液標(biāo)本及體檢健康者的血液標(biāo)本，血液離心后取血清與組織標(biāo)本保存在-80 ℃冰箱備用。同時(shí)，收集病人相關(guān)臨床病理資料，包括腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、表皮生長(zhǎng)因子受體（Her-2）、細(xì)胞增殖指數(shù)（Ki67）抗原等信息。

1.2 血清Irisin水平檢測(cè)

入院次日清晨采集空腹靜脈血5 mL，室溫靜置30 min后，3 000 r/min離心10 min，吸取血清，置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)血清Irisin水平，ELISA試劑盒購(gòu)自云克隆科技股份有限公司，嚴(yán)格按照說明書操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有計(jì)量資料數(shù)據(jù)以[AKx-D]±s表示。兩組數(shù)據(jù)的比較采用t檢驗(yàn)；兩組以上數(shù)據(jù)的比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清Irisin在各組中的表達(dá)水平

結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組、纖維腺瘤組、健康組血清Irisin分別為（2.15±0.53）、（3.08±0.44）、（3.26±0.34） mg/L，實(shí)驗(yàn)組血清Irisin表達(dá)水平均顯著低于纖維腺瘤組和健康組（t=8.03、6.93，P<0.01）。纖維腺瘤組血清Irisin水平與健康組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 不同病理特征乳癌血清Irisin表達(dá)水平比較

有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳癌病人血清Irisin表達(dá)水平明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有顯著意義（t=2.38， P<0.05）；Ki67>20%乳癌病人血清的Irisin表達(dá)水平明顯低于Ki67≤20%者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.89， P<0.05）。見表1。

3 討論

Irisin是近幾年發(fā)現(xiàn)的一種肌源性因子[1]，作為新近發(fā)現(xiàn)的運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的過氧化物酶體增殖物激活受體γ共激活因子1α（PGC-1α）依賴性肌肉因子[8]，可促進(jìn)白色脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)樽厣?，發(fā)揮調(diào)節(jié)能量代謝的作用[2，9-10]。有研究顯示，Irisin-FNDC5參與機(jī)體產(chǎn)熱、脂肪轉(zhuǎn)化及肥胖發(fā)生等過程[11-27]。最初，主要集中在通過運(yùn)動(dòng)和相應(yīng)的觀測(cè)值來研究Irisin的功能[4-5，7，20-21]。同時(shí)，Irisin在代謝性疾病的作用也有大量的研究[22-27]。肥胖可通過增加雌激素、炎性反應(yīng)和代謝綜合征的發(fā)生，提高乳癌病人的患病風(fēng)險(xiǎn)及死亡率[25-26]。運(yùn)動(dòng)是PGC-1α-Irisin途徑的唯一激活因素[12-14]，運(yùn)動(dòng)后血清Irisin水平明顯增高。運(yùn)動(dòng)可以降低乳癌的發(fā)生，可能與運(yùn)動(dòng)減肥、增加能量消耗有一定的關(guān)系[15]，但其具體機(jī)制并不明確。研究顯示，Irisin作為脂肪因子在促有絲分裂、細(xì)胞凋亡及血管生成過程中發(fā)揮作用，對(duì)腫瘤細(xì)胞具有抑制作用[7]，是參與調(diào)控多種腫瘤發(fā)生和發(fā)展的因素之一。Irisin在腫瘤中的相關(guān)研究顯示，Irisin在食管癌和胃癌組織中高表達(dá)[23-27]。Irisin在人和小鼠胃組織中表達(dá)水平不同。AYDIN等[24]對(duì)肝臟組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)正常肝和肝癌組織中均表達(dá)Irisin[20]，二者之間并沒有明顯差異。相關(guān)研究顯示，Irisin表達(dá)水平在乳腺侵襲性小葉癌、導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌、浸潤(rùn)性乳頭狀癌和黏液性癌組織中明顯升高[14]。另外，Irisin在多種腫瘤組織中表達(dá)量增多，在不同腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中扮演著重要角色[6-16]。

本研究結(jié)果顯示，在乳癌病人、乳腺纖維腺瘤病人及健康人中，乳癌血清Irisin表達(dá)水平最低。其中Ki67>20%的乳癌病人血清Irisin表達(dá)水平顯著低于Ki67≤20%者。Ki67蛋白是反映細(xì)胞增殖活性的常用指標(biāo)，是與細(xì)胞增殖息息相關(guān)的一種非組蛋白性核蛋白，主要表達(dá)于細(xì)胞核，半衰期短，除了細(xì)胞周期G0期外，所有周期中都存在。有研究表明，Ki67表達(dá)和腫瘤分化程度、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移等有密切聯(lián)系[16]。本文結(jié)果還顯示，不同乳癌腫瘤大小、雌/孕激素受體狀態(tài)、HER2狀態(tài)乳癌病人血清Irisin表達(dá)水平無明顯差異，表明Irisin表達(dá)水平降低與乳癌的發(fā)生和增殖活性高關(guān)系密切。本文研究結(jié)果顯示，乳腺纖維腺瘤病人Irisin表達(dá)水平與健康人比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本文研究結(jié)果與國(guó)外研究結(jié)果一致。GANNON等[18]使用不同濃度的Irisin（0.625～20.000 nmol/L）處理乳癌細(xì)胞，結(jié)果顯示在不影響乳癌細(xì)胞MCF-10a的同時(shí)，Irisin可顯著降低MDA-MB-231和MCF-7惡性乳癌細(xì)胞的擴(kuò)散、生存及遷移能力。本研究結(jié)果還顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳癌病人血清Irisin表達(dá)水平明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。腋窩淋巴結(jié)是乳癌病人發(fā)生轉(zhuǎn)移的主要途徑，也是影響預(yù)后的重要因素[19]。乳癌病人血清Irisin的低表達(dá)可能是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的重要機(jī)制之一。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，血清Irisin與乳癌大小、雌/孕激素受體狀態(tài)、HER2狀態(tài)等均無關(guān)。但因研究所用的樣本量有限，Irisin的表達(dá)水平與乳癌臨床病理特征的關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，Irisin具有抑制腫瘤的生物學(xué)功能，其表達(dá)水平異?？赡芘c乳癌的發(fā)生、增殖及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，檢測(cè)血清Irisin可能為了解乳癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制、判斷預(yù)后提供參考。但其具體分子生物學(xué)機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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